摘要:目的 研究破壁靈芝孢子粉膠囊對酒精性肝損傷是否有輔助保護功能。方法 選用健康雌性大鼠 連續30d灌胃后,除陰性對照組外各組再經口灌胃給予50%乙醇,然后取肝臟檢查肝勻漿中的丙二醛(MDA)、還原型谷胱甘肽(GSH)和甘油三酯(TG)的含量;并對肝臟進行組織病理學檢查,同時觀察對動物體重和肝重及肝體比的的影響。結果 在酒精性肝損傷模型成立的條件下,該受試物對動物體重、肝重、肝體比均無明顯影響(P>0.05);能顯著降低中、高劑量組大鼠肝勻漿中的過氧化脂質降解產物丙二醛含量(P<0.05)以及升高中、高劑量組大鼠肝勻漿中還原型谷胱甘肽的含量(P<0.05);組織病理學檢查結果(P<0.01)為陽性。結論 破壁靈芝孢子粉膠囊對酒精性肝損傷有輔助保護功能。
關鍵詞:破壁靈芝孢子粉膠囊;肝損傷
酒精是一種肝毒劑,容易引起酒精性肝損傷,導致酒精性肝病[1]。由酒精所致的肝損傷近年來在我國呈上升趨勢,如何有效防治酒精性肝病成為全社會關注的問題。靈芝又名瑞草,靈芝草。屬藥、食兩用真菌,世界各地均有分布,其子實體孢子粉,菌絲體均可入藥,有文獻報道:靈芝孢子粉具有增強免疫力,延緩衰老之功效[2],現代藥理研究表明,靈芝孢子粉可減低CCL4引起的血清ACT水平的升高,從而提示靈芝孢子粉對化學性肝損傷有一定保護作用。而本實驗也為再次驗證該受檢樣品是否對酒精性肝損傷有保護作用。
1資料與方法
1.1一般資料 由北京海德潤制藥有限公司生產、江西仙客來生物科技有限公司提供的仙客來牌破壁靈芝孢子粉膠囊,膠囊內容物為紅褐色。人體每日推薦量為2800mg/60kg·BW,試驗時用蒸餾水作溶劑配制成所需濃度的受試物溶液。
1.2動物及飼料 試驗動物:由成都達碩生物科技有限公司提供的雌性SD大鼠50只,體重180~220g ,生產許可證號為SCXK(川)2008-24.SPF級。動物飼料由四川省醫學科學院.四川省人民醫院實驗動物研究所提供,生產許可證號:SCXK(川)2010-001。
1.3方法 將雌性SD大鼠隨機分為5組,每組10只,試驗設233mg/kg.BW、700mg/kg.BW、1400mg/kg.BW三個劑量組,分別稱取5.83g、17.5g、35.0g受試物,依次加蒸餾水至250ml混勻備用,冰箱保存,用完再配。另設蒸餾水對照組和50%乙醇模型對照組。采用酒精肝損傷模型法,三個劑量組給予不同劑量的受試物,陰性對照組和模型對照組給予蒸餾水,按10ml/kg. BW經口灌胃1次/d,連續給予30d,稱體重2次/w,以此調整給藥量。試驗結束時將模型對照組和三個劑量組一次經口灌胃給予50%無水乙醇,劑量為14ml/kg. BW,陰性對照組給予同體積的蒸餾水,禁食16h后處死動物取肝臟稱重,計算臟體比,并用肝臟進行生化指標檢測及組織病理學檢查。
1.4肝組織病理學檢查 從動物肝左葉中部做橫切面取材、切片、染色、鏡下觀察脂滴在肝臟中的分布、范圍和面積。每例動物肝組織用40倍物鏡連續觀察組織切片,根據根據陽性細胞多少和分布的范圍,按0、1、2、3、4分進行評分。將所得分數的平均值作為該例肝組織的脂肪染色評分。
1.5數據處理 數據資料均采用SPSS 11.0軟件進行分析。如P<于0.05,則用Dunnett法進行兩兩比較;若方差不齊,則進行數據轉換,仍不齊,改用秩和檢驗,如P<0.05,則用Dunnett,s T3法進行兩兩比較。數據比較采用T檢驗。
1.6評定標準 肝臟MDA ,TG,GSH3項指標陽性;或MDA,TG,GSH任意兩項指標陽性和肝臟組織病理學診斷結果陽性,均可判定受檢樣品對酒精性肝損傷具有輔助保護功能。
2結果
2.1破壁靈芝孢子粉膠囊對大鼠體重、肝重、肝體比與模型對照組比較,無統計學意義(P>0.05)。
2.2模型對照組大鼠肝勻漿中的MDA、TG含量較陰性對照組顯著升高(P<0.01),GSH含量顯著降低(P<0.01),表明該模型是成功的,實驗系統可靠。三個劑量組的MDA、 GSH 、TG含量與模型對照組比較,可見中、高劑量組的MDA顯著降低,GSH顯著升高(P<0.05)有顯著性差異,而三個劑量組的TG無顯著性差異(P>0.05)。
2.3 模型對照組大鼠的肝細胞脂肪染色評分較陰性對照組顯著升高(P<0.01),三個劑量組大鼠的肝細胞脂肪染色評分與模型對照組比較,中、高劑量組降低有顯著性差異(P<0.01),見表1。
3討論
靈芝作為一種有名的中藥,在國內外已有較多的研究,但對于靈芝孢子粉的研究還停留在初級階段。本文采用的是大鼠酒精灌胃建立肝損傷動物模型,研究了破壁靈芝孢子粉膠囊對酒精性肝損傷的保護作用。其對酒精性肝損保護作用的機理可能是:①抗脂質過氧化,皂甙、黃酮、VitC、VitE具有很強的清除自由基能力,從而防止氧自由基對肝細胞膜及亞細胞結構的脂質過氧化損傷,保護肝細胞膜完整性;②改善肝臟微循環,皂甙能解除血液的濃、粘、聚、凝狀態,改善肝臟微循環,增加血流量,促進毒物排出,從而減輕肝損傷。同時靈芝孢子粉中含有豐富的微量元素鈷(Co)、硒(Se)、鉻 (Cr)與人類的健康與疾病的防治有密切的關系[3,4]。本實驗的確證實該破壁靈芝孢子粉膠囊對酒精性肝損傷有輔助保護功能。其確切的護肝的功效成分及作用機理還有待進一步研究。主要原因是孢子粉收集較為困難,另外對孢子的破壁技術還不夠成熟。為進一步深入研究,應當加快開展更有效的靈芝孢子收集方法的研究,加強對破壁方法的研究,同時深入探討靈芝孢子粉的藥理藥效機制,完善其藥用價值。
參考文獻:
[1]鄧海萍. 體檢人群中酒精性肝臟疾病患者健康教育的研究進展[J].中外健康文摘,2013 (12).
[2]毛健, 馬海樂. 靈芝多糖的研究進展[J].食品科學, 2010, 31(1):295-299.
[3]趙黎明, 劉兵, 夏泉鳴, 等. 中國保健食品現狀和發展趨勢[J]. 中國食物與營養, 2010, 10: 4-7.
[4]趙紅宇,李文斌.破壁靈芝孢子粉對肝纖維化的影響研究[J].黑龍江醫藥科學,2006,(1):224-226.
編輯/孫杰