ABO血型鑒定風險與控制

摘要：目的分析ABO血型鑒定的影響因素和風險控制。方法通過對導致ABO血型鑒定不符的影響因素的分析。結果通過正確識別與控制，能有效提高ABO血型鑒定的符合性。結論抗原抗體異常、ABO亞型是導致血型不符的常見原因，經過適當處理及規范操作，能正確鑒定ABO血型。

關鍵詞：ABO血型鑒定；抗原抗體；ABO亞型；控制措施

ABO 血型系統是輸血中最重要的，也是最早發現的血型系統， 是在1900年由Landsteiner提出的。當人體輸入ABO血型不符的血液時會產生迅速地、完全地血管內溶血，會引起嚴重的輸血反應，以至發生死亡事故。因此，血型鑒定正確與否是臨床輸血安全的先決條件。影響血型鑒定的因素有很多：抗原抗體因素、標本因素、技術因素及工作人員因素等。如何正確的識別與控制血型鑒定的風險因素是保證臨床輸血安全、有效的關鍵。

1抗原因素

1.1抗原減弱 白血病可以影響N-乙酰半乳糖轉移酶或半乳糖轉移酶，導致患者紅細胞A抗原或B抗原弱化[1]。此外，何杰金氏病會抑制抗原表達，化療也會減弱血型抗原，類似白血病[2]。某些生理性的因素，如新生兒紅細胞所帶的A、B抗原位點數量少。

1.1.1鑒定風險 白血病、何杰金氏病這些患者在正定型時使凝集減弱或消失，易誤定為O型。新生兒因為紅細胞抗原數量未發育到成人水平，現有的單克隆抗體檢測水平可能與其發生較弱的凝集甚至不凝集[3]。

1.2類B抗原 一些腸道感染患者，因受大腸桿菌O86感染，使紅細胞上獲得類B抗原。

1.2.1鑒定風險 血型鑒定時使A型誤判為AB型，O型誤判為B型。

1.3控制措施

1.3.1抗原減弱引起的ABO血型鑒定困難可通過放置4℃、并延長反應時間后再作鑒定，并與微柱凝膠法、吸收放散試驗聯合檢測，也可通過測定分泌型患者的唾液血型物質來鑒定ABO血型。

1.3.2類B抗原當病情好轉時會消失。可用標準A、B紅細胞測定患者血清中的凝集素，以確定受檢者真正血型。

2抗體因素

2.1抗體減弱或缺失 血型抗體為天然抗體，多為IgM。新出生的嬰兒因免疫系統尚未健全，還未產生抗體或抗體效價非常低，抗體水平生理性下降的老年人， 以及血液病、長期接受免疫抑制劑治療的腫瘤患者、丙種球蛋白缺乏癥患者等都能導致血清中抗體減弱。

2.1.1鑒定風險 抗體減弱會造成反定型的困難，引起ABO正反定型的不符。

2.2同種抗體 引起ABO血型正反定型結果不符的同種抗體主要有Rh、M N、P等血型系統的抗體。

2.2.1鑒定風險 當出現反定型O細胞凝集而其自身對照細胞結果陰性時， 應考慮同種抗體存在的可能性。

2.3不規則抗體 常見的影響血型鑒定的不規則抗體主要有抗M和抗P1。因為抗M為天然抗體， 在日常的標本中檢出率很高， P2人的血清中通常都含有抗P1。

2.3.1鑒定風險 抗P1同抗M一樣， 抗P1為4℃高反應性抗體， 在室溫反應也較強[4]。不規則抗體的存在勢必導致ABO正反定型結果的不符。

2.4自身冷抗體 一般正常人的冷凝集素的效價不高，一般在1∶16一下，當環境溫度<4℃時才會產生凝集，但置37℃后凝集會消失。某些病理情況，如支原體肺炎、系統性紅斑狼瘡、自身免疫性溶血性貧血等疾病，患者血清中含有高效價的冷凝集素。

2.4.1鑒定風險 高效價的冷凝集素可致敏自身紅細胞發生凝集，使正定型時發生凝集現象，干擾血型判斷。

2.5控制措施

2.5.1抗體減弱或缺失引起的ABO鑒定困難，可通過增加血清量、延長反應時間、放置4℃增強反應或使用低離子強度的溶液來解決ABO正反定型的不符。

2.5.2現今隨著外來人員的不斷增加，Rh D陰性的檢出率也在上升，因此，Rh D已應作為常規檢測項目，臨床應選擇Rh同型的血液，以防止Rh陰性者接受RH陽性者血液后產生Rh抗體。如果再次輸入Rh陽性血液，即可導致溶血性輸血反應。

2.5.3可通過測定分泌型患者唾液中的血型物質來鑒定ABO血型，非分泌型患者可加做如吸收放散試驗。

2.5.4當ABO正反定型不符，懷疑患者血清中含有高效價冷凝集素時，可將患者紅細胞和生理鹽水置37℃預溫，然后用生理鹽水反復洗滌受檢紅細胞，直到鏡檢紅細胞無凝集狀態，然后再做血型鑒定，并且環境溫度宜保持在20℃以上。

3疾病因素

3.1標本溶血 引起標本溶血的疾病主要見于較為嚴重的血管內溶血，如：自身免疫性溶血性貧血、陣發性睡眠性血紅蛋白尿(PNH) 、G-6 PD缺乏等及某種原因導致的機械性損傷。

3.1.1鑒定風險 如果標本完全溶血，則無法進行ABO血型的鑒定。溶血的標本凝集度減弱，對正反定型的結果判斷都有干擾。

3.2血漿成分異常 多發性骨髓瘤患者由于骨髓瘤細胞可以分泌異常結構單一的免疫球蛋白， 造成正常免疫球蛋白合成不足， 血型抗體合成減少[5]。某些肝臟病、巨球蛋白血癥、傳染病( 結核等)等患者往往存在大量的異常球蛋白及心肌梗死、感染、外傷、腫瘤等疾病可引起患者體內纖維蛋白增高。

