復方丹參脈沖控釋滴丸的制備及其體外釋放度考察

（廣東省深圳市福田人民醫院，廣東 深圳518033）

復方丹參是由丹參、三七和冰片3味中藥組成的口服方，方中丹參為君藥，三七為臣藥，冰片為佐使藥。丹參活血定痛，三七活血補氣，冰片引經報使，三者相輔相成，具有活血化瘀、理氣止痛的功效，臨床上用于治療胸中憋悶、心絞痛等癥狀，對心絞痛、冠心病等心血管疾病具有較好的療效。心絞痛是心血管疾病中常見疾病，是由于冠狀動脈供血不足，心肌急劇、暫時的缺血與缺氧所引起的臨床綜合征。心絞痛有明顯的晝夜節律性，在凌晨發生的幾率極高，可能與早晨血漿兒茶酚胺水平提高、皮質醇濃度達到高峰，使心肌氧供需平衡失調有關。因而，可設計在凌晨釋藥的制劑來防治心絞痛發生[1－3]。與復方丹參片等劑型相比，復方丹參滴丸具有療效高、作用迅速、用量小、無胃腸道刺激等優點[4]。因此，本研究中擬用復方丹參為模型藥，以滴丸為丸芯，通過包衣技術制備一種脈沖控釋制劑，擬在22：00左右服藥，時滯4～5h，藥物在凌晨2：00左右開始釋放并吸收入血，體內能達到有效血藥濃度，并維持一定時間，以防止心絞痛的發生。

1 儀器與試劑

Aeromatic流化床包衣機（德國NIRO公司）；BS224S Sartorius型精密分析天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司）；Ultimate3000型高效液相色譜儀（美國戴安公司）；KQ－300VDE型雙頻數控超聲波清洗器（昆山市舒美超聲儀器有限公司）；ZRS－8G型智能溶出儀（天大天發科技有限公司）；DWJ－2000S－D型多功能滴丸試驗機（煙臺康達爾藥業有限公司、煙臺百藥泰中藥科技發展有限公司）。丹參、三七（購于廣州清平藥材市場，經鑒定為正品）；丹參素對照品（自制，含量99.4%）；聚乙二醇6000（PEG6000）、聚乙二醇4000（PEG4000）購自天津天泰精細化學品有限公司；液體石蠟（天津市化學試劑二廠）；低取代羥丙基纖維素（L－HPC，湖州展望化學藥業有限公司）；羥丙基甲基纖維素（HPMC－E3，上海Colorcon輔料有限公司）；交聯羧甲基纖維素鈉（CMC－Na，日本旭化成工業株式會社）；交聯聚維酮（PVPP，美國國際特品公司）；交聯羧甲基淀粉鈉（CCMS－Na，日本旭化成工業株式會社）；乙基纖維素水分散體（Surelease，上海Colorcon輔料有限公司）；甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 復方丹參滴丸制備

參照2005年版《中國藥典（一部）》中方法提取[5]，取丹參450g，三七141g，冰片8g。丹參、三七加水煎煮，煎液濾過，濾液濃縮，加入乙醇，靜置使沉淀，取上清液，回收乙醇，濃縮成稠膏，備用；冰片研細。取聚乙二醇4000和聚乙二醇6000的混合物適量，加熱使熔融，加入上述稠膏和冰片細粉，混勻，選擇合適的滴速、滴距，滴入冷卻的液體石蠟中，制成合適大小的滴丸，即得復方丹參滴丸。

2.2 滴丸中丹參素含量測定

色譜條件：色譜柱為Dionex－Acclaim C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流動相為甲醇－水(15:85，用冰醋酸調pH為3），流速1.0mL/min，檢測波長280nm，進樣量20μL。

測定方法：取包衣滴丸12粒，精密稱定，研缽研碎，置25mL容量瓶中（用適量甲醇洗滌研缽，洗液并入容量瓶中），加甲醇至約15mL，超聲處理10～15min，靜置至室溫，稀釋至刻度，搖勻，以2000r/min的速度離心5min，取上清液，作為供試品溶液；精密稱取丹參素鈉對照品適量，按《中國藥典》中方法制成對照品溶液。取上述溶液各20μL進樣測定。

2.3 微丸釋放度試驗

采用2005年版《中國藥典（二部）》附錄ⅩC溶出度測定法第一法轉籃法裝置，按附錄ⅩD釋放度測定法第二法的操作方法，量取0.1mol/L鹽酸溶液750mL，注入每個溶出杯中，加熱使溶液溫度保持在（37±0.5）℃，轉速100r/min。稱取適量包衣滴丸，放入轉籃中，啟動儀器并開始計時。分別于第1，2h時用注射器吸取釋放液5mL，用0.45μm微孔濾膜過濾，同時補加鹽酸溶液5mL，第2h取樣完畢并補充完介質后，于杯內加入0.2mol/L磷酸鈉溶液250mL，調節pH為6.8，然后于第3，4，6，8，10，12h時各取樣5mL，用0.45μm微孔濾膜過濾，同時都分別補加相同pH的緩沖液5mL。取上述樣品續濾液，注入高效液相色譜儀進行測定，計算累積釋藥百分率。

