摘要:目的 研究復方大血藤(CDXT)對前列腺炎的防治作用,并探討白細胞總數與卵磷脂小體密度與前列腺炎的關系。方法 給予SD雄性大鼠CDXT連續7 d后,于大鼠前列腺腹葉注射角叉菜膠復制急性非細菌性前列腺炎動物模型,術后24 h,處死大鼠,檢測前列腺液中白細胞總數和卵磷脂小體密度。結果 CDXT能抑制角叉菜膠所致大鼠前列腺炎癥反應,使前列腺液中白細胞總數減少、卵磷脂小體密度增加。結論 CDXT對前列腺炎具有較好的防治作用,可減輕前列腺炎癥組織的炎癥反應。
關鍵詞:復方大血藤;前列腺炎;白細胞計數;卵磷脂小體
前列腺炎是男科和泌尿外科的主要問題,世界范圍內每年大約有800萬前列腺炎門診患者,近年來, 前列腺炎的發病率有逐年增加,嚴重影響患者的生活質量。其中,以慢性前列腺炎(CP)最為多見,而在CP中,又以慢性非細菌前列腺炎(CNP)更為多見,臨床上多以對癥治療為主,效果不佳。大量研究表明中醫藥治療前列腺炎具有獨到之處。本實驗采用大鼠前列腺內注射角叉菜膠建立大鼠非細菌性前列腺炎模型,觀察CDXT對前列腺炎的作用,并探討前列腺液中白細胞總數及卵磷脂小體密度與前列腺炎的關系。
1資料與方法
1.1一般資料
1.1.1動物 雄性SD大鼠,體重200~250 g,由貴陽醫學院實驗動物中心提供,合格證號SCXK(黔)2002-0001。
1.1.2藥物與試劑 復方大血藤由貴州省貴定縣胡三帖藥業有限公司提供,每毫升藥液含生藥0.1 g;前列閉爾通栓(QLBETS)由黑龍江省濟仁藥業有限公司生產,批號:Z20020130;角叉菜膠 Sigma公司 批號:020511。
1.2方法
1.2.1分組、給藥及造模方法 取雄性大鼠60只隨機分成6組,即對照組、模型組、CDXT低(0.16 g/Kg)、中(0.32 g/Kg)、高劑量組(0.64 g/Kg),以及陽性對照組(QLBETS 0.47 g/Kg)。對照組及模型組直腸給予等容量蒸餾水,各組按上述劑量分2次給藥,即上午9∶00及下午13∶00直腸給藥各1次/d, 連續給藥7 d。于末次給藥后4 h,用0.8%戊巴比妥鈉按0.5 mL/100 g腹腔麻醉,無菌條件下取下腹部正中切口,暴露膀胱及前列腺腹葉,對照組大鼠每只于兩側前列腺腹葉分別注射無菌生理鹽水0.1 mL,其余5組大鼠每只于相同部位分別注射1%角叉菜膠0.1 mL,關腹,腹腔注射慶大霉素(3萬u/kg)防止感染。
1.2.2觀察指標 造模后24 h稱大鼠體重,斷頭處死大鼠,迅速取前列腺液計數白細胞總數和卵磷脂小體密度;取前列腺組織稱重并計算前列腺指數。
1.2.2.1前列腺系數 取前列腺,電子天平稱重,計算前列腺系數(前列腺重量:大鼠體重,mg/Kg)。
1.2.2.2白細胞數和卵磷脂小體密度計數 于小試管內加入白細胞稀釋液0.38 mL,然后用微量加樣器準確吸取前列腺液20 μL,擦去管尖外部的標本,將槍頭插入小試管中稀釋液的底部,輕輕將標本放出,并用上清液吸洗槍頭2~3次,將試管輕輕搖動1~2 min,使前列腺液與稀釋液充分混勻。取少量已混勻的白細胞懸液,一次滴入計數板內,使池內充滿,靜置2~3 min,待白細胞下沉后,在低倍鏡下計數四角4個大方格內的白細胞總數。
白細胞總數/L=4個大方格內的白細胞總數×50×106。
