應用新鮮抗凝全血對多臺血液分析儀進行比對

摘要：目的 應用正常人新鮮抗凝全血對我院1月份實驗室多臺血液分析儀進行比對實驗，評價各血液分析儀各參數之間是否具有可比性，本次實驗研究的是在血液分析過程中臨床意義比較大的幾個參數：白細胞（WBC）紅細胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細胞壓積(HCT)、血小板（PLT）。方法 選擇本實驗室日本Sysmex公司生產的 XT一2000i（有配套可溯源的校準物和質控品）血細胞分析儀為參比儀器．先對一正常新鮮抗凝全血定值．用于校準其它血細胞分析儀。校準合格后每日選取一門診體檢人正常新鮮全血在各臺儀器上進行測定，以參比儀器所測結果為靶值，其它兩臺儀器所測結果與參比儀器所測結果相比較，計算出WBC﹑RBC﹑HGB﹑HCT﹑PLT的差異百分比。當差異百分比在允許范圍內時表示在控，當差異百分比超出允許范圍時表示失控。結果 我實驗室XT一2000i檢測結果與ABX-PENTRA120，邁瑞BC-5500比較，WBC、RBC、HGB、HCT 、PLT相關性較好，都在CLIA'88允許誤差范圍的l/4控制限范圍內，實驗結果可靠具有可比性。結論 同一實驗室不同儀器間利用新鮮抗凝全血標本進行比對測定，利用Excel數據點折線圖的功能，對差異百分數作圖動態觀察．及時發現偶然誤差和系統誤差．查找原因并作相應處理，可以使多臺血細胞分析儀的結果間具有可比性，減小差異率，達到了科學又經濟的目的。

關鍵詞：新鮮抗凝全血；血液分析儀；比對

Applying Normal Person Fresh Anticoagulant Blood Carries out Comparison Test for Several Hematology Analyzers

YE Cheng-yan1，YAN Yuan1，ZHAO Xin2

(1.Maternal and Child Health Hospital of Sichuan Province，Chengdu 610041，Sichuan，China;2.The Seventh People's Hospital of Chengdu City，Chengdu 610000，Sichuan，China)

Abstract：ObjectiveApplying normal person fresh anticoagulant blood carries out comparison for several hematology analyzers which come from our laboratory in January，and evaluates whether there have been comparability among the parameter of the hematology analyzers.This experiment researches several parameters standing for the great clinical significance in the process of hemanalysis.MethodsThe Blood Cell Analyzer - XT-2000i (there are the calibrated matter and the control materials that are assorted and traced to the source) made in SYSMEX corporation of Japan is chosen to be reference instrument.First，fixing numerical value for fresh anticoagulant blood is so as to calibrate another Blood Cell Analyzers.After calibration is qualified，the normal and fresh blood from an outpatient will be chosen every day in order to be made determination on the instruments.Meanwhile，we regard the result measured by reference instrument as target value，compare it with the measured result of another two instruments and calculate discrepant percentage of WBC，RBC，HGB，HCT，PCT.When discrepant percentage comes within allowed range the result could be under control; when discrepant percentage exceeds allowed range，it could be out of control.ResultsComparing the measured result of XT-2000i in the laboratory with one of ABX-PENTRA120，MINDARY BC-5500，WBC，RBC，HGB，HCT，PCT all possess the better pertinence，which is in 1/4 control range of permitted error range of CLIA'88.The laboratory result is so reliable and has comparability.Conclusion Among different instruments in the same laboratory，making use of fresh anticoagulant blood specimen to advance comparison determination and taking advantage of the function of line chart made up of Excel's data points to dynamically examine discrepant percentage，quickly find accidentalerrorsystematic residuals，ask for reasons in order to carry out the homologous solution could create comparability among the results of several Blood Cell Analyzers，minish discrepant ratio so as to achieve scientific objective and economic purpose

Key words：Fresh blood；Hematology analyzer

血液分析儀是臨床實驗室進行血細胞分析的常用儀器，其檢測結果的準確性直接影響患者疾病的診斷、治療和觀察，只有將血液分析儀檢測結果直接或間接溯源至參考方法［1~4］，并進行良好的室內質量控制和室間質量評價，才能更有效地保證結果的準確性和可比性。隨著臨床工作量不斷的增加，很多醫院已擁有多臺不同型號的血液分析儀，由于生產廠家、型號、測定原理、試劑、定標物，質控物等不盡相同，同一樣本在不同的儀器上測定結果可能存在明顯差異。加之現在血液質控品價格昂貴，使用周期短，為了節約資金同時又要保證各臺血液分析儀測定結果的一致性，提高各參數的可比性，我們采用目前檢驗界比較認同的一種方法應用正常人新鮮抗凝全血進行比對試驗，建立溯源體系，取得了良好效果。

