前列腺腫瘤標志物研究新進展

隨著人民生活水平的不斷提高，平均壽命也不斷延長，老年男性前列腺腫瘤的發病率也日益增高，同時診療技術的進步和部分新腫瘤標志物的發現， 使得前列腺腫瘤在早期能被正確診斷并接受合理的治療。本文研究了近幾年新發現的最有價值的前列腺腫瘤標志物，現做一綜述。

1AMACR(P504S)

AMACR/P504S全稱a-甲?；o酶 A消旋酶。2000年， Xu[1]等利用 cDNA文庫減影與高通量基因芯片聯合篩選的方法， 在良性和惡性前列腺組織中發現了3 種蛋白的基因：P503S、 P504S和 P510S， 其中 P504S是含1621個堿基對的cDNA， 具有開放式閱讀框架， 編碼了382個氨基酸的蛋白質。

2001年，Jiang[2]等首次用P504S的特異性單克隆抗體研究了207個病例， 其中包括137例前列腺癌和70例良性前列腺組織，發現AMACR在所有前列腺癌中均顯示了胞質顆粒的強染色， 而且與癌癥的Gleason分級無關， 在92％的病例中顯示了彌漫(腫瘤中>75％的部分)的染色。相對地， 173 /194(88%)良性前列腺組織， 其中包括56/67 (84％) 良性前列腺病例和115/127( 91％) 的癌旁良性腺體， 其AMACR染色均為陰性。其余的良性前列腺組織顯示了P504S呈局灶性弱陽性， 這些正常腺體的染色方式和在癌細胞中不同， 而且很容易區分。Luo[3]等這一發現首次提示了AMACR/P504S是一種具有高敏感性和高特異性的前列腺癌陽性標記物。Yang[4]等對48例前列腺癌組織和32例良性前列腺增生組織分別進行了AMACR免疫組化法染色， 結果48例前列腺癌組織染色全部為陽性， 而32例良性前列腺增生組織全部為陰性 。Sreekumar[5]等通過蛋白質印跡法分析顯示， AMACR 在前列腺癌組織中的表達是良性前列腺組織的36倍。由此可見，AMACR可以用來鑒別前列腺癌和良性前列腺增生。

高級別前列腺上皮內腫瘤( prostatic imraepithelial neoplasia，PIN)是前列腺癌的一種癌前病變。研究發現AMACR (P504S )在 PIN中有表達， 這表明AMACR不僅僅出現于前列腺癌中，也出現于癌前病變[2]。提示P504S還可以作為一種分子標記物，用來監測前列腺癌的早期發展和癌前病變。前列腺不典型腺瘤樣增生 (atypicaladenomatoushyperplasia， AAH)也被稱為前列腺腺病， 其特征是前列腺腺體以異常的結構形式增生， 而沒有顯著的細胞學不典型性。在某些病例中， 鑒別AAH與前列腺癌可能有困難。姜眾[6]等研究發現，大多數 AAH病例 P504S呈陰性，因此AMACR在鑒別大多數AAH與前列腺癌時具有診斷學價值。

2Annexin I

Annexin I是鈣依賴磷脂結合蛋白家族成員之一 ，是表皮生長因子受體( EGFR ) 激酶和蛋白酶C的底物， 在上游特異性調節細胞外信號控制的激酶級聯反應，還參與細胞信號傳導、細胞分化、細胞遷移及細胞相互作用等，與腫瘤的發生發展及轉移相關。Annexin I在不同正常組織中的表達有差異，在正常食管和宮頸鱗狀上皮、 前列腺腺上皮及外周血炎細胞Annexin I高表達， 而在肝細胞、乳腺導管上皮及胃腸道腺上皮 Annexin I不表達。 一般情況下，Annexin I表達高的組織發生惡變后， 表現為相應的腫瘤中Annexin I表達降低， 而Annexin I表達低或不表達的組織發生惡變后， 表現為相應的腫瘤中Annexin I表達增高。

Paweletz[7]等研究證實Annexin I 在正常食管、前列腺上皮細胞呈高表達，當該組織發生惡變時，Annexin I表達明顯下調，并且在高度侵襲腫瘤表達常常缺失，提示Annexin I 表達下調或缺失與食管癌、 前列腺癌發生發展有關。Kang[8，9]等研究發現Annexin I在90％的高度細胞內瘤變(HGPIN)和早期前列腺癌中表達下調。

