CUE—MATE誘導西門塔爾雜交牛同期發情的效果

摘要：在同期發情方案中，為更加科學合理地使用CUE-MATE陰道埋置栓，提高移植妊娠率，對同批次2組西門塔爾雜交受體牛分別埋植CUE-MATE和CIDR，使用相同同期發情方案，比較發情率，并對CUE-MATE方案中不同發情時間階段的牛群移植受胎率進行對比分析。結果表明：埋植不同陰道栓的受體牛發情率均在90%以上，差異不顯著（90.38% vs 90.00%，P>0.05）；兩地埋植CUE-MATE不同發情時間的受體牛群，移植鮮胚妊娠率無差異（100% vs 100%，P>0.05；100% vs 80%，P>0.05），移植凍胚妊娠率差異不顯著（41.18% vs 28.57%，P>0.05；5769% vs 33.33%，P>0.05），提前發情組凍胚妊娠率下降趨勢明顯。使用CUE-MATE同期發情時，撤栓時間應推遲10～12 h，使得胚胎移植時受體內環境與胚胎發育階段相一致，保證鮮胚和凍胚均可獲得較理想的受胎率。

關鍵詞：同期發情；受體牛；妊娠率；CUE-MATE；CIDR；凍胚；鮮胚

中圖分類號： S823.3 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）07-0213-02

收稿日期：2013-10-14

基金項目：國家科技支撐計劃（編號：2011BAD19B01）；石家莊國際科技合作計劃（編號：12750066A）；國家農業科技成果轉化資金（編號：2013GB2A200043）。

作者簡介：陳龍（1982—），男，甘肅蘭州人，碩士，畜牧師，主要從事動物繁殖生物技術研究。E-mail：chenlong42451@163.com。

通信作者：余文莉，博士，研究員，主要從事動物繁殖生物技術研究。Tel：（010）84924137；E-mail：anboyuwenli@hotmail.com。為提高奶牛的繁殖率，縮短產犢間隔，在牧場繁育管理或者大規模胚胎移植操作中，有必要使用陰道埋植栓等設備進行同期發情。市面上用于同期發情的陰道栓主要有2種：CUE-MATE與CIDR[1-2]，其主要藥物成分是孕酮，含量分別為1.56 g和1.38 g，附著載體為白色螺旋硅膠軟體（圖1）。作用原理是陰道栓埋植入陰道后，緩慢恒定低劑量釋放孕酮，經陰道黏膜吸收直接到達靶器官，通過負反饋作用抑制垂體前葉促性腺激素及其他生長因子的產生，而外源孕激素作用期間不影響黃體的自然消退；維持一定時間后撤栓，體內孕酮含量急劇下降，卵泡發育到成熟的抑制解除，使卵泡細胞發育成熟，同時在雌激素作用下，母牛在同一時間段內表現發情狀況[3-4]。

在胚胎移植實踐中，對同批次受體牛分別埋植CUE-MATE和CIDR，使用成熟的21 d方案進行受體牛同期發情，CUE-MATE處理組部分牛群集體提前發情。本試驗對CUE-MATE方案中不同發情時間的牛群移植陰道栓，并對受胎率進行對比分析，優化適用于CUE-MATE的同期發情方案，以提高胚胎移植妊娠率。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1受體牛河北天和肉牛養殖有限公司和張北華田牧業提供的2胎以內西門塔爾雜交受體牛：產后70 d以上，繁殖系統正常，卵巢有活性，膘情適中。

1.1.2藥品CUE-MATE孕酮栓，由新西蘭Bioniche Animal Health Pty公司生產，含孕酮1.56 g/支；CIDR孕酮栓，由美國輝瑞動物保健品公司生產，含孕酮1.38 g/支；促卵泡素（FSH），由中科院動物所生產，10 mg/瓶；氯前列烯醇（PG），由齊魯動物保健品公司生產，0.322 mg/支；維生素ADE、高錳酸鉀、利多卡因等選用國產優質產品。

1.2方法

1.2.1受體牛同期發情方案（CIDR/CUE-MATE+PG方法）在發情周期的任何一天08：00—10：00放置陰道栓（土霉素粉+CIDR或土霉素粉+CUE-MATE），同時肌注維生素ADE注射液5 mL/頭，當日記為0 d；9 d時的08：00同時肌注PG 0.6 mg/頭和維生素ADE注射液5 mL/頭；12 d時的08：00撤栓；13～14 d全天觀察發情，準確記錄；21 d進行胚胎移植。