1資料與方法

1.1一般資料日本Sysmex公司生產的XT一2000i用于定靶值的檢測系統儀器及其配套可溯源校準品，法國生產的ABX-PENTRA120，深圳邁瑞BC-5500共3臺血液自動分析儀及其配套試劑。

1.2方法

1.2.1儀器的準備工作 對各儀器作空白及攜帶污染率測定。(結果見表1）Sysmex XT一2000i由工程師定期全面保養和校準，精密度參數在廠家允許范圍之內，室內質控均在控，室間質控結果優良，作為參考儀器。ABX-PENTRA120和邁瑞BC-5500定期保養，精密度參數在廠家允許范圍之內。

1.2.2 采集健康人EDTA-K2 抗凝新鮮全血15ml，混勻后分裝成3份，分別用于定靶值、校準和校準后驗證，室溫下保存，4 h內完成試驗。

1.2.3 Sysmex XT一2000i校準：用配套校準品嚴格按校準程序對儀器進行校準。校準完成后進行下一步實驗。

1.2.4取第1份血樣，在校準后的儀器上連續測22次，去掉各參數中最高值和最低值，取20次結果平均值作為靶值。

1.2.5比對儀器的校準 取第2份血樣分別在其余兩臺儀器上測定22次，去掉各參數中最高值和最低值，計算各參數的均值與靶值的偏差，偏差=[(比對儀器測定值一確定儀器測定值)／確定儀器測定值]×100％，若偏差WBC≤1.5％﹑RBC≤ 1.0％﹑Hb≤ 1.0％﹑HCT≤ 2.0％﹑PLT≤3.O％［5］。儀器無需校準，反之須調整原校正系數，計算公式：新校正系數=(靶值÷均值)×原校正系數。符合各儀器要求，進行下一步實驗。見表2。

1.2.6校準的驗證實驗 取第3份血樣分別在經校準后的儀器上測定22次，去掉各參數中最高值和最低值，計算各參數的均值與靶值的偏差。見表3。

1.2.7新鮮抗凝全血比對實驗：每天取一門診體檢人EDTA-K2抗凝血分別在各臺血液分析儀上測2次，計算各參數的平均值，差異百分率=（測定值-均值）/均值×100％［6］。

1.2.8實驗數據的收集 收集本實驗室1月份的所有比對結果進行統計學分析。

1.3統計學處理 每日以一份正常新鮮全血進行比對．參考L-J質控圖的觀察方法和原則， 以差異百分數0．00％靶值．以CLIA'88允許誤差范圍的l/4作為控制限．差異百分率可接受范圍設定：參照美國CLIA，88規定，WBC(T±15％)，RBC(T±6％)，HGB（T±7％），HCT（T±6％)，PLT(T±25％) ［7］，利用Excel數據點折線圖的功能，對差異百分數作圖動態觀察．及時發現偶然誤差和系統誤差．查找原因并作相應處理

2結果

2.1攜帶污染率的測定將一高值標本連續測定3次，結果依次為H1、H2、H3，接著連續測定低值標本3次，結果依次為L1、L2、L3。攜帶污染率計算公式為：(Ll-L3)／(H3一L3)×100％。

表1可以看出各儀器的攜帶污染率均不超過2﹪，符合實驗要求。(A: XT一2000i， B:ABX-PENTRA120， C:邁瑞BC-5500)

2.2 在XT一2000i血液分析儀上測的靶值為：WBC 6.83×10^9/L﹑RBC 5.52×10^12/L﹑HGB 135 g/L﹑HCT 0.439PLT 149×10^9/L. CV％分別為 1.04 0.75 0.62 0.85 1.02

2.3校準前兩臺血液分析儀與XT-2000i靶值間的比較見表2。

B儀器的偏差在允許范圍內，不需要再次校準。C儀器的檢測參數（RBC）超出了允許范圍，須進行校準。（B:ABX-PENTRA120， C:邁瑞BC-5500）

2.4經校準后邁瑞BC-5500與XT-2000i靶值間的比較見表3。

2.5 比對數據統計見表4。

3臺儀器所檢測的項目的差異百分數均在CLIA'88允許誤差范圍的l/4的控制限內，表明3臺儀器的實驗結果具有可比性，能為臨床提供可靠的實驗數據。

3討論

血液分析儀操作簡便，結果準確可靠，已經成為各級醫院臨床檢驗專業的主要檢測手段。隨著醫院工作量的逐漸增大，很多醫院已擁有多臺不同品牌或不同型號的血液分析儀，但由于各廠家生產的血液分析儀采用的原理和試劑性質不同，測定的結果存在潛在差異 。因此，為了保證血液分析儀檢測結果之間的一致性，除了要有完善的質量控制體系，還必須建立合理的比對程序，即用可溯源的血液檢測系統定期對本實驗室用于常規檢測的血液分析儀進行比對。由于儀器配套校準物質成本高、有效期短等多種原因，難以得到普遍推廣［8］。用\"定值\"的正常人新鮮全血進行儀器比對為此提供了一條可行的途徑。我實驗室采用用XT-2000i血液分析儀作為規范操作檢測系統對正常人新鮮全血進行定值及儀器比對，XT-2000i全自動血液分析儀每年由Sysmex公司專業人員用配套校準品校準1次，并且規范的開展室內質評管理，同時參加室間質評成績優良，結果準確可靠，所以可作為室內質控參比儀器。

