三種頭孢類抗生素血漿樣品分析方法的應(yīng)用分析

摘要：目的探討三種頭孢類抗生素的血漿樣品的分析方法。方法實(shí)驗(yàn)儀器為高效液相色譜系統(tǒng)包括紫外可見光檢測(cè)器、離心機(jī)。 本次研究選取我院感染患者60例均為輕度感染，隨機(jī)將60例患者分為A、B、C三組，每組20例，三組患者在檢測(cè)前一晚18點(diǎn)服藥，A組患者口服500mg頭抱他美酯，B組患者口服200mg頭抱泊肟酯，C組患者口服200mg頭抱克酯。清晨抽取患者空腹?fàn)顟B(tài)下的靜脈血5ml，離心后取空白血漿0.5ml，加入甲醇100ul混勻，后加入高氯酸0.5ml，靜置5min后離心10min，取上清液20ul，進(jìn)樣檢測(cè)。結(jié)果三組患者血漿樣品高效液相色譜檢測(cè)結(jié)果存在差異，A組患者血漿含量為0.98±0.51ug/ml，B組患者血漿含量為0.22±0.08ug/ml，C組患者血漿含量為0.11±0.05ug/ml。三組結(jié)果間組間差異明顯具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。結(jié)論高效液相色譜-紫外可見光檢測(cè)法測(cè)定血漿中頭孢菌素類抗生素的含量具有較好的精密度和準(zhǔn)確性，其符合方法學(xué)的要求可推廣。

關(guān)鍵詞：頭孢類抗生素；血漿樣品；分析方法；頭抱他美酯；頭抱泊肟酯；頭抱克肪

隨著近年來(lái)頭孢菌素類抗生素在臨床中的廣泛應(yīng)用，其優(yōu)點(diǎn)也相對(duì)顯現(xiàn)出來(lái)，抗菌作用強(qiáng)、毒副作用小、耐青霉素酶效果好、臨床療效高，是臨床中常用的抗感染藥物［1］。基于頭孢菌素的以往研究資料，利用高效液相色譜-紫外法對(duì)人體的血漿樣品中的頭孢他美、頭孢泊肟、頭孢克肟進(jìn)行分析。

1資料和方法

1.1一般資料本次研究選取我院感染患者60例均為輕度感染，其中上呼吸道感染35例，軟組織感染10例，泌尿感染15例，其中男45例，女15例，年齡24~57歲，平均35.45歲。實(shí)驗(yàn)儀器為高效液相色譜系統(tǒng)包括紫外可見光檢測(cè)器、離心機(jī)，整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格儀器說(shuō)明書進(jìn)行。

1.2研究方法隨機(jī)將60例患者分為A、B、C三組，每組20例，三組患者在檢測(cè)前一晚18點(diǎn)服藥，A組患者口服500mg頭抱他美酯，B組患者口服200mg頭抱泊肟酯，C組患者口服200mg頭抱克酯。清晨空腹抽取患者靜脈血5ml，離心后取空白血漿0.5ml，加入甲醇100ul混勻，后加入高氯酸0.5ml，靜置5min后離心10min，取上清液20ul，進(jìn)樣檢測(cè)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法本次研究數(shù)據(jù)資料錄入統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)采用均值與標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)，組間差異采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P<0.05時(shí)組間差異顯著具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

3組患者血漿樣品高效液相色譜檢測(cè)結(jié)果存在差異，A組患者血漿含量為（0.98±0.51）μg/ml，B組患者血漿含量為（0.22±0.08）μg/ml，C組患者血漿含量為（0.11±0.05）μg/ml。三組結(jié)果間組間差異明顯具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

