Lin28B蛋白在三陰乳腺癌的表達及臨床意義

摘要：目的探討Lin28B蛋白在三陰乳腺癌的表達水平以及與臨床病理特征的關系。方法入選了47例三陰乳腺癌病例，分析Lin28B蛋白在癌組織和癌旁組織表達差異以及Lin28B蛋白與臨床病理特征的相關性。結果癌組織Lin28B陽性表達高于癌旁組織，兩者比較有統計學差異（P<0.05）；Lin28B蛋白在TNBC患者組織分化程度、淋巴結轉移、遠處轉移、TNM分期以及Ki67表達存在正相關性，這些相關性均具有統計學意義（P<0.05）。而與年齡、月經狀態、腫塊大小之間無相關性（P<0.05）。結論Lin28B蛋白表達可能與TNBC的發生、發展有關，有望成為三陰乳腺癌的新的預測因子或治療靶點，但是需要更大臨床樣本和長期隨訪進一步驗證。

關鍵詞：Lin28B蛋白；乳腺癌；病理特征

三陰性乳腺癌（TNBC）是指ER、PR與Her－2均陰性的乳腺癌。TNBC 具有獨特的生物學行為及臨床病理特征，是近幾年的研究熱點之一。目前研究發現Lin28B作為\"癌胚基因\"，參與惡性腫瘤的發生發展。本研究通過檢測TNBC的Lin28B蛋白表達水平，探討Lin28B蛋白在TNBC發生、發展的作用。

1資料與方法

1．1一般資料2007年1月1日~2013年12月31日在我院行乳腺癌根治術或改良根治術或乳腺腫塊穿刺病例，均為女性，術前未予放療、化療、內分泌治療、免疫治療或抗腫瘤中成藥治療等。術前無其他惡性腫瘤病史或全身其他重要臟器嚴重疾病。均為浸潤性導管癌類型。

共入選了47例TNBC病例，年齡26~87歲，中位年齡48.5歲；絕經前26例，絕經后21例；G1級 13例，G2級27例，G3級 7例；T1 10例，T2 17例，T3 15例，T4 5例；淋巴結轉移陰性20例，淋巴結轉移陽性27例；遠處未轉移37例，遠處轉移10例；TNM分期中I期 7例，II期11 例，III期 19例，IV期10例；Ki67≥14%共27例，Ki67＜14%共20例。

1.2方法采用免疫組化二步法檢測所檢組織標本的Lin28B蛋白表達情況。其中Lin28B一抗購自英國Abcam公司（ab71415），稀釋濃度1:10，PBS液代替一抗作為陰性對照。由2名富有經驗的病理醫師采用雙盲法觀察，每張切片高倍鏡下計數5個視野，每個視野計數100個腫瘤細胞，以陽性細胞的百分率和染色深度為標準進行評定。細胞漿或細胞膜中出現黃色、棕黃色顆粒為陽性染色，計數陽性染色細胞數≤lO％為陰性表達（－），陽性細胞數>10％為陽性表達，其中10~25%為1＋， 25~50% 為2＋，>50％為3＋，并作陰性對照。

1．3 統計學處理所有數據均采用SPSS19.0軟件進行統計學分析。Wilcoxon符號秩檢驗和Spearman非參數檢驗分析相關數據。P<0.05為差異有統計學意義。2結果

2.1 Lin28B蛋白在癌組織和癌旁組織表達情況Lin28B在癌組織陽性率65.00％，癌旁組織陽性率20.00％。Lin28B陽性表達參考判讀標準以百分比表示，在癌組織和癌旁組織配對比較，采用Wilcoxon符號秩檢驗，癌組織Lin28B陽性表達高于癌旁組織，兩者比較有統計學差異（P=0.001，P

2.2 Lin28B蛋白與TNBC患者臨床病理特征的關系Lin28B蛋白在TNBC患者腫瘤分化程度、淋巴結轉移、遠處轉移、TNM分期以及Ki67表達存在正相關性，這些相關性均具有統計學意義（P<0.05）。而與年齡、月經狀態、腫塊大小之間無相關性（P<0.05），見表2。

3討論

Lin28B是近年發現與腫瘤發生發展相關的一個新基因，在胚胎干細胞和發育組織中高表達，隨著細胞分化成熟后而逐漸表達降低或消失，參與維持干細胞\"干性\"；而在腫瘤組織異常表達增高，與腫瘤發生發展相關。研究認為Lin28B在人類腫瘤過表達的情況更為多見，Lin28B異常表達多見于肝癌、乳腺癌、腸癌等[1，2]。目前認為Lin28B的功能發揮主要通過抑制let-7 microRNA家族來實現。let-7家族通過靶向作用c-myc、Lin28B、K-RAS等癌基因以及cyclinD1/2等細胞周期相關蛋白來抑制腫瘤發生發展的作用。

一項關于Lin28B和let-7在161例食管癌病例臨床研究中，顯示Lin28B在食管癌細胞表達高于非癌性上皮細胞，尤其腫瘤浸潤生長部分；Lin28B高表達與淋巴結轉移、生存預后差呈正相關，Lin28B高表達與let-7低表達顯著關聯；多因素分析表明Lin28B是食管癌的獨立預后因子；并且體內實驗顯示Lin28B敲除的癌細胞在增殖和侵襲能力方面均較未處理的癌細胞減弱；所以認為Lin28B高表達與食管癌進展和預后不良相關，Lin28B通過增強食管癌細胞增殖和浸潤能力而發揮促癌作用的[3]。

本研究中Lin28B在癌組織表達明顯高于癌旁組織，這種差異具有統計學意義（P<0.05）。并且Lin28B表達與TNBC患者的組織分化程度、淋巴結轉移、遠處轉移、TNM分期以及增殖指標Ki67表達呈正相關（P<0.05），提示Lin28B表達在TNBC的發生發展過程中發揮作用。Sakurai等發現共檢測26例病例所有癌旁乳腺腺體都有Lin28B分布，16例癌組織也有表達，而且其表達水平明顯高于癌旁乳腺腺體，均分布在細胞質內[4]。故本研究結果與既往相關研究結果相似。

有報道Lin28B則在三陰（ER-、PR-、Her-2-）乳腺癌中表達明顯上調；而且Lin28B表達是炎癥產生環路的一部分，通過NF- B轉錄因子調控其表達水平[5]，所以Lin28B表達在炎癥向惡性腫瘤轉變過程可能起著重要作用。

綜上所述，Lin28B表達可能與TNBC的發生、發展有關，有望成為TNBC的新的預測因子或治療靶點，但是需要更大臨床樣本和長期隨訪進一步驗證。

參考文獻：

[1]岳樹強，向紅軍，楊雁靈，等.Lin－28B在原發性肝癌組織中的表達及其臨床意義[J].中華普通外科雜志，2008，23(1):48-50.

[2]King CE， Cuatrecasas M， Castells A，et al. Lin28b promotes colon cancer progression and metastasis[J].Cancer Res，2011，71（12）:4260-4268.

[3]Hamano R，Miyata H，Yamasaki M，et al. High expression of Lin28 is associated with tumour aggressiveness and poor prognosis of patients in oesophagus cancer[J].Br J Cacner，2012，106（8）:1415-23.

[4]Sakurai M，Miki Y，Masuda M，et al.Lin28：a regulator of tumor-suppressing activity of let-7 microRNA in human breast cancer[J].J Steroid Biochem Mol Biol，2012，131（3-5）:101-6.

[5]Thornton JE，Gregory RI.How does Lin28 let-7 control development and disease[J].Trend Cell Biol，2012，22（9）：474－82.

編輯/孫杰