另取一滴前列腺液置于載玻片上,蓋上玻片,鏡下檢查卵磷脂小體密度。卵磷脂小體密度評分標準。評分標準:卵磷脂小體滿視野:4分;卵磷脂小體3/4視野:3分;卵磷脂小體1/2視野:2分;卵磷脂小體1/4視野:1分。
1.3統計方法 實驗數據以(x±s)表示,采用SPSS 11.5統計軟件,單因素方差分析(One-Way ANOVA),各組間兩兩比較采用LSD法,以P<0.05為差異顯著性。
2結果
模型組大鼠前列腺指數增加,白細胞總數增加,卵磷脂小體數目減少,與對照組相比,有顯著性差異(P<0.01)。CDTX高、中劑量組、QLBETS組可使前列腺指數降低,白細胞總數減少,卵磷脂小體數目增加,與模型組比較,有顯著性差異(P<0.05,P<0.01),見表1。
3討論
前列腺炎是男性泌尿外科的常見病、多發病之一,有逐年增加的趨勢,有>1/2的男性受到前列腺炎的困擾,臨床上非細菌性前列腺炎最為多見,由于其發病機制不明,臨床上尚無統一的治療方案,抗菌治療大多無效。近年來,中藥在治療前列腺炎方面報道較多,且在很大程度上改善患者癥狀、提高生活質量。
在本實驗中,我們參照文獻[1-2],向大鼠前列腺組織內注射角叉菜膠復制急性非細菌性前列腺炎模型。在造模過程中,我們嚴格遵循無菌操作的原則,并于術后給予慶大霉素防止感染。在急性非細菌性前列腺炎大鼠模型中,我們觀察到模型組大鼠前列腺液中白細胞總數明顯上升,卵磷脂小體密度明顯下降,與對照組比較,有顯著性差異(P<0.01),這說明角叉菜膠注射入組織以后可引起局部組織急性炎癥反應,與臨床診斷相符,表明造模成功。因此,采用角叉菜膠這種致炎劑能成功復制急性非細菌性前列腺炎,實驗結果對指導臨床應用具有較好的參考價值。
本次實驗,我們觀察到,CDXT高、中劑量組大鼠前列腺液中白細胞總數明顯下降,卵磷脂小體密度明顯上升,與模型組比較,有顯著性差異(P<0.01)。其中,白細胞總數是反映組織炎癥反應嚴重程度的一個重要指標,當前列腺發生炎癥時,組織水腫、間質纖維化,伴隨有大量的白細胞游出,當白細胞游出后,在趨化因子的作用下聚集與損傷部位,從而在機體防御反應中發揮吞噬作用和免疫作用,同時也對局部組織造成損傷和破壞,加重炎癥反應,實驗結果說明CDTX可使前列腺液中白細胞數目減少,減少炎性細胞浸潤,減輕局部組織炎癥反應;此外,卵磷脂小體是前列腺液的成分之一,在前列腺上皮細胞內產生并被完整地分泌到前列腺液中,對精子有保護作用,并能促進精液的液化,是反映前列腺分泌功能的指標之一[3],前列腺發生炎癥時,腺管周圍間質有炎性細胞浸潤,腺體上皮組織有不同程度的破壞,腺腔內有炎性細胞和炎性滲出物存留。由于炎性細胞的浸潤,使前列腺上皮細胞的分泌功能降低,卵磷脂小體分泌減少,加之巨噬細胞的吞噬作用,造成前列腺液中卵磷脂小體數量減 少[4],實驗結果說明CDXT可使前列腺液中卵磷脂小體密度增加,前列腺上皮細胞損傷減輕,分泌功能有所恢復。因此,我們得出結論,CDXT能抑制前列腺炎的炎癥反應,對非細菌性前列腺炎具有較好的防治作用,而白細胞計數和卵磷脂小體的水平可作為前列腺炎療效判定的標準之一。
參考文獻:
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編輯/張燕