微量白蛋白聯合β2-微球蛋白和血清光抑素在糖尿病腎病早期診斷中的應用

王衛

（眉山市人民醫院檢驗科，四川眉山 620010）

微量白蛋白聯合β2-微球蛋白和血清光抑素在糖尿病腎病早期診斷中的應用

王衛

（眉山市人民醫院檢驗科，四川眉山 620010）

目的探討尿微量白蛋白(mAlb)聯合血清β2-微球蛋白(β2-MG)和血清胱抑素(Cys-C)在糖尿病腎病(DN)早期診斷中的應用。方法根據尿蛋白排出率隨機選擇35例微量尿蛋白排出糖尿病患者(A組)和35例大量尿蛋白排出糖尿病患者(B組)以及36例健康者作為對照組。比較各組間患者mAlb、β2-MG及Cys-C水平的差異，分析mAlb、β2-MG和Cys-C與DN發病風險的關聯性以及三者聯合檢測DN的準確性。結果A組和B組mAlb、β2-MG、Cys-C水平均顯著高于對照組(P＜0.05)；B組mAlb、β2-MG、Cys-C水平均顯著高于A組(P＜0.05)；mAlb、β2-MG、Cys-C與DN發病風險的關聯系數分別為2.92、2.75、2.60，三者與DN發病的危險性均存在顯著正相關(P＜0.05)；mAlb、β2-MG、Cys-C三者聯合檢測靈敏度、特異性和診斷符合率分別達到94.45%、94.64%和93.17%，顯著高于三者單獨檢測和三者兩兩結合的值(P＜0.05)；而假陽性率和假陰性率僅為5.36%和5.55%，均顯著低于三者單獨和三者兩兩結合檢測的值(P＜0.05)。結論mAlb、β2-MG和Cys-C與糖尿病患者腎功能損失存在顯著相關性，三者聯合檢測對DN患者早期診斷具有較高的準確性，可作為DN早期預測的重要指標之一。

糖尿病腎病；早期診斷；微量白蛋白；β2-微球蛋白；血清胱抑素

糖尿病腎病(Diabetic nephmpathy，DN)是糖尿病的一種嚴重并發癥，是糖尿病的重要致死、致殘原因之一[1]。DN起病較為隱匿，在早期糖尿病階段就可出現腎臟病理改變，當出現臨床蛋白尿時腎損害已進入不可逆階段，因此，早期診斷對于穩定和改善DN患者臨床癥狀具有重大的意義[2]。以往臨床上常采用尿素氮、肌酐等對DN進行早期診斷，但這均難以判斷糖尿病患者早期腎損傷[3]。本文采用尿微量白蛋白(mAlb)、β2-微球蛋白(β2-MG)和血清胱抑素(Cys-C)三者聯合對DN患者進行早期診斷，分析三者單獨檢測和聯合檢測間的檢測靈敏度、特異性和吻合度，探討三者聯合檢測在DN早期診斷中的意義，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院2012年1月至2013年5月收治的70例糖尿病患者，其中男性37例，女性33例，年齡42～79歲，中位年齡（54.82±7.16）歲，病程3～11年，平均（6.41±1.39）年。診斷標準：所有病例均空腹血糖≥7.8 m mol/L，或(和)飯后2 h血糖≥11.1m mol/L，符合WHO糖尿病診斷及分型標準確診。排除標準：各種原發性腎小球腎炎及各種繼發性腎小球腎炎如狼瘡性腎炎；高血壓腎病，腎淀粉樣變，腎盂腎炎，腫瘤，服用過腎毒性藥物史的病例等。根據尿蛋白排出率(UAER)將病例分為微量尿蛋白排出組(A組，UAER 20～200 μg/min)和大量尿蛋白排出組(B組，UAER＞200 μg/min)，兩組各35例。另設立健康對照組36例。各組在例數、年齡、性別構成、病程等各方面差異無統計學意義，具有可比性(P＞0.05)，見表1。

表1 各組患者間一般資料比較(±s)

表1 各組患者間一般資料比較(±s)

組別例數(例)男/女(例)年齡(歲)病程(年) A組B組對照組P值35 35 36＞0.05 18/17 19/16 19/17＞0.05 55.29±8.24 55.31±7.95 55.27±8.12＞0.05 6.25±1.33 6.28±1.41 6.31±1.25＞0.05

1.2 研究方法采集所有病例和正常對照組晨尿8 ml，離心分離取上清液，采用免疫比濁法，應用日立7600全自動生化分析儀測定尿中mAlb水平。采集患者和正常對照組早晨空腹血4 ml，離心分離血清，采用免疫比濁法，利用日立7600全自動生化分析儀檢測血清β2-MG和Cys-C水平。采用本地區正常對照組值做為陽性判定標準：mAlb濃度為9.52 mg/L，β2-MG濃度為1.46 mg/L，Cys C濃度為1.05 mg/L[4]。

1.3 觀察指標與評價方法比較各組間mAlb、β2-MG和Cys-C濃度差異；以mAlb、β2-MG和Cys-C水平為應變量，以UAER為自變量，分析三者與DN發病風險的關聯性；比較mAlb、Cys-C，β2-MG單獨檢測和兩兩結合以及三者聯合診斷的靈敏度、特異性、診斷符合率、假陽性率和假陰性率。以靈敏度代表檢測的陽性率，靈敏度(%)=真陽性/(真陽性+假陰性)× 100%；以特異性表示無病患者的陰性百分率，特異性(%)=真陰性/(真陰性+假陽性)×100%；以診斷符合率表示診斷情況和現實情況相同的百分率，診斷符合率(%)=(真陽性+真陰性)/(真陽性+假陽性+真陰性+假陰性)×100%；以假陽性表示無病被判有病的百分率，假陽性率(%)=假陽性/(假陽性+真陰性)×100%；以假陰性率代表有病被誤判無病的百分率，假陰性率(%)=假陰性/(真陽性+假陰性)×100%。靈敏度、特異性、診斷符合率越高表面診斷準確率越高，假陽性率和假陰性率越低表示診斷越準確[5]。

