蛋白質組學在中醫證候學領域的研究

摘要：本文主要概述了中醫證候學與蛋白質組學結合的原理，回顧了近5~10年來蛋白質組學技術在中醫證候學中的應用，并對未來中醫證候蛋白質組學的發展進行展望。拓展了蛋白質組學在中醫學方面的應用領域，從新的視角闡釋中醫理論的內涵。

關鍵詞：中醫證候； 蛋白質組學； 中醫基礎研究

Application of Proteomics in the Field of TCM Syndrome

HONG Ming-chao1，MAO Zhu-jun2

(1.Putuo District Shiquan Street Community Health Service Center，Shanghai 200061，China;2.Longhua Hospital Affiliated to Shanghai University of Traditional Chinese Medicine，Shanghai 200033，China)

Abstract：This paper summarized the main TCM Syndromes of combination principle and proteomics， reviewed the application of proteomics technology in the TCM syndromes in 5~10 years， and the future development of Chinese medicine syndrome proteomics prospect. Expand the application fields of proteomics in medicine， explain the meaning of the theory of traditional Chinese medicine from a new perspective.

Key words：TCM syndromes; Proteomics;Basic research of traditional Chinese Medicine

證候是中醫學的重要內容，指導著中醫對疾病發生、發展及其表現的認識，是認識疾病和辨證論治的主要依據。中醫證候研究的關鍵在于從不同的疾病或同一疾病的不同病理階段找出共同的病理環節，尋找證候的物質基礎和發生機理。近年來，中醫證候學的發展和蛋白質組學進行交叉，以其獨特的理論與視角， 給中醫理論賦予現代最前沿的科學內涵。

1理論基礎

在中醫學理論中，辨證論治是最顯著的特點之一，證候則是辨證論治的核心。所謂證候，是在廣泛收集臨床癥狀、體征的基礎上，對疾病過程中某一階段的病理概括。由于它包括了病變的部位、原因、性質以及邪正關系，反映出疾病發展過程中某一階段的病理變化的本質，因而它比癥狀更全面、更深刻、更正確地揭示了疾病的本質，并可以表現出\"同病異證、異病同證\"。

證候研究是中醫基礎研究的一個關鍵的科學問題，它也是連接臨床和基礎理論的橋梁。在證候規范化研究中，證候的診斷標準的研究是一項主體工作，也是證候規范化研究的重點和難點。

隨著基因圖譜的完成 ，生物醫學研究進入后基因組時代 ，蛋白質作為生命活動的功能物質成為人們的研究熱點[1]。蛋白質組學的建立為中醫證本質的研究提供了有效的研究手段。從中西醫結合的角度，中醫證本質的含義是指引起證發生發展的物質基礎，這些物質決定著證發生發展的動態變化過程，是在證發生發展過程中產生的特殊物質[2，3]。利用蛋白質組學研究中醫的\"證\"，可以揭示與某一證候相關的所有蛋白質及其特征，在分子水平上闡明證的本質[4]。

2應用研究

近年來應用蛋白質組學技術進行的證候基礎研究主要有動物模型和臨床實驗兩方面。

2.1動物模型鐘小蘭等以束縛制動法制備肝郁證大鼠模型， 二維凝膠電泳(22DE) 分離大鼠血清蛋白質， 獲得差異表達蛋白質；利用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALDI2TOF2MS) 和數據庫分析鑒定差異表達蛋白質，發現6個具有明顯表達差異的蛋白質斑點，證實從蛋白質組學的角度研究證實質是可行的[5]。

2.2臨床實驗按照目前所臨床采集的研究標本的種類分類，可分為血液及舌苔兩種類型。

2.2.1血清學研究劉希成等利用雙向電泳分析的老年體虛腎陽虛患者和正常人的血清樣本，對比分析pH4～7范圍的22DE譜圖，共鑒定出49種差異蛋白質，其中有10 種在腎陽虛血清中特異表達，有6種在健康組血清中特異表達。蛋白功能分析發現，其中33種蛋白質的差異表達與腎陽虛證密切相關，為闡明中醫腎陽虛證的機理提供了一條新途徑[6-7]。

曾星等應用雙向電泳技術分析原發性高血壓肝陽上亢患者及正常對照者外周血單個核細胞的蛋白圖譜，結果發現高血壓肝陽上亢病例獨自所有的點有515個，可能與高血壓肝陽上亢證候相關。

王憶勤、李福鳳等采用表面增強激光解吸離子化蛋白質芯片分析儀對例慢性胃炎濕證、例濕證治療患者及例正常人血清蛋白質表達譜進行研究，發現慢性胃炎濕證患者蛋白質質譜出現高表達趨勢其波峰基本在10個單位以上，濕證治療患者與正常人上述波譜峰呈低表達趨勢濕證治療患者波峰基本在10個單位左右或以下，正常人波峰基本在5個單位以下，證實血清蛋白質組學分析對探索慢性胃炎濕證的生物學理論基礎有一定意義。

何磊[8]等采用SELDI-TOF-MS蛋白芯片技術對慢腎衰患者濕證組與濕證治療組的血清蛋白質表達譜峰進行研究，并運用層次聚類分析和主成分分析對濕證組和濕證治療組進行分析，發現的6個差異蛋白質譜峰與這兩組相關聯系較密切的血清蛋白質因子，且濕證組的差異蛋白質譜峰表達值低于濕證治療組；中醫虛證各證型組之間的差異蛋白質譜峰能在一定程度上區別各證型組。

2.2.2舌苔研究背景：舌診在中醫學中占有十分重要而獨特的地位。用現代科學方法闡明舌苔原理、實現舌苔的客觀化、微觀化，是中醫現代化基礎研究中的一個重要課題。近年來，也有研究者運用現代生命科學前沿的蛋白質組學技術探討舌苔原理及其現代生命科學本質內涵，拓展了蛋白質組學在中醫學方面的應用領域，從新的視角闡釋中醫理論的內涵。

程亞偉等對慢性腎功能衰竭中醫濕證、濕證治療患者與正常對照組人群舌苔上清液樣本進行蛋白質組學研究，建立了基于蛋白芯片的舌苔上清液中蛋白的提取方法，應用SELDI-TOF-MS技術篩選出慢性腎衰組與正常對照組舌苔樣本之間有13個差異蛋白質譜峰有統計學意義，為慢性腎衰的早期診斷提供了客觀依據。并篩選出慢性腎衰中醫濕證組、濕證治療組及正常對照組之間有11個差異蛋白質譜峰有統計學意義，并發現四個差異質譜峰在慢性腎衰中醫濕證的發生發展中可能具有一定的意義。

參考文獻：

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[8]何磊，等.基于SELDI蛋白芯片技術的慢性腎功能衰竭中醫濕證的血清蛋白組學研究[J].中華中醫藥雜志，2010，11:1892-1894.編輯/哈濤