海南產溫莪術揮發(fā)油成分分析

黃嫻，潘路，王春桃

(1.海南碧凱藥物研究所有限公司，海南海口 570216；2.海南省食品藥品檢驗所，海南海口570216)

·藥物與臨床·

海南產溫莪術揮發(fā)油成分分析

黃嫻1，潘路1，王春桃2

(1.海南碧凱藥物研究所有限公司，海南海口 570216；2.海南省食品藥品檢驗所，海南海口570216)

目的分析海南產溫莪術揮發(fā)油的化學成分，為其資源利用和質量評價提供依據(jù)。方法采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，以海南產的溫莪術揮發(fā)油和浙江產的溫莪術揮發(fā)油為研究對象，采用GC-MS法、HPLC色譜法，根據(jù)《中國藥典》公布的莪術油的質量標準分析其揮發(fā)油的化學成分。結果海南產溫莪術揮發(fā)油與浙江產溫莪術揮發(fā)油的成分基本一致，兩種揮發(fā)油的特征圖譜與《中國藥典》2010年版公布的莪術油的特征圖譜比對，相似度均達到95%以上。結論不同產地的溫莪術揮發(fā)油成分有一定的差異，但主要成分基本相同，為海南產溫莪術的開發(fā)利用提供了科學依據(jù)。

溫莪術；揮發(fā)油；成分；氣相色譜-質譜；高效液相色譜

溫莪術為姜科植物溫郁金(Curcuma wenyujin Y. H.Chen et C.Ling)的干燥根莖，其性溫，味辛、苦，具行氣破血、消積止痛功能，主要用于癥瘕痞塊，瘀血經閉，胸痹心痛，食積脹痛。溫郁金主要分布于浙江省南部，生態(tài)相似度90%～100%區(qū)域有浙江、江西、湖南、福建、廣西、貴州、廣東、云南、海南等省[1]。

溫莪術主要含有揮發(fā)油，我國對溫莪術的研究較多，溫莪術揮發(fā)油(莪術油)已收入《中國藥典》2010年版一部[2]。莪術油由溫莪術藥材經水蒸氣蒸餾制得，具有抗癌、抗病毒、抗炎及保肝等多種藥理活性[3]，目前對莪術油的分析有氣相色譜法(GC)、氣相色譜-質譜聯(lián)用法(GC-MS)以及收載于《中國藥典》一部的高效液相色譜法(HPLC)[4]。

本文以海南產的溫莪術揮發(fā)油和浙江產的溫莪術揮發(fā)油為研究對象(兩種油均為水蒸氣蒸餾所得)，采用GC-MS法分析兩種不同產地的莪術油的化學成分，采用HPLC法定性、定量分析其主要成分，同時利用“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2012版)”與《中國藥典》2010版公布的莪術油的特征圖譜比較兩種不同產地莪術油的相似度，以期對海南產溫莪術的藥用價值，開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與材料DSQⅡGC/MS(ThermoFisher美國)氣-質聯(lián)用儀，柱型：TG-5SilMS 30 m×0.25 mm× 0.25 μm；島津LC-2010A HT高效液相色譜儀；賽多利斯BP211D電子分析天平；溫莪術(①產于浙江樂清，②2008年引種至海南省興隆南藥園，由齊耀東鑒定為溫莪術Curcuma wenyujin Y.H.Chen et C. Ling)。

1.2 試劑無水乙醇(分析純)：國藥集團化學試劑有限公司，批號 20120903；乙酸乙酯(分析純)：廣州化學試劑廠，批號20120403- 2；乙腈：TEDIA，批號LOT12010654。

1.3 方法

1.3.1 莪術油的提取與樣品制備取溫莪術干品粉碎后用水蒸氣直接蒸餾提取莪術油，提取時間為24 h。取莪術油適量，用乙酸乙酯稀釋后制成氣質聯(lián)用分析樣品備用；取莪術油適量，用無水乙醇稀釋后制成高效液相色譜分析樣品備用。