4Clandin-3

Clandin是一類跨膜緊密連接蛋白，有32多個家族成員，分子量在17~27kDa之間，其主要作用是維持細胞的極性和細胞間屏蔽功能。緊密連接蛋白的異常表達使上皮滲透屏障破壞，細胞極性喪失 ，細胞間粘附力下降，導致腫瘤的發生發展[12~14]。

Clandin-3跨膜蛋白在細胞間的傳輸轉運著重要作用， 而緊密連接又是細胞粘附功能的基礎[15]，Clandin-3與前列腺腫瘤的發生發展密切相關。李家兵[16]等應用半定量逆轉錄聚合酶鏈反應( RT- PCR)檢測34例前列腺癌組織和12例前列腺增生組織的Clandin-3mRNA的轉錄水平，結果顯示Clandin-3在前列腺癌組織中的表達明顯高于良性前列腺增生組織， 差異有顯著性(P<0.05)。Clandin-3在前列腺癌中的表達與腫瘤病理分級和 TNM分期無明顯相關關系(P>0.05)。

4Bag-1

Bag-1是一種重要的細胞抗凋亡基因， 在前列腺癌的發病及前列腺癌細胞逃避凋亡的過程中可能具有不容忽視的重要作用。研究表明Bag-1 在正常組織中幾乎不表達， 而在乳癌、 肺癌、 前列腺癌 、 腎癌，膀胱癌等中都有陽性表達[18]。Krajewska[19]等測定64例前列腺癌組織中 Bag-1 表達情況， 認為 Bag-1的高表達有助于前列腺癌向更具侵襲性轉化。孟慶超等[20]對54例前列腺癌研究發現Bag-1 在前列腺癌組織中表達率為 62.2％， 在前列腺增生組織中表達率為20.0％，二者差別有顯著意義；并且Bag-1在前列腺癌組織中表達水平與腫瘤分級、 分期及預后密切相關。前列腺癌的病理分級和臨床分期越高， 其表達強度相對越高；前列腺癌術后生存時間越長，其Bag-1的表達水平越低。Bag-1與腫瘤分級、 分期及預后具有顯著相關性， 但與前列腺癌的病理細胞類型無明顯相關性， 在分化低、 分期晚及生存期較短的病例中， 其表達強度較高。說明Bag-1與前列腺癌的發生發展相關， 且參與了腫瘤的惡性分化過程。

5P63

P63是P53腫瘤抑制基因的同源性基因， 位于染色體3q27-29， 它在不同上皮的基底細胞胞核選擇性表達，是一種特異性和敏感性較高的新的基底細胞標記物。P63特異性和敏感度強于CK34BE12， 用于前列腺良、惡性病變的鑒別較理想[21]。Signoretti[22]等研究發現， 在前列腺組織中P63僅表達于基底細胞， 而良性分泌細胞和 PCa中始終無表達。Weinstein[23]等也認為P63的陰性表達是PCa的重要指標。此外，P63常與AMACR聯合應用于前列腺癌的診斷， 在一張切片上同時觀察兩種抗原在前列腺病變組織中的不同表達情況， 一種標記物陽性定位于細胞漿， 另一種為細胞核著色，同步從正反兩方面相互印證， 互相補充。研究發現當 AMACR呈陽性表達， 而P63染色陰性時，結合HE切片基本可確認為癌，相反若P63陽性， 腺體周圍可見連續基底細胞圍繞， 而 AMA CR呈陰性表達， HE切片組織未見異型性改變，表明為良性病變， 可排除癌[24，25]。

參考文獻：

[1]Xu J， Stolk JA， Zhang X， et al.Identification of differentially expressed genes in human prostate cancer using subtraction and microarray[J].Cancer Res，2000，60(6):1677-1682.

[2]Jiang Z， Woda BA， Rock KL， et al.P504S: a new molecular marker for the detection of prostate carcinoma[J].Am J Surg Pathol，2001，25(11):1397-1404.

[3]Luo J， Zha S， Gage WR， et al. Alpha-methylacyl-CoA racemase: a new molecular marker for prostate cancer[J].Cancer Res，2002，62(8):2220-2226.

[4]Yang XJ， Laven B， Tretiakova M， et al.Detection of alpha-methylacyl-coenzymeA racemase in postradiation prostatic adenocarcinoma.[J]. Urology，2003，62(2):282-286.

[5]Sreekumar A， Laxman B， Rhodes DR， et al. Humoral immune response to alpha-methylacyl-CoA racemase and prostate cancer[J].J Natl Cancer Inst，2004， 96(11):834-843.

