摘要:目的 探討抗卵核抗體、抗卵清抗體、抗牛血清抗體和抗傷寒多糖抗體在不同年齡性別人群中的分布特點及與年齡性別的關系。方法 隨機挑選體檢正常人,ELISA檢測四種抗體水平。結果 抗卵核抗體(P<0.01)和抗傷寒多糖抗體(P<0.05)在不同年齡組差異有統計學意義,且在老年組中該抗體對數單位含量偏低;其余兩種抗體(P>0.05)在不同年齡組差異無統計學意義。這四種抗體在不同性別組差異均無統計學意義(P>0.05)。結論 抗卵核抗體和抗傷寒多糖抗體受年齡影響,其它兩種抗體未發現這種現象。四種抗體均不受性別因素影響。
關鍵詞:天然抗體;年齡;性別;分布特點
大量事實表明,幾乎所有脊椎動物體內,在未經任何抗原免疫的情況下,都廣泛存在針對種類繁多的自身成分的抗體,即天然抗體(natural antibody)。天然抗體以多種形式存在,已發現天然抗體具有三種類型,它們是IgM、IgG和IgA。胚胎及新生兒時期天然抗體以IgM為主要類型,而在成人天然抗體絕大部分屬于IgG類型[1]。天然抗體在正常人體內普遍存在,但其在不同年齡、不同性別人群中的分布特點如何,目前尚無相關報道,與年齡性別因素有無關聯尚不清楚。所以我們對此試驗,研究其在不同年齡、性別正常人群中的分布特點及與年齡性別的關系。
1資料與方法
1.1一般資料 從大連血液中心和大連醫科大學附屬二院體檢中心隨機挑選體檢正常人121人(男54人、女67人、平均年齡42.81歲)。分為老年組(≥70歲,男18人、女19人,平均年齡為77.68歲)與青年組(<40歲,男33人、女41人,平均年齡23.82歲)及男性組(54人,平均年齡44.83)與女性組(67人,平均年齡41.18歲)。
1.2儀器和試劑 酶標儀,羊抗人IgG酶標抗體、底物與顯色劑、洗滌液均購于北京生物制品研究所。
1.3方法
1.3.1四種抗原 卵黃抗原來源于市售新鮮雞蛋、卵清蛋白購于Sigma、牛血清蛋白購于Roche、傷寒O901診斷菌液購自寧波天潤生物藥業有限公司,傷寒多糖抗原的制備[2]。
1.3.2檢測方法 劉輝等[3]證實,以不同來源的雞卵核為抗原,用間接ELISA方法檢測可提取性核抗原的抗體(ENA抗體)與經典的檢測ENA抗體的方法具有很好的一致性,可用于自身免疫病抗核抗體(ANA)的檢測,且證實不同來源的雞卵核對實驗結果無影響。用ELISA間接法[4]測定這四種天然抗體的效價水平。四種抗原包被板的制備:分別稱取或量取相應量的上述四種抗原,分別用pH 9.6碳酸鹽緩沖液稀釋溶解。卵核抗原板的制備。卵清抗原包被液制備:稱取卵清蛋白5 mg,量取pH 9.6碳酸鹽緩沖液100 mL稀釋溶解,配制成濃度為5 mg/100 mL的卵清蛋白溶液。同理,配制濃度為25 mg/100 mL的牛血清蛋白包被液。量取傷寒O901診斷菌液5 mL,用pH 9.6碳酸鹽緩沖液100 mL稀釋,配制成1∶20的傷寒多糖菌液。用配制好的抗原包被液包被聚苯乙烯酶標板,包被過程如同卵核抗原液包被。抗牛血清蛋白抗體的測定過程中樣品及酶標二抗的稀釋液用30%羊奶,這樣避免或盡量減少發生交叉反應,便于準確測定待測樣品中的抗牛血清蛋白抗體。
1.4統計學方法
2結果
2.1同一樣品在除卵核抗原板之外的其他三種抗原板上連續做16次,1次/d。用上述測定計算方法得知該樣品在這三種不同抗原板上的抗體對數單位含量,見表1。
2.2這四種抗體在不同性別組不同年齡組中的抗體對數單位含量,見表2、表3。
3討論
大量研究考證,正常機體內普遍存在多種天然抗體。因此我們將研究它們在不同年齡、不同性別體檢正常人群中的分布特點,進而論證他們在機體內的含量多少是否與年齡性別有關,對其關聯程度和關聯機制深入研究。表明我們建立的方法檢測這三種相應的抗體較一般方法穩定性好,具有可重復性,可用于這些抗體的測定。
關于天然抗體對數單位水平與年齡性別的關系說法不一。結果還表明四種天然抗體效價水平不隨性別的改變而改變。因此可以認為抗卵黃抗體和抗傷寒多糖抗體和年齡有關,四種抗體均與性別因素無關。臨床上許多指標的參考值都受年齡或性別的影響,如紅細胞計數和血紅蛋白量 。那么出現這種情況的原因和機制是什么呢?是由遺傳因素決定?還是受環境因素影響?尚需進一步探討。
參考文獻:
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[3]Hui L,Shijun L,Yue M.ANA detected by ELISA using nucleus of egg cell as antigen[J].Immunoassay Immunochem,2008,29(2):161-166.
[4]王蘭蘭.臨床免疫學和免疫檢驗[M].3版.北京:人民衛生出版社,2003:92-93.
編輯/肖慧