2.4 脈沖控釋微丸制備

包衣液配制：將粘合劑HPMC－E3溶于水中，配成質量濃度為25g/L的溶液，加入CMC－Na或其他溶脹材料，使其質量濃度為35g/L，攪拌至均勻，靜置過夜，使其充分溶脹，作為溶脹層包衣液。取Surelease，用水稀釋成質量濃度為80g/L的溶液，攪拌均勻，即得控釋層包衣液。

包衣微丸制備：將合適大小的滴芯置流化床中，從溶脹層到控釋層依次包衣，出風溫度為（37.0±2.0）℃，噴液速率為1.5～2.0mL/min，噴霧壓力為0.16～0.20MPa，以底噴方式進行包衣。每次包衣后流化干燥10min，包衣完成后置烘箱中40℃固化12h即得包衣微丸。

2.5 處方與工藝因素對微丸釋藥的影響

溶脹層材料類型：保持控釋層包衣增重20%，分別用CMCNa，L－HPC，PVPP作為溶脹層材料，均包衣增重12%，制備包衣滴丸，并分別進行釋放度測定。結果3種材料的膨脹效果為CMC－Na＞L－HPC＞PVPP（圖1）。CMC－Na膨脹效果明顯優于其他兩種材料，表明使用CMC－Na作為溶脹層材料滴丸可以達到預期的脈沖釋藥效果。

圖1 溶脹層材料對藥物釋放的影響

溶脹層包衣增重：保持控釋層包衣增重20%，以CMC－Na為溶脹層材料，改變溶脹層包衣增重分別為8%，10%，12%，15%，20%，制備包衣滴丸，并分別進行釋放度測定。溶脹層增重對藥物釋放的影響結果見圖2。結果當溶脹層包衣增重達12%時，膨脹層已能產生足夠的膨脹力來撐破控釋層衣膜，于4h時滯后開始釋藥，隨后的3h累積釋藥達80%以上（圖2）。說明溶脹層包衣增重達到一定的厚度時，才能獲得較好的脈沖釋放效果。因此本試驗選用溶脹層包衣增重12%。

圖2 溶脹層厚度對藥物釋放的影響

控釋層包衣增重：以CMC－Na為溶脹層材料，并保持溶脹層包衣增重為12%，改變控釋層包衣增重分別為10%，15%，20%，25%制備包衣滴丸，并分別進行釋放度測定。控釋層包衣增重對藥物釋放的影響見圖3。結果表明，以CMC－Na為溶脹層材料，溶脹層包衣增重為12%時，控釋層增重要合適，過薄則沒有時滯，過厚則所產生的膨脹力無法撐破控釋層衣膜，藥物釋放無法達到脈沖效果。

圖3 控釋層厚度對藥物釋放的影響

圖4 3批包衣滴丸累積釋藥曲線

最佳工藝驗證：根據以上工藝制備3批包衣滴丸，以CMC－Na為溶脹層材料，包衣增重為12%，控釋層包衣增重至20%，體外試驗表明平均時滯約為4h，之后3h累積釋藥均大于80%。結果見圖4。

3 討論

采用雙層膜時控－崩解的方法制備控釋微丸，溶脹層材料、厚度以及控釋層厚度的選擇是實現脈沖釋藥的關鍵。當控釋層厚度一定，一定范圍內隨著溶脹層厚度的增加，釋藥時滯縮短，釋藥速率加快。當溶脹層厚度一定時，隨著控釋層厚度的增加，釋藥時滯明顯延長，且時滯后釋藥速率也明顯下降，甚至釋藥不完全。

滴丸劑是由藥物和固體基質加熱熔融成溶液、混懸液或乳液后，滴入不相混溶的冷凝液中，由于熔融液滴在冷凝液中的界面張力作用而收縮成丸，隨后冷凝成固態而制得。是固體分散體的一種，由于滴丸劑具有其他劑型不具備的突出特色，符合人們對現代藥物制劑的“三小”（用量小、毒性小、不良反應小），“三效”（高效、長效、速效）和方便用藥、方便攜帶、方便貯存等基本要求[6－7]，故本研究選擇滴丸作為丸芯進行包衣。

CMC－Na是優質崩解劑中的一種，具有很強的吸水膨脹性，崩解作用良好。以CMC－Na為內層溶脹材料在一定時滯之后藥物的釋放速率較快，能產生脈沖釋藥的效果，故以其作為內層溶脹層材料。

本研究中選擇復方丹參滴丸為丸芯，以CMC－Na為溶脹層材料，Surelease作為控釋層，制備復方丹參脈沖控釋滴丸，當溶脹層增重12%，控釋層增重20%，微丸體外釋藥時滯為4h，時滯后3h累積釋藥80%以上，達到預期效果。但該制劑的體內釋藥行為尚待進一步研究。

參考文獻：

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[2]張玉祥，王金香.復方丹參胃漂浮緩釋片的制備及其體外釋放度研究[J].中國醫藥導報，2008，5（19）：34－35.

[3]劉 耀.單硝酸異山梨酯脈沖控釋微丸的研究[D].重慶：第三軍醫大學，2007：8.

[4]李 軍，王 茜.復方丹參滴丸治療冠心病藥理作用研究進展[J].山西中醫，2001，17（5）：56－57.

[5]國家藥典委員會.中國藥典（二部）[M].北京：化學工業出版社，2005：528.

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[7]王著宇.中藥滴丸制劑優勢分析[J].中國制藥信息，2002，18（4）：20.