1.3.2 質譜條件DSQⅡGC/MS(ThermoFisher美國)氣-質聯(lián)用儀，TG-5SilMS毛細管柱(30 m× 0.25 mm×0.25 μm)；進樣口溫度240℃，程序升溫，初溫為140℃，保持35 min，以每分鐘10℃的速率升溫至200℃，保持3 min；載氣為氮氣(純度：99.999%)；EI電離源，70Ev，離子源溫度為250℃；掃描質量范圍50～500 amu。

1.3.3 液相色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，水為流動相B，進行梯度洗脫，梯度為：0～20 min是等比例的把A60%和B40%變換成A95%和B5%，21～35 min維持A95%和B5%；檢測波長為216 nm。

1.3.4 成分分析海南產溫莪術油及浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油所得質譜圖經計算機處理和標準質譜圖庫檢索，確定化合物，按面積歸一化法計算樣品中各化合物在揮發(fā)油中的相對百分含量。

2 結果

2.1 海南產溫莪術及浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油含量比較海南產溫莪術及浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油含量差異不大。海南產溫莪術揮發(fā)油含量約為2.9%，浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油約為3.0%。

2.2 海南產溫莪術及浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油成分分析海南產溫莪術油及浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油所得質譜圖見圖1～2，揮發(fā)油化學成分析見表1。海南產溫莪術揮發(fā)油共有成分71種，浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油共有成分72種。兩者的相對含量具有一定的差異，但差異不大。

圖1 浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油總離子流圖

圖2 海南產溫莪術揮發(fā)油總離子流圖

表1 海南產溫莪術及浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油化學成分及其相對含量

續(xù)表1

海南產溫莪術與浙江產溫莪術的揮發(fā)油其液相色譜圖與《中國藥典》2010年版一部提供的對照指紋圖譜比對(見圖3)，按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)計算，海南產溫莪術揮發(fā)油的相似度為97.2%，浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油相似度為99.3%，相似度均高于95%，符合《中國藥典》2010年版一部莪術油指紋圖譜的要求。

圖3 溫莪術揮發(fā)油色譜指紋圖譜

2.3 主要有效成分含量分析《中國藥典》2010年版一部莪術油含量測定項下的檢測指標為含牻牛兒酮(C15H22O)不得少于7.5%，含呋喃二烯(C15H20O)不得少于10.0%。照高效液相色譜法測定，海南產溫莪術揮發(fā)油兩批測定結果如下：第一批：牻牛兒酮含量為7.6%，呋喃二烯含量為13.0%；第二批：牻牛兒酮含量為8.0%，呋喃二烯含量為13.0%。均符合《中國藥典》2010年版一部莪術油含量要求。

3 討論

溫莪術是我國的傳統(tǒng)常用大宗藥材，在傳統(tǒng)中醫(yī)學中已有幾千年的應用歷史。溫莪術具有抗腫瘤、抗血小板聚集、抗菌、抗病毒、抗化療、促進機體免疫力、抗白血病、抗癲癇、抗前列腺增生、拮抗致突變、益智和抗衰老、改善胃動力等藥理作用，故在臨床上應用極廣。溫莪術的相關制劑有注射液、滴眼液、栓劑、軟膏劑、乳劑、霜劑、膠丸、環(huán)糊精包和物、微球及栓塞等。溫莪術單一化學成分的研究也是國內外學者的研究熱點，科學家們先后分離出約20來種莪術單一成分。其中《中國藥典》2010年版一部莪術油含量控制指標呋喃二烯、牻牛兒酮為抗病毒、抗癌活性成分[5-8]。