3.2.1鑒定風險 血漿成分的這些異常改變均易使紅細胞在反定型時發生緡錢樣凝集，引起正反定型不符。

3.3控制措施

3.3.1實驗室在收取患者標本時應嚴格把關，對于溶血標本應結合患者病史，排除人為引起的理化損傷。當溶血引起血型鑒定結果判斷困難時，同時加做吸收放散試驗或檢測分泌型患者的唾液中的血型物質來幫助鑒定。

3.2當患者因為疾病原因導致血漿成分異常而致使血型鑒定過程中紅細胞出現緡錢樣凝集時，只要在血清中加2~3滴生理鹽水，輕輕搖動，凝集即可消失。

4 ABO亞型

4.1鑒定風險 ABO血型正反定型結果不一致的另一常見原因是亞型。這是由于紅細胞抗原性的減弱而造成的定型困難。

4.2控制措施 其主要鑒定方法有：在正定型中加做抗AB、抗A1、抗H，比較凝集的強度。在反定型中加做A1 C、A2 C。加做吸收放散試驗，并可通過測定分泌型患者唾液中的血型物質來幫助ABO亞型的定型。

5其他血漿（血清）因素

5.1藥物影響 主要為血漿擴溶劑如右旋糖苷、聚維酮、羥乙基淀粉等[6]。

5.1.1鑒定風險 易使紅細胞發生緡錢狀凝集，干擾血型的鑒定。

5.2細菌污染 當患者血清受到細菌污染時，可產生H物質。

5.2.1鑒定風險 在反定型時引起全凝集。

5.3補體致敏 補體能溶解紅細胞、白細胞及血小板等。某些物質如葡聚糖、細菌、內毒素、酵母多糖等能激活體內補體。

5.3.1鑒定風險 當患者血清中存在補體時，在反定型時可發生溶血現象而出現假陰性結果。

5.4正定型標本未抗凝 未抗凝標本的凝血塊上洗下的紅細胞會有不同程度的凝集。

5.4.1鑒定風險 正定型時會干擾結果的判斷。

5.5反定型使用抗凝標本 ABO反定型如使用抗凝標本的血漿，由于血漿中析出的纖維蛋白網住了試劑細胞中的紅細胞出現凝集[7]。

5.5.1鑒定風險 反定型紅細胞易出現緡錢狀凝集，引起正反定型的不符。

5.6控制措施

5.6.1藥物引起的紅細胞緡錢狀凝集與疾病引起的解決方法一樣，可在試管中加2~3滴生理鹽水，輕輕搖動，凝集即可消失。

5.6.2標本被細菌污染后產生的H物質，在反定型時引起全凝集，可用O型標準紅細胞與受檢血清做鑒定。

5.6.3如血型鑒定時出現溶血現象，排除其他原因后，懷疑有補體存在的情況下，應將血清置56℃滅活后再做血型鑒定。

5.6.4正定型時標本未抗凝，懸液中的紅細胞會有不同程度的凝集，但鏡檢會發現視野中的紅細胞除了有些小凝塊外，大部分是形態正常、分布均勻的。一般正定型要求使用抗凝標本，這樣紅細胞不易被破壞，防止溶血。

5.6.5反定型使用抗凝的標本，易出現緡錢狀凝集，因此建議盡量使用未抗凝標本的血清做反定型。

6臍帶膠原蛋白

新生兒血型鑒定的標本很多采自臍帶血，因為臍帶血含有大量的膠原蛋白，即\"華通膠\"[3]。

6.1鑒定風險 紅細胞表面吸附了這種膠原蛋白會造成紅細胞非特異性凝集，出現假陽性的結果，干擾正定型的結果判斷。

6.2控制措施 可用生理鹽水洗滌以吸取吸附于紅細胞上的華通膠、采用低離子溶液法、結合微柱凝膠法等，并可加做吸收放散試驗。

血型鑒定雖然操作簡單，但要求檢驗人員具有高度的責任感。在血型鑒定時嚴格遵守操作規程，認真、仔細，對每一分待檢標本負責。遇到血型鑒定困難時，要結合患者的病史和臨床診斷，并聯合其他血型鑒定實驗（抗人球蛋白試驗、吸收放散實驗、唾液血型物質鑒定、ABO亞型鑒定等實驗）綜合分析，以確保血型鑒定結果的正確性。

參考文獻：

[1]董曉鋒.腫瘤患者ABO 血型鑒定正反定型結果不符原因分析[J].中國誤診學雜志，2006，6(8):1463.

[2]郭永芳，陸慧娟.白血病引起血型A、B抗原減弱H抗原升高1例[J].中國輸血雜志，1999，12(2):26．

[3]周金安，劉慧芳.新生兒血型鑒定的常見問題和處理[J].國際檢驗醫學雜志，2011，32(19): 2285-2287.

[4]王藍鴿，周金安，魏晴.不規則抗體影響血型鑒定的處理和分析[J].臨床血液學雜志，2009，22(6):318-320.

[5]陳玲.53 例微柱凝膠卡氏法ABO正反定型不符原因的分析[J].臨床輸血與檢驗，2011，13(4):359-360.

[6]周湘靜，陳碧樂，謝作聽，等.37 例血漿因素引起正反定型不符原因分析[J].重慶醫學，2006，35( 5):452-454.

[7]蘭彩炯，陳靜嫻，等.輸血免疫血液學實驗技術[M].北京:人民衛生出版社，2011:132．

編輯/肖慧