E—cadherin、P53在伴髓樣特征的癌中表達及臨床病理意義研究

摘要：目的 探討E-cadherin、P53在乳腺伴髓樣特征的癌中表達及臨床病理意義。方法 采用免疫組織化學方法檢測42例乳腺伴髓樣特征的癌中E-cadherin、P53的表達。結果 E-cadherin和P53蛋白表達陽性率在乳腺伴髓樣特征的癌中表達分別為81%（34/42）和40%（17/42）。E-cadherin表達陽性率與淋巴結轉移呈顯著相關（P<0.05），而與患者年齡、腫瘤大小及是否遠處轉移無關（P>0.05）；P53表達及陽性程度隨著腫瘤病理組織學分級、淋巴結轉移而增加。結論 E-cadherin和P53蛋白的表達差異是影響乳腺伴髓樣特征的癌預后的重要原因。

關鍵詞：乳腺伴髓樣特征的癌；E-cadherin；P53；臨床病理特征

乳腺癌中髓樣癌較為少見，據統計，約占全部乳腺癌的2.25%～5%左右。本研究通過免疫組織化學的方法檢測乳腺伴髓樣特征的癌中E-cadherin、P53蛋白的表達結合患者臨床病理資料，探討兩者的表達與乳腺伴髓樣特征的癌臨床病理特征的關系。

1資料與方法

1.1一般資料 收集江西省南昌市第三醫院2010～2014年收治的42例乳腺伴髓樣特征的癌的手術切除標本，均有完整的臨床病理資料。病例全部為女性，年齡30～69歲。患者術前均未接受相關治療。

1.2方法 乳腺腫瘤標本均經10%中性福爾馬林固定，常規石蠟包埋，切片厚度3μm，連續切片裱片于用多聚賴氨酸處理的玻片上，60℃烘烤4h備用。免疫組化標記采用EnVision二步法：常規石蠟切片脫蠟至水，高壓鍋抗原修復，每張切片滴加1滴3%過氧化氫溶液，室溫下孵育10 min，以消除內源性過氧化物酶；每張切片滴加1滴E-cadherin、P53抗體，37℃孵育60 min ，每張切片滴加1滴二抗，室溫孵育30 min ，DAB顯色，蘇木素復染，脫水，透明，封片。E-cadherin、P53試劑盒均購自北京中杉金橋有限公司，用已知的陽性片作為陽性對照，用PBS代替一抗作為陰性對照。

1.3結果判定 結果判定，根據陽性細胞所占比例及著色強度，綜合制定免疫組化半定量計分標準。陽性細胞計分<10%，0分；11-25%，1分；26～50%，2分；51～75%，3分；>75%，4分。著色強度計分：弱，1分；中，2分；強，3分。兩個分值相加為最終判定結果：≤2分（-）；3分（+）；4-5分（++）；6-7分（+++）[1]。

1.4統計學處理 應用SPSS16.0統計軟件進行數據處理，E-cadherin、P53表達在研究對象組間的差異性采用χ2檢驗。檢驗水準a=0.05。

2結果

2.1臨床病理資料 發病年齡：患者發病年齡為30～69歲；發病部位為左乳19例，右乳23例。腫瘤大小分別為≤2cm13例，2～5cm25例，≥5cm4例。臨床分期分別為I期+II期23例，III期+IV期19例。腋下淋巴結轉移為率為19%（8/42）。組織學分級為2級19例，3級23例。

2.2鏡檢 鏡下合體細胞結構在腫瘤組織中占>75%；組織學上邊界清楚或具有推擠性邊緣；沒有管狀分化；伴有顯著、彌漫的淋巴漿細胞浸潤；腫瘤細胞圓形，胞漿豐富，具有高級別多形性泡狀核，含一個或多個核仁。有大量核分裂象，有時可見異型巨細胞。

2.3 E-cadherin、P53在腫瘤組織中的表達及與臨床病理特征的關系（見表1） E-cadherin和P53蛋白表達陽性率在乳腺髓樣癌中表達分別為81%（34/42）和40%（17/42）。E-cadherin蛋白表達陽性率與淋巴結轉移呈顯著相關（P<0.05），而與患者年齡、腫瘤大小及是否遠處轉移無關（P>0.05）； P53蛋白表達率及陽性程度隨著病理組織學分級、淋巴結轉移而增加，與患者年齡、部位、腫瘤大小、臨床分期等無關。

3討論

伴髓樣特征的癌是乳腺癌中的一種特殊類型，在2013版WHO腫瘤組織學分類中，通常，下列標準用來診斷伴髓樣特征的癌：合體細胞結構在腫瘤組織中占>75%；組織學上邊界清楚或具有推擠性邊緣；沒有管狀分化；伴有顯著、彌漫的淋巴漿細胞浸潤；腫瘤細胞圓形，胞漿豐富，具有高級別多形性泡狀核，含一個或多個核仁。有大量核分裂象，有時可見異型巨細胞。\"不典型髓樣癌\"和\"伴髓樣特征的癌\"曾用來診斷不能全部滿足上述標準的腫瘤。實際應用這些診斷標準存在困難，導致不同觀察者間診斷的重復性差。因此我們推薦將經典型髓樣癌、不典型髓樣癌和伴髓樣特征的非特殊類型浸潤性癌籠統劃為一組腫瘤，稱為伴髓樣特征的癌。

上皮鈣依賴黏附素（E-cadherin）是一類依賴于鈣離子的細胞表面糖蛋白，主要參與同種細胞間的連接，分布于各種上皮組織中，對維持上皮細胞間的形態和組織以及完整性有重要作用，其編碼基因位于16q22～q23.1。它的高表達使腫瘤呈膨脹性生長，瘤細胞之間保持密切的接觸，使腫瘤組織難以脫離原發病灶而侵入周圍的組織及血管、淋巴管，因此能起到抑制腫瘤細胞的侵襲及轉移的作用，所以此類患者預后相對較好。本實驗中，乳腺伴髓樣特征的癌中E-cadherin與淋巴結的轉移率呈負相關，有淋巴結轉移者E-cadherin表達陽性率降低，提示E-cadherin表達陽性者淋巴結發生轉移的幾率降低，可以作為提示預后判斷的指標之一。

人類P53基因定位于染色體17p13.1，全長16000-20000bp，由11個外顯子和10個內含子組成，編碼由393個氨基酸殘基組成、相對分子量為53000的蛋白。野生型P53的抗腫瘤作用主要是阻滯G1/G0期使細胞不能進入S期，從而抑制細胞的增殖。通常P53在細胞內含量較少，半衰期短，免疫組化法不易檢測到，也就是說，免疫組化法檢測到的P53通常都是突變型的P53。本研究中，P53表達陽性率及陽性程度隨著腫瘤病理組織學分級、淋巴結轉移而增加，與相關文獻報道一致，說明乳腺癌腫瘤細胞的增殖與腫瘤細胞分化和淋巴道轉移密切相關；P53蛋白的高表達可能是導致乳腺癌生物學特征的重要原因之一。病理組織學分級和淋巴結轉移是評估病情嚴重程度、制定患者的治療方案、客觀評價療效以及幫助判斷預后的重要因素。P53蛋白在乳腺癌中的高表達也說明乳腺癌患者進展更快、侵襲性更強、預后更差。因此，P53蛋白的檢測已逐漸被作為反映腫瘤細胞增殖速度和提示腫瘤預后判斷的較好的生物學標記。

參考文獻：

[1]李少林，陳曉品，吳凱南.乳腺癌的生物學特性和臨床對策[M].北京：科技出版社，2004：15.編輯/孫杰