周欣等[9]在市售、溫莪術油、浙江永嘉莪術油及瑞安陶川莪術油中分離得到65種不同成分。目前研究認為，莪術油的成分多為萜類及倍半萜衍生物。抗菌、抗病毒的主要成分是倍半萜類的莪術醇、莪術酮等[10]。本研究顯示，海南產溫莪術揮發(fā)油共有成分71種，浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油共有成分72種，兩者的相對含量具有一定的差異，但差異不大。海南產溫莪術揮發(fā)油、浙江樂清產溫莪術揮發(fā)油均符合《中國藥典》2010年版一部莪術油的質量標準要求，兩者的化學成分差異不大。這對海南產溫莪術的開發(fā)利用提供了科學依據(jù)。同時對溫莪術在海南的規(guī)范化種植、資源開發(fā)都有重要的意義。

參考資料：

[1]陳士林.中國藥材產地生態(tài)適宜性區(qū)劃[M].北京:科學出版社, 2011:289-294.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部).2010年版[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:1.

[3]姚崇舜.天然藥物溫莪術[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:10.

[4]郭麗娟,張云,叢曉東,等.溫郁金主要成分含量測定及指紋圖譜研究進展[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2011,18(4):101-103.

[5]Sun XY,Zheng YP,Lin DH,et al.Potential anti-cancer activities of Furanodiene,a Sesquiterpene from Curcuma wenyujin[J].Am J Chin Med,2009,37(3):589-596.

[6]Ba ZZ,Zheng YP,Zhang H,et al.Potentialanti-cancer activity of furanodiene[J].Chin J Cancer Res,2009,21(2):154-158.

[7]Ma E,Wang X,Li Y,et al.Induction of apoptosis by furanodiene in HL60 leukemia cells through activation of TNFR1 signaling pathway[J].Cancer Lett,2008,271:158-166.

[8]鄭艷萍,孫秀燕,巴真真,等.呋喃二烯的體內外抗腫瘤作用研究[J].煙臺大學學報:自然科學與工程版,2008,21(2):115-118.

[9]周欣,梁光義.不同產地莪術揮發(fā)油的研究[J].華西藥學雜志, 2002,17(3):201-203.

[10]曹利娟,劉華鋼,劉麗敏,等.莪術油近五年的研究進展[J].中國中藥,2010,16(3):447-450.

Composition analysis of essential oil of Curcuma wenyujin Rhizoma from Hainan Province.

HUANG Xian1,PAN Lu1,WANG Chun-tao2.1.Hainan Bikai Institute of Materia Medica Co.,Ltd.Haikou 570216,Hainan,CHINA;2. Hainan Provincial Institute for Drug and Food Control,Haikou 570216,Hainan,CHINA

ObjectiveTo analyze the essential oil compositions of Curcuma wenyujin Rhizoma from Hainan Province in order to provide identifiable ground for the use of resources and quality evaluation.MethodsEssential oil of Curcuma wenyujin Rhizoma from Hainan Province and from Zhejiang Province was selected as the research objects.These essential oil were extracted by steam distillation.They were analyzed and determined by gas chromatography-mass spectrometry(GC-MS)and high performance liquid chromatography(HPLC),compared with the quality standards of"China pharmacopoeia".ResultsEssential oil compositions of Curcuma wenyujin Rhizoma from Hainan Province and Zhejiang Province were consistent.Similarity of characteristic chromatogram of two essential oils reached more than 95%compared with Chinese pharmacopoeia characteristic chromatogram(2010)of Curcuma wenyujin Rhizoma.ConclusionEssential oil compositions of different origin are similar.The study provided scientific basis for the development and utilization of Curcuma wenyujin Rhizoma from Hainan Province.

Curcuma wenyujin Rhizoma;Essential oil;Composition;GC-MS;HPLC

R93

A

1003—6350（2014）20—3024—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.20.1188

2014-02-28)

海南省重大科技項目(編號：ZDZX2013008)；海南省中藥現(xiàn)代化專項課題(編號：ZY201315)

王春桃。E-mail：wangchuntao903@163.com