摘要:目的 為建立SPF級青紫蘭兔種群,滿足各類研究的需要。 方法 用剖腹取胎的方法,對青紫蘭種兔進行生物凈化,用SPF級代乳兔進行喂養,使其微生物等級達到SPF級。 結果 共取得青紫蘭仔兔88只,存活74只,存活率為84.1%。 結論 種兔預產期判斷準確,可提高剖腹產手術的成功率。
關鍵詞:青紫蘭兔;生物凈化;剖腹取胎
隨著生命科學技術和生物醫藥的迅速發展,實驗動物越發顯得重要[1]。實驗兔作為實驗動物中不可缺少的一部分,對其的要求也越來越高,通過對實驗兔進行生物凈化,使其微生物等級達到SPF級,在本實驗中采用剖腹取胎的方法來達到生物凈化的目的。
1 資料與方法
1.1一般資料
1.1.1 實驗動物 經產健康的懷孕30~31d的青紫蘭種兔[2],通過觸診、觀察的方法來確定其臨產期,母兔表現為拔毛做窩,陰道口鮮紅,母兔下腹部膨大。
1.1.2手術器材 手術剪、止血鉗等物品經過121℃,20min高溫滅菌。
1.1.3凈化室的準備 凈化室、超凈臺用2%的過氧乙酸噴霧消毒,超凈臺開啟紫外燈。
1.1.4隔離器的準備 隔離器用2%的過氧乙酸消毒滅菌后,通風吹干后待用。
1.2方法
1.2.1 剖腹取胎 按照剖腹取胎的操作程序,用止血鉗分別夾住子宮的子宮頸和子宮角,用手術剪剪斷其末端,放在2%的過氧乙酸溶液中浸泡后,傳入凈化室。
1.2.2 子宮剝離,取出胎仔 將消毒過的子宮放入超凈臺中,用鑷子撕開子宮,弄破羊膜,取出胎仔,用紗布或棉花球擦拭仔兔,并且輕輕按摩仔兔,促使呼吸,待等到仔兔全身發紅后,剪斷其臍帶,傳入準備好的隔離器中[3]。
1.2.3 仔兔的哺乳 傳入隔離器的仔兔可以通過母兔帶奶和人工哺乳進行喂養。
1.2.4 微生物和寄生蟲檢測 每季度進行1次微生物、病毒和寄生蟲的檢測。
2結果
2.1 剖腹取胎仔兔的成活率 我們準備了13只青紫蘭種兔進行剖腹取胎,在整個過程中,有2只早產;1號母兔由于操作不熟練,操作時間較長,導致4只仔兔在子宮中時間過長,引起死亡;2號母兔由于仔兔發育未成熟只有1只存活;通過經驗的積累,在之后的實驗過程中,基本達到了全部存活。
2.2 微生物和寄生蟲學檢測 根據國標GB14922-94 SPF級質量標準對不同隔離器的仔兔抽樣進行微生物、寄生蟲檢測,結果均為陰性。
3討論
3.1母兔臨產前的判斷 通過觸診、觀察的方法來確定其臨產期,母兔表現為拔毛做窩,陰道口鮮紅。臨產期判斷過早,取出的仔兔發育不全,且體質較弱,死亡率高;判斷過晚,子宮頸張開,引起微生物污染。
3.2仔兔的取出 在剖腹取胎過程中,1號母兔子宮取出后,由于仔兔在子宮中滯留時間過長,引起4只仔兔的窒息死亡,因此在剖腹取胎過程中,應盡快的撕開子宮和羊膜,促使仔兔呼吸,有利于提高仔兔的存活率。
3.3仔兔臍帶剪斷的時間掌握 仔兔從子宮取出后,不應馬上剪斷臍帶,應等到仔兔全身發紅后,臍帶血凝固后再剪斷,以避免仔兔出血,造成死亡。
3.4仔兔的哺乳 仔兔傳入隔離器后,可以用SPF級母兔帶奶,如果待乳兔母乳較少,輔以人工哺乳進行哺育。用母兔帶奶,應注意帶奶母兔應在剖腹取胎母兔前2~3d分娩,確保奶水的充足。剖腹取胎的仔兔應與帶奶母兔的仔兔混合哺乳,以免由于氣味不同造成母兔不喂奶。
用人工哺乳,應嚴格控制好仔兔的環境溫度、奶的營養成分、奶的溫度。注意哺乳時要多次少喂,控制哺乳流速,以免發生嗆食,引起異物性肺炎、出血,導致死亡。
參考文獻:
[1]徐平,小鼠剖腹育仔若干問題探討[J].上海實驗動物科學,10(4):222.
[2]張業彬,岳秉飛,邢瑞昌等,SPF兔種群的建立[J].實驗動物科學與管理,2003.20.
[3]薛家賓,徐為中,諸玉梅,等.實驗兔生物凈化初報[J].上海實驗動物科學,23(3):174.
編輯/許言