1.2.2受體牛發情鑒定13～14 d（撤栓后24 h）開始觀察發情并記錄，以站立穩定、接收爬跨為標準。撤栓后24～36 h接受爬跨定義為提前發情，36～60 h為正常發情。

1.2.3受體牛胚胎移植直腸檢查受體牛黃體發育狀況及子宮健康狀況，結合發情記錄確定移植頭數，保定牛只，高錳酸鉀溫水清洗外陰，采用尾椎硬膜外注射5 mL利多卡因方法麻醉，待尾部松弛后進行非手術法移植，胚胎移入黃體發育側的子宮角深部。

1.2.4妊娠檢查胚胎移植后50～60 d采用直腸把握法進行妊娠檢查。

1.3試驗數據分析

運用卡方檢驗（χ2）作顯著性分析。

2結果與分析

2.1埋植不同陰道栓的受體牛發情時間比較

選擇同批次受體牛分為2組，埋植CUE-MATE和CIDR陰道栓，實施相同的同期發情方案并撤栓后觀察發情。由表1可見，2組受體牛發情率均在90%以上，差異不顯著（9038% vs 90.00%，P>0.05）；CUE-MATE組撤栓后24～36 h有15頭發情，即提前發情，CIDR組撤栓后只有1頭提前發情，其他集中在36～60 h發情，兩者差異顯著（28.85% vs 250%，P<0.05）。

3討論與結論

同期發情的目的是能夠使受體牛在預期時間范圍內集中發情、排卵。目前同期發情的方法已由單純一類激素制劑向陰道栓和激素制劑配合使用方向發展，如近年來發展起來的CIDR+PG、CUE-MATE+PG法等[5-7]。和占星等將CUE-MATE+PG法同期發情方案與2次PG法相比，前者同期化程度和可移植率更高，更適用于規模化牧場集中應用[5，8]。本試驗中受體牛使用CIDR和CUE-MATE 2種陰道栓的同期發情率均高于90%，但是，組間受體牛發情時間出現了差異，CIDR組在撤栓后36 h左右開始正常發情，CUE-MATE組有近1/3牛在撤栓后24 h即出現發情現象，這可能是由于CUE-MATE中孕酮含量較高（1.56 g/支 vs 1.38 g/支），緩釋的孕酮在血漿中濃度也高于CIDR組[9]，對卵泡發育的負反饋抑制作用更強，撤栓后孕酮水平急劇下降更明顯，刺激促性腺激素釋放激素水平升高，促進卵泡發育并成熟的速度更快，因而表現出發情提前的現象。

兩地牧場受體牛均埋植CUE-MATE，實施相同的21 d同期發情方案，都出現一定比例的提前發情牛。以撤栓后 36 h 為界，根據發情時間分組統計移植妊娠率，提前發情牛與正常發情牛的鮮胚和凍胚移植的妊娠率無差異，但是凍胚移植妊娠率前者降低12.61～24.36百分點。這主要是由于正常發情牛集中在撤栓后36～60 h發情，21 d移植正好是受體牛發情后7～7.5 d，保證了胚胎發育階段與受體生理狀況的一致性；而提前發情牛集中在撤栓后24～36 h發情，21 d移植時受體牛處于發情后8 d，一方面凍胚經歷的凍融過程及冷凍保護劑毒性對胚胎細胞骨架、線粒體及透明帶超微結構造成了一定程度不可逆的物理和化學損傷[10]，降低其與母體妊娠信號識別的能力[11]，另一方面冷凍胚胎解凍后復蘇需要一個過程，使其在子宮內的發育滯后于鮮胚，這一滯后也使凍胚與提前發情的受體的同步差更大。因此，凍胚在發情后8 d移植會低于發情后7～7.5 d移植的妊娠率，也低于同時期發情的鮮胚移植妊娠率。

使用CUE-MATE栓處理受體牛群，建議受體牛撤栓時間較常規CIDR方案推遲10～12 h，其他保持一致，以使得胚胎移植時受體所處時間與胚胎發育階段相一致，保證鮮胚和凍胚均可獲得較理想的受胎率。另外，CUE-MATE與CIDR相比較，其栓槍設計直徑較粗，裝槍略顯復雜，埋植速度較慢，但是螺旋軟體與軟骨支架可以方便分離，便于清洗及重復使用，并且持栓率高，達到100%。在實際生產中，須考慮牛群規模、月齡、膘情和日程安排等因素，挑選適宜的陰道栓用于生產，同時結合發情觀察，提高繁殖率。

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