摘要:目的 觀察并研究革蘭陰性菌引起的血培養(yǎng)陽性標本直接細菌鑒定和藥敏的應用方法與結果。方法 選取我院自2011年9月~2013年9月所收集的血培養(yǎng)陽性標本共計100份作為研究對象,所有標本均為該期間內分離的非重復性標本。基于VITEK方法對血培養(yǎng)陽性標本進行直接細菌鑒定。同時以API檢出結果為金標準,對VITEK直接細菌鑒定于藥敏應用結果的符合率情況進行觀察分析。結果 VITEK直接細菌鑒定方法下細菌鑒定總符合率為98.00%(98/100),藥敏鑒定結果總符合率為98.37%(964/980),與API金標準方法檢出結果對比無明顯差異,P>0.05,不具有統(tǒng)計學意義。結論 基于VITEK方法對血培養(yǎng)陽性標本進行直接細菌鑒定與藥敏分析檢出結果可靠,操作簡便,可為臨床及時修正用藥提供依據(jù),值得進一步推廣。
關鍵詞:革蘭陰性菌;血培養(yǎng)陽性標本;直接細菌鑒定;藥敏
為進一步分析革蘭陰性菌引起的血培養(yǎng)陽性標本直接細菌鑒定和藥敏的應用方法與結果,本文對我院所收集100份血培養(yǎng)陽性標本展開詳細分析。
1資料與方法
1.1一般資料 選取我院自2011年9月~2013年9月所收集的血培養(yǎng)陽性標本共計100份作為研究對象,所有標本均為該期間內分離的非重復性標本。選取大腸埃希菌標準菌株為ATCC 25922菌株,銅綠假單胞菌標準菌株為ATCC 27853菌株(提供方為衛(wèi)生部臨床檢驗中心)。
1.2方法
1.2.1儀器與試劑 血培養(yǎng)陽性標本分析過程中所涉及儀器與試劑包括:①血培養(yǎng)儀;②抗生素中和需氧血培養(yǎng)瓶;③真空血清分離管;④全自動微生物分析儀;⑤血平板;⑥藥敏紙片。
1.2.2檢測方法 基于VITEK方法對血培養(yǎng)陽性標本進行直接細菌鑒定。具體操作方法為:使用無菌注射器抽取陽性瓶內血培養(yǎng)標本,抽取劑量為8.0 mL,注入BD(8.0 mL)真空血清分離管。離心條件控制為3000.0 r/min,持續(xù)離心處理10.0 min,剔除上層血清樣本,使用無菌吸管對灰白色細菌層進行吸取處理,放置于無菌容器中,加入適當無菌生理鹽水,充分混合。用于稀釋可溶性血紅蛋白試劑同樣給予離心處理(3000.0 r/min,離心處理持續(xù)10.0 min),剔除上層血清備用。調制革蘭陰性桿菌1.0 McF,抽取50.0 uL劑量菌液,與濃度為0.45%生理鹽水1.8 mL充分混合,靜置24.0 h后直接鑒定細菌構成,同步獲取藥敏試驗結果。同時,抽取次代培養(yǎng)純菌落,參照API方法進行細菌鑒定與藥敏試驗。以API檢出結果為金標準,對VITEK直接細菌鑒定于藥敏應用結果的符合率情況進行觀察分析。
1.3統(tǒng)計學處理 本文數(shù)據(jù)使用SPSS 17.0軟件進行分析與計算,計數(shù)資料以%表示,以χ2檢驗,可信區(qū)間95%,檢驗水準為0.05,當P<0.05時為差異顯著,且具有統(tǒng)計學意義。
2結果
2.1革蘭氏陰性菌引起血培養(yǎng)陽性標本直接細菌鑒定結果分析 VITEK直接細菌鑒定方法下細菌鑒定總符合率為98.00%(98/100),與API金標準方法檢出結果對比無明顯差異,P>0.05,不具有統(tǒng)計學意義,見表1。
2.2革蘭氏陰性菌引起血培養(yǎng)陽性標本藥敏結果分析 VITEK直接細菌鑒定方法下藥敏鑒定結果總符合率為98.37%(964/980),與API金標準方法檢出結果對比無明顯差異,P>0.05,不具有統(tǒng)計學意義。
3討論
有關研究數(shù)據(jù)顯示:藥敏試驗要取得快速結果,最主要方法在于:以臨床標本自身作為接種物對象[1-2],雖其結果與常規(guī)純菌法檢測結果無法得到100.00%符合,但同樣能夠對細菌藥敏的基本情況加以反應。本次研究中,以API檢測結果為金標準,分析得知:VITEK直接細菌鑒定方法下細菌鑒定、藥敏鑒定結果與API金標準方法檢出結果對比無明顯差異,P>0.05,不具有統(tǒng)計學意義。該數(shù)據(jù)證實:在臨床各類常見細菌及藥敏對象中,VITEK直接鑒定方法都具有極高的可信度。結合表1中的數(shù)據(jù)可知:在對木糖氧化產堿桿菌以及睪丸酮叢毛單胞菌進行檢驗的過程當中,造成細菌鑒定出現(xiàn)誤差的主要原因為:由于以上兩種細菌自身生長速度相對比較緩慢,需要在持續(xù)次代培養(yǎng)2.0d以后,方可形成直觀菌落組織。從這一角度上來說,對于以上類型生長緩慢細菌菌種而言,VITEK直接鑒定方法存在一定誤差,值得重視。同時,在藥敏分析的過程當中,VITEK直接鑒定符合率較高,其機制在于:直接鑒定分析儀可支持參照細菌天然耐藥性表現(xiàn),檢測耐藥機制[3],從而對藥敏結果進行修正,原則上可有效避免產生誤差問題。
綜上所述:基于VITEK方法對血培養(yǎng)陽性標本進行直接細菌鑒定與藥敏分析檢出結果可靠,操作簡便,可為臨床及時修正用藥提供依據(jù),值得進一步推廣。
參考文獻:
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