[6]姜眾，馬珂. AMACR/P504S的發現及其在前列腺癌診斷中應用[J]. 臨床與實驗病理學雜志，2007， 23(3): 262-265

[7]Paweletz CP， OmsteinDK， RothMJ， eta1． Loss ofannexinIcorrelates with early onset of tumorigenesis in esophageal and prostate carcinoma[J]. Cancer Res，2000，60(22):6293-6297.

[8]Kang JS， Calvo BF， MaygardenS J， et a1． DysregulationofannexinIproteinexpressioninhigh-grade prostaticintraepithelial neoplasiaand prostatecancer [J]． ClinCancerRes，2002，8 (1)：117-123.

[9]Sakaguchi M ， Murata H， Sonegawa H， et al. Truncation of annexinA1is a regulatory lever for linking EGF singaling with cytosolic phospholipase A2 innormal and m alignant squamous epithelial cells[J]. J Biol Chem，2007， 282(49):35679-35686.

[10]Berstein LM，Kvatchevskaya JO，PoroshinaTE，et al.Insulin resitance，its consequences for the clinical course of the disease，and possibilities of correction in endometrial cancer［J］.J Cancer Res Clin Oncol，2004，130(11):687-693.

[11]Rose DP，Komninou D，Stephenson GD.Obesity adipocytokines and insulin resistance breast cancer［J］.Obes Rev，2004，53(4):153-165.

[12]Ishida M， Kushima R， Okabe H， et al. Claudin expression in rectal well-differentiated endocrine neoplasms (carcinoid tumors)[J]. Oncol Rep，2009，21(1):113-117.

[13]FritzscheFR，OelrichB，Johannsen M， et al. Claudin-1 protein expression is a prognostic marker of patient survival in renal cell carcinomas[J]. Clin Cancer Res，2008 ，14(21):7035-7042.

[14]Chao YC，Pan SH， YangSC， et al. Claudin-1 is a metastasis suppressor and correlates with clinical outcome in lung adenocarcinoma[J]. Am J Respir Crit Care Med，2009，179(2):123-133.

[15]Rangel LB， Sherman-Baust CA， Wernyj RP， et al. Characterization of novel human ovarian cancer-specific transcripts (HOSTs) identified by serial analysis of gene expression[J]. Oncogene，2003，22(46):7225-7232.

[16]李家兵， 李錦秀，姚惠. Clandin-3mRNA在前列腺癌組織中的表達及意義[J]. 川北醫學院學報.2009，24:(3)：238-240

[17]Stattin PR，Stefan S，Hallmans GR，et al.Leptin is associated with increased prostate cancer risk:a nested case referent study ［J］.J Clin End Met，2001，86(4):1341-1345.

[18]TangS C，Shaheta N， ChemenkoG， eta1．Ex pression ofBAG-1in invasive breast carcinomas [J]． JClin Oncol， 1999，17(6):1710-1719.

[19]Maryla K，Bruce C T，AhmedS， et a1．Expressionof bag-1protein correlateswith aggressive behavior of prostate cancer[J]. Prostate， 2006， 66(8):801-810.

[20]孟慶超、王禾、于磊，等. Bag -1及 Bcl-2在前列腺癌組織中的表達及意義[J]．現代腫瘤醫學，2007，15（3）：366-368.

[21]Shah RB， Zhou M， LeBlanc M， et al.Comparison of the basal cell specific markers， 34betaE12 and p63， in the diagnosis of prostate cancer[J]. Am J Surg Pathol，2002，26(9):1161-1168.

[22]SignorettiS，WaltregnyD， DilksJ，et a1．p63 is a prostate basal cell marker and is required for prostate development[J]． AmJ Pathol，2000，157(60)：1769-1775.

[23]WeinsteinMH， Signoretti S， Loda M. et al.Diagnostic utility of immuno- histochemical staining for p63， a sensitive marker of prostatic basal cells[J]. Mod Pathol，2002，15(12):1302-1308.

[24]Jiang Z， Li C， Fischer A， et al．Using an AMACR (P504S)/34betaE12/p63 cocktail for the detection of small focal prostate carcinomain needle biopsy specimens[J]. Am J Clin Pathol. 2005，123(2):231-236.

[25]Sanderson SO， Sebo TJ， Murphy LM， et al. An analysis of the p63/alpha-methylacyl coenzyme A racemase immunohistochemical cocktail stain in prostate needle biopsy specimens and tissue microarrays[J]. Am J Clin Pathol，2004，121(2):220-225.

編輯/哈濤