3討論

頭孢他美酯、頭孢泊肟酯、頭孢克肟均為第三代口服頭孢菌素類抗生素。第一個(gè)口服有效的第三代頭孢菌素是頭孢克肟，給藥劑量較小，需要檢測(cè)方法要具有較高的檢測(cè)靈敏度［2］。頭孢他美酯和頭孢泊肟酯均為前藥，藥物本身無(wú)活性，在口服后經(jīng)體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化為具有生物活性的頭孢他美和頭孢泊肟，在體內(nèi)無(wú)法測(cè)得其前藥的原形要通過(guò)測(cè)定其活性代謝物從而反映原形藥物在體內(nèi)的含量及代謝過(guò)程［3］。本次研究通過(guò)高效液相色譜-紫外可見檢測(cè)器法對(duì)三種頭孢菌素類抗生素的血漿內(nèi)含量進(jìn)行定量分析，具有專屬性強(qiáng)、檢測(cè)結(jié)果靈敏、檢測(cè)時(shí)間短等特點(diǎn)，常常用于血漿中頭孢類抗生素濃度的測(cè)定，并且可應(yīng)用于藥物動(dòng)力學(xué)研究中。

頭孢菌素在血漿濃度中的檢測(cè)方法主要采用微生物法、高效液相色譜法、液相-質(zhì)譜聯(lián)用法。液相-質(zhì)譜聯(lián)用法的靈敏度較高且檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，但非常規(guī)實(shí)驗(yàn)所用的儀器，微生物法的選擇性相對(duì)較差，靈敏度低，僅在臨床藥效學(xué)中使用［4］。高效液相色譜法具有靈敏度好，儀器普及率高等特點(diǎn)，前處理過(guò)程采用蛋白質(zhì)沉淀法，沉淀后得到的上清液進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)，但在上清液中會(huì)包含部分內(nèi)源性物質(zhì)會(huì)因個(gè)體差異等干擾結(jié)果，會(huì)給色譜分析頭孢菌素在血漿中含量帶來(lái)困難。

頭孢類抗生素具有一定的紫外吸收，當(dāng)血漿中藥物濃度較高時(shí)，采用簡(jiǎn)單易行的高效液相-紫外可見光檢測(cè)法可得到滿意的結(jié)果［5］。但是當(dāng)藥物血漿中濃度較低時(shí)，會(huì)受到強(qiáng)化合物等內(nèi)源物質(zhì)的干擾，會(huì)使色譜結(jié)果出現(xiàn)一定程度的偏差。本次結(jié)果顯示，三組患者血漿樣品高效液相色譜檢測(cè)結(jié)果存在差異，A組患者血漿含量為（0.98±0.51）μg/ml，B組患者血漿含量為（0.22±0.08）μg/ml，C組患者血漿含量為（0.11±0.05）μg/ml。三種頭孢在體內(nèi)代謝的速度略有不同，頭孢美他酯在血漿中的含量高于頭孢泊肟酯和頭孢克肟，頭孢泊肟酯的血漿中含量高于頭孢克肟，說(shuō)明頭孢美他酯在體內(nèi)代謝的速度相對(duì)較慢，作用時(shí)間較頭孢泊肟酯和頭孢克肟長(zhǎng)。

綜上所述，高效液相色譜-紫外可見光檢測(cè)法測(cè)定血漿中頭孢菌素類抗生素的含量具有較好的精密度和準(zhǔn)確性，其符合方法學(xué)的要求可推廣使用。

參考文獻(xiàn)：

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［2］楊瑞霞.色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定人體內(nèi)血漿中頭孢克肟含量[J].醫(yī)學(xué)綜述，2013，19(6):3059-3060.

［3］康艷紅，韓淑鳳，楊海英.HPLC 法測(cè)定血漿中頭孢克洛的濃度[J].黑龍江醫(yī)藥，2013，26(2):185-188.

［4］溫金華，鄒德琴，鐘海利.LC -ESI/MS 法測(cè)定血漿中頭孢他美濃度及頭孢他美酯分散片相對(duì)生物利用度的研究[J].藥物分析雜志，2013，33(1):34-38.

［5］徐大星，堯愛珉，馮芳.HPLC 法測(cè)定人血漿中頭孢克肟的濃度[J].2013，41(10):159-162.

編輯/王敏