本實驗室應用定值健康人新鮮血進行全血細胞計數的量值傳遞，對比對血液分析儀進行校準，利用患者的新鮮血常規樣本剩余血對比對儀全血細胞計數進行有效的室內質量控制，取得了滿意的結果。對3臺血液分析儀作攜帶污染率測定，結果表明3臺血液分析儀的攜帶污染率均在要求的范圍內，校準前BC-5500的紅細胞測定值超出了實驗允許范圍，須校準。經校準后的BC-5500測得的結果偏差小于校準前測定的結果（P﹤0.05），有統計學意義。通過對3臺血液分析儀進行校準后，收集我實驗室1月份（即校準次月）的新鮮抗凝全血比對數據做統計學分析，結果見表（4）表明我實驗室3臺血液分析儀所測得結果具有可比性，能滿足臨床的需要。我實驗室采用新鮮抗凝全血進行比對實驗，自動收集實驗數據，利用Excel數據點折線圖的功能，對差異百分數作圖動態觀察．及時發現偶然誤差和系統誤差．查找原因并作相應處理，具有可行性。

利用新鮮抗凝全血對多臺血液分析儀進行質量控制的過程中，為了保障實驗結果的可靠性，需做好一下幾個方面的工作：①參比儀器選擇：選擇性能良好、規范化操作的血液分析儀，其校準、室內質控、室問質評滿意，能保證檢測結果的準確和穩定性；具有可溯源的校準物和質控品；②健康人新鮮血選擇：以選擇對檢測無干擾因素存在、檢測結果處于正常參考范圍中值的健康人的血液為佳；③新鮮血定值和比對儀校準：此工作前需對儀器進行良好維護，確保性能測試符合要求，新鮮血采集后盡快進行定值和校準，定值和校準時兩個儀器環境溫度需保持一致，在室溫18 C～25 C條件下4 h內完成；④比對新鮮血準備：使用EDTA-K2抗凝管，經真空采血后顛倒混勻數次，避免出現凝塊，需選擇合適濃度且無PLT聚集、大PLT、有核RBC、RBC碎片、脂濁等提示的標本；⑤比對結果可接受范圍的建立：由于不同血液分析儀的測試原理、重復性、抗干擾程度可能會有差別，建立自己的質量控制標準較直接采用某個標準更能反映儀器的質量；⑥比對結果觀察方式選用：本實驗室在實驗室信息系統中建立了新鮮血比對、質控功能，自動完成比對數據采集、計算、質控圖顯示、失控現象提示功能，克服了數據人工記錄、計算的不便。

總之，本方法取材方便、操作簡單、經濟有效，對目前同一實驗室擁有多臺血液分析儀進行質量控制，加強同一實驗室內多臺血液分析儀間全血細胞計數準確性和可比性有實際應用價值。用正常人新鮮血液作為各儀器之間\"標準\"比對物，不僅經濟方便，而且提高多臺血液分析儀在實際工作中的交替使用時結果的一致性，更好地服務了臨床工作，同時也減少患者重復檢查的醫療費用，合理有效的利用衛生資源。

參考文獻:

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［3］International Council for Standardization inHaematology． Prepared by expert panel on cytometry：Recommendation for reference method for packed cell volume (ICSH Satandard 2001)[J].Lab Hematol，2001，7:148-170.

［4］International Council for Standardization in Haematology．Expert panel on cytometry and international society of laboratory hematology task force on platelet counting：Platelet counting by RBC／P1ate1et ratio method [J].Am J Clin Pathol，2001，115：460-464.

［5］叢玉隆.血液學體液學檢驗與臨床釋疑[M].第1版.北京：人民軍醫出版社，2004．294-298.

［6］馮仁豐主編．臨床檢驗質量管理技術基礎[M].上海：上海科學技術文獻出版社．2003．243

［7］CLIA'88 USA．Clinical Laboratory Improvement Amendment[S].1988.

［8］彭明婷．建立血細胞分析溯源體系的有關問題[J].中華檢驗醫學雜志，2006，29(4)：381.

編輯/許言