燒傷患者耐甲氧西林金黃色葡萄球RAPD分析

摘要：目的 調查燒傷患者耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的耐藥性及分子流行病學情況，為控制感染提供科學依據。方法 燒傷患者分離的金黃色葡萄球菌用PCR法擴增其mecA基因確定MRSA菌株，K-B紙片法檢測MRSA的耐藥性，隨機引物擴增多態性DNA（RAPD）進行同源性分析。結果 MRSA的分離率為41.1%，對多種抗生素均耐藥，沒有發現耐萬古霉素和替考拉寧的菌株。23株MRSA經RAPD分型，均獲得穩定的條帶，可分為四型，以Ⅱ型為主，共檢出13株。結論 燒傷患者分離MRSA菌株具有多重耐藥性，應根據藥敏試驗結果合理選用抗生素進行治療；采用RAPD對MRSA的同源性進行研究，為控制感染提供分子流行病學依據。

關鍵詞：燒傷患者；耐甲氧西林金黃色葡萄球菌；耐藥性；隨機擴增DNA多態性分析

Antibiotics Resistance and RAPD Analysis of Methicillin-resistant Staphylococcus Aureus Isolated from Burn Wounds

SHI Shu-fan，YANG Chang-shun

（Department of Clinical Laboratory，The First Peoplecs Hospital of Huaihua City， Huaihua 418000，Hunan，China）

Abstract：Objective To investigate the status of antibiotics resistance and the genetic homology of methicillin-resistant staphylococcus aureus isolated from burn wounds and provide scientific evidence for controlling MRSA infection. Methods MRSA was identified by mecA PCR. Drug resistance was perfomed using K-B method. The RAPD technique was used to identify the genotypes. Results The separation rate of MRSA was 41.1%. MRSA was resistant to much drugs .But all strains were susceptible to vancomycin and teicoplanin. All 23 stains of MRSA produced fingerprints by RAPD， and was classified into four genotypes.13 strains wereⅡtype which was the dominant type. Conclusion The MRSA isolated from burn wounds has high and multi drug resistance， we should resanobaly choose drugs according to the susceptibility test. RAPD results reveal the special epidemic genotypes of MRSA and this study can provide molecular epidemiological evidence for control of MRSA infection.

Key words：Burn wounds；Methicillin-resistant staphylococcus aureus；Drug resistance；RAPD

燒傷是一種較為常見且可能產生嚴重后果的外傷，全身感染是燒傷患者致死的重要原因。研究表明[1，2]金黃色葡萄球菌為燒傷患者感染最常見的病原菌，而且金黃色葡萄球菌隨時可引起患者創口感染，特別是MRSA， 近年來在燒傷創面的檢出率逐年上升。因此對其耐藥性及流行病學進行研究對于正確治療其引起的感染，防止其播散，及時控制其引起的暴發流行有重要意義。本文對某院燒傷患者分離的MRSA菌株進行耐藥性及RAPD基因分型研究，結果報告如下。

1資料與方法

3討論

燒傷科是醫院感染的高危病區，燒傷創面由于是開放性，加上嚴重燒傷患者自身免疫功能受損，極易發生創面細菌污染和定植，甚至發展膿毒血癥[4]。自上世紀90年代至今， 金黃色葡萄球菌是引起臨床感染的一種主要病原菌， 在燒傷創面感染中占據十分重要的位置[5，6]，特別是MRSA， 近年來在燒傷創面的檢出率逐年上升。本研究中共檢出MRSA 23株，分離率達到41.1%。MRSA對青霉素，氨芐西林，哌拉西林/他唑巴坦，頭孢噻肟，頭孢吡肟，美洛培南，環丙沙星、紅霉素耐藥率均為100%；對利福平和阿米卡星耐藥率均超過50%；對替考拉寧和萬古霉素的耐藥率為0%。病原菌多重耐藥是導致燒傷病房醫院感染最主要因素之一，本實驗也顯示MRSA菌株具有高耐藥性和多重耐藥性，因此臨床治療過程中尤其要注重合理使用抗菌藥物，根據藥敏試驗結果有針對性的選用敏感抗菌藥物，掌握用藥時間、用量，嚴格掌握經驗性、預防性用藥的指征，燒傷病房應建立抗菌藥物使用及致病菌耐藥性監測制度，以最大限度地減少耐藥菌引起的燒傷病房醫院感染的發生。本實驗雖未發現耐萬古霉素和替考拉寧的MRSA菌株，但國外已報道檢出了VISA及VRSA，國內也已發現對萬古霉素敏感性降低的MRSA菌株，且目前對于這兩類細菌尚無有效的治療藥物，應引起臨床高度重視。

MRSA對目前臨床上所使用的大多數抗生素具有高耐藥性和多重耐藥性，其導致的感染治療較困難，死亡率較高。因此，采取有效的流行病學分型手段監測MRSA，分析其來源、分布，對確定MRSA引起的感染暴發及其傳播途徑，進而采取有效的控制非常必要。目前有很多的分型方法對院內感染病原菌進行同源性研究，其中RAPD分型簡便快速，在 耐 甲氧西林金黃色葡萄球菌醫院感染研究中應用較為廣泛[7，8]。本實驗中23株MRSA經過RAPD擴增，均獲得一定數量的條帶，條帶數在1～6之間，分型率達100%。基因分型結果提示， 2，5-8，12-19共13株同屬Ⅱ型，是我院的主要流行株，其次是Ⅰ型檢出7株，這是一個危險的信號，說明在本院內存在著同源菌的流行趨勢，有引起感染暴發流行的可能，具體什么原因造成的流行還需進一步調查。因此加強燒傷病房的制度管理，做好消毒隔離、加強感染管理、規范陪護及探視制度，加強多重耐藥菌管理制度，加強醫務人員手衛生等都是預防、減少MRSA在燒傷科病房感染的重要措施。

參考文獻：

[1]尤志富，林巧燕，林國友，等.嚴重燒傷患者創面病原學改變的研究[J].中華醫院感染雜志，2013，23（1）：838-840

[2]文嵐.燒傷病房創面分泌物細菌學監測和耐藥性分析[J].實用預防醫學，2009，6（1）：262-263.

[3]周秀萍，楊長順，李爭鳴，等.RAPD反應體系優化的研究[J].微生物學雜志，2010，30（3）：96-99.

[4] 倪俊，顧海峰，許獻榮，等.燒傷病房難愈性創面病原菌分布及耐藥性分析[J].中國微生態學雜志，2013，25（2）：184-186.

[5]欒麗莉， 朱琪， 溫巖，等.燒傷患者醫院感染的監測與控制[J].寧夏醫科大學學報，2010，32（8）：894-895.

[6]高敏.燒傷患者創面感染的菌群分布[J].檢驗醫學與臨床，2009，6（16）：1383-1384.

[7]鄧玲萍，韓曉斌.金黃色葡萄球菌RAPD基因分型研究[J].中國熱帶醫學，2011，11（9）：1056-1057.

[8]雷金娥，劉軍輝，田普訓，等.腎移植病房耐甲氧西林金黃色葡萄球菌隨機擴增多態DNA分型研究[J].中華醫院感染雜志，2012，22（14）：2964-2966.

[9]黃小林，丁露，陳開森，等.2006年～2010年昌大一附院金黃色葡萄球菌耐藥性變遷[J].實驗與檢驗醫學，2011（03）.編輯/申磊