探討手工鏡檢血涂片在血液分析中的重要性

摘要：目的 探討手工鏡檢血涂片在血液分析中的重要性。 方法 對經血液分析儀分析結果顯示完全正常的標本100例及570例血液分析儀檢測顯示白細胞計數結果正常而分類結果異常的標本做血涂片進行手工形態學觀察及鏡檢分類。 結果 經手工鏡檢后發現100例結果正常標本中有2例胞漿中顯示有中毒顆粒。570例白細胞計數正常標本中有11.9%胞漿中含有中毒顆粒（68/570）， 嗜酸性粒細胞增高占1.40%（8/570），可見原始、幼稚細胞者占0.88%（5/570），異形淋巴細胞增高占8.25%（47/570）。結論 血液分析儀分類結果不能完全代替手工鏡檢。

關鍵詞：血涂片； 血液分析；手工鏡檢

血液分析是目前臨床上最為常用的檢驗項目之一。隨著全自動血液分析儀在臨床實驗室的廣泛應用，大大減輕了檢驗人員的工作強度。但是這類儀器在鑒別血細胞的形態和內部結構等方面仍不夠完善，并存在一定的缺陷，它尚不具備識別紅細胞、白細胞、血小板形態的能力，也不能完全替代顯微鏡對血細胞形態學的檢查。但在應用過程中，檢驗人員依賴血液分析儀來縮短檢驗時間，提高檢驗效率，而忽視了血涂片的重要性，造成較多漏診、漏報的現象，導致臨床漏診，為患者的健康造成不必要的負面影響[1]。我科在使用血液分析儀過程中，有些檢驗人員對于白細胞總數正常但分類中性粒細胞增高及淋巴細胞、單核細胞增高的標本往往忽略手工鏡檢，只把白細胞結果異常或儀器未分類的標本才進行血涂片手工鏡檢檢查。本文對570例白細胞總數正常但白細胞分類顯示中性粒細胞增高、淋巴細胞增高及單核細胞增高的標本進行手工鏡檢，探討手工鏡檢血涂片在血液分析中的重要性，以便為臨床提供準確無誤的報告結果。

1資料與方法

1.1儀器和試劑 采用Sysmes 公司生產的XT-1800i全自動血細胞分析儀，試劑與質控品均為儀器配套的原裝進口產品；日本生產的OLYMPUS生物顯微鏡；瑞氏-吉姆薩復合染液[2]。

1.2一般資料 收集本院2011年1月～2012年6月門診及住院患者血液分析儀分析結果顯示完全正常的標本100例做為觀察組，白細胞總數正常但白細胞分類中性粒細胞增高、淋巴細胞增高及單核細胞增高的標本570例，年齡從3歲～82歲，平均年齡40.5歲。其中男性300例，女性270例。

1.3方法 XT-1800i全自動血液分析儀每日開機后只有在實驗室質量控制范圍內才能進行標本檢測。采取患者靜脈標本2ml注入EDTA-K2真空抗凝管中，在25℃室溫下3h內檢測完畢。再將經過儀器檢測完畢的患者抗凝標本制作成薄厚適宜的血片，依據全國臨床檢驗操作規程[2]用瑞氏-姬姆薩染液染色后，選擇經驗豐富、技術熟練的檢驗人員2名，在油鏡下選擇體尾交界處染色良好的區域計數分類200個白細胞，并求出各系所占比例的平均值，同時仔細觀察細胞核及胞漿等形態變化，并加以描述[2]。

2 結果

在觀察組的100份血涂片標本中，發現2份中性粒細胞胞漿中出現中毒顆粒。570例白細胞檢測在參考區間的標本中儀器分類顯示有300例為中性粒細胞增高，220例為淋巴細胞增高，50例單核細胞增高。經手工鏡檢確認，其中胞漿中可見中毒顆粒者68例，占11.9%（68/570）；嗜酸性粒細胞增高者8例，占1.40%（8/570）；可見原始、幼稚細胞者5例，占0.88%（5/570）；異形淋巴細胞增高者47例，占8.25%（47/570）。見表1。

3 討論

隨著科學技術的不斷發展，全自動血液分析儀正逐漸代替原有的手工操作，并且由三分群發展到今日的五分類血液分析儀。Sysmex XT-1800i全自動血細胞分析儀采用流式細胞術、激光技術和細胞化學染色技術相結合的原理，白細胞在DIFF通道采用激光和鞘流進樣的方式運用VCS，即體積（Volume）、傳導性（Conductivity）、激光散射（Scatter）技術，將在流式通道內的每個細胞的V、C、S測量值分布于一個三維坐標，并用特定公式計算出白細胞亞群分布區，從而進行白細胞分類，患者的白細胞表面物質及內部結構沒有大的改變時，可以進行正確的白細胞分類，得出正確的結果[3]。但由于血液中各種細胞的多形態、多變化性，儀器識別能力有限。特別是以細胞結構異常為主，而在細胞數量大小方面變化不大的病理細胞上顯得無能為力，如白血病、類白血病和傳染性單核細胞增多癥等的分析，因此儀器法不能完全取代顯微鏡檢查[4，5]，而只能起到篩選作用[6]。嚴重傳染病、化膿性感染、中毒、放射性腫瘤或造血系統性疾病等因素是導致白細胞形態學改變的常見原因。然而在這些疾病中，異常的血細胞形態變化在血細胞分析儀檢測中往往難以體現，如急性感染時外周血中性粒細胞會顯著增多，出現明顯的核左移或核右移、血細胞體積大小不均、中毒顆粒、空泡及核變性等導致的血細胞形態學改變；在傳染性單核細胞增多癥、某些病毒感染、過敏狀態，支原體肺炎等時會出現異形淋巴細胞；上述疾病中所導致的血細胞形態學改變，僅僅依賴全自動血細胞分析儀檢測將難以獲取準確有效的臨床參數[7，8]。本研究顯示即使是在血液分析結果完全正常的觀察組的血涂片標本中也會出現中毒顆粒。白細胞計數結果正常而分類結果異常的570例標本經手工鏡檢結果顯示，即使儀器提供了分類結果，但是由于識別能力有限，對中毒顆粒、幼稚細胞及異形淋巴細胞不能識別。因此臨床檢驗除了使用儀器外，顯微鏡手工復檢對于保證檢驗質量是不容忽視的。一旦忽略形態學觀察，會使許多疾病得不到正確的診斷治療，嚴重危害醫療質量以致造成漏檢、漏診及誤診的現象[9]，甚至引發醫療糾紛。傳統的血細胞涂片鏡檢雖然操作繁瑣，但是它可以直觀的區分和鑒定各類細胞形態學上的改變，有效地彌補了血液分析儀自身的缺陷與不足，為臨床提供更為有效的血細胞參數。因此血細胞形態學分析在血液常規檢驗中發揮著十分重要的作用。檢驗界很多老前輩都講到\"準確地白細胞分類不能完全脫離顯微鏡檢查\" [10]。同時呼吁檢驗界重視形態學檢查，加強基本技能培訓，不斷提高醫學檢驗技術人員的素質和學術水平。因此無論儀器結果如何，均不能完全代替手工血涂片鏡檢。應用全自動血細胞分析儀的多項檢測原理對各種血細胞參數進行分析檢測，并與血涂片制備、染色以及顯微鏡檢查有效結合，將為臨床提供更加有效、精確的血細胞檢測參數，這對疾病的診斷與治療有著重要的臨床指導意義

參考文獻：

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編輯/許言