2 結果

2.1 各組間mAlb、β2-MG和Cys-C水平比較A組和B組mAlb、β2-MG、Cys-C水平均顯著高于對照組(P＜0.05)；B組mAlb、β2-MG、Cys-C水平均顯著高于A組(P＜0.05)，差異均有統計學意義，見表2。

表2 各組患者間mAlb、β2-MG和Cys-C水平比較(±s，mg/L)

表2 各組患者間mAlb、β2-MG和Cys-C水平比較(±s，mg/L)

注：與對照組比較，aP＜0.05；與A組比較，bP＜0.05。

組別例數(例)mAlb β2-MG Cys-C A組B組對照組35 35 36 35.17±7.21a96.68±14.75ab9.52±1.93 3.11±0.72a6.58±1.02ab1.46±0.57 7.3±2.52a16.22±3.48ab1.05±0.39

2.2 mAlb、β2-MG、Cys-C與DN發病風險的關聯性mAlb、β2-MG和Cys-C與DN發病風險的關聯系數分別為2.92、2.75和2.60，三者與DN發病的危險性均存在顯著正相關(P＜0.05)，見表3。

2.3 mAlb、Cys-C、β2-MG及三者聯合預測效果比較mAlb、β2-MG、Cys-C三者聯合靈敏度、特異性和診斷符合率分別達到94.45%、94.64%和93.17%，顯著高于三者單獨檢測和三者兩兩結合的值(P＜0.05)；而假陽性率和假陰性率僅為5.36%和5.55%，均顯著低于三者單獨和三者兩兩結合檢測的值(P＜0.05)。mAlb、β2-MG和Cys-C三者兩兩結合檢測靈敏度、特異性和診斷符合率，顯著高于三者單獨檢測的值(P＜0.05)；而假陽性率和假陰性率顯著低于三者單獨檢測的值(P＜0.05)，見表4。

表4 兩組患者mAlb、Cys-C、β2-MG及三者聯合預測效果比較(%)

3 討論

糖尿病腎病(DN)是腎臟的一種慢性的損害，呈進行性，機體一旦出現蛋白尿則病情往往進行性發展至終末期腎臟病，需要腎臟替代治療[6]。DN的發病機制較為復雜，長期血糖控制欠佳是導致糖尿病腎損害的重要因素，2型糖尿病患者中有20.5%會演變成DN。研究證實糖尿病的早期腎損傷是可逆的，及時對糖尿病患者腎損害進行早期診斷和治療，可延長患者生存時間及提高生活質量。因此，糖尿病患者腎損傷的早期診斷具有重要的意義。目前，臨床上主要以UAER作為DN分期的依據，但UAER易受血壓、運動、月經期、尿路感染及酮體狀態等因素影響，且DN患者在早期腎活檢發現時組織學已改變，而臨床上卻無癥狀，尿常規和普通的腎功能檢查仍可正常。因此，需要更為靈敏的檢測指標來診斷糖尿病患者腎臟早期的改變[7]。

DN早期主要以尿微量白蛋白(mAlb)為主要特征，mAlb是一種帶負電荷的小分子蛋白，正常情況下mAlb很難通過腎小球基底膜，95%的mAlb被重吸收，當腎小球濾過屏障受損時，尿中mAlb率過量超過腎小管的重吸收能力，尿中mAlb含量升高，因此，尿mAlb可作為DN早期預測的重要標志物之一[8]。熊永瑞[8]研究認為檢測mAlb水平可作為DN早期損害的一個敏感指標。本文中A組和B組mAlb水平均顯著高于對照組，這表明DN患者腎臟損傷程度越高，其mAlb水平越高，mAlb可作為DN早期損害的一個敏感指標，這與熊永瑞[8]研究結果一致。

β2-MG是體內有核細胞包括血小板、淋巴細胞、多形核白細胞產生的一種小分子球蛋白。正常人β2-MG的合成率及從細胞膜上的釋放量相當恒定，降解部位在腎臟，易被腎小球濾過而被近端腎小管重吸收，并在腎小管上皮細胞中分解破壞成氨基酸，故而正常情況下β2-MG的排出是微量的。血清β2-MG的升高可反映腎小球濾過功能受損，而尿液中排出β2-MG增高，則提示腎小管損害或濾過負荷增加。其含量的測定不受外界因素的影響，對腎臟損傷的評估更為準確敏感[9]。唐明照等[9]研究認為β2-MG是一個DN早期診斷的準確、敏感、可靠的指標。本文中A組和B組β2-MG水平均顯著高于對照組，這表明DN患者腎臟損傷程度越高，其β2-MG水平越高，這表明β2-MG可作為DN早期腎損害的一個敏感指標，這與唐明照等[1]研究結果一致。

Cys-C是一種堿性非糖化蛋白，屬于半胱氨酸蛋白酶抑制劑家族成員之一，Cys-C能自由通過腎小球濾過膜并在近曲小管被重吸收和降解，腎小球濾過的Cys-C也不會返回血流中，腎臟是唯一清除循環中Cys-C的器官。因此，血液Cys-C不但是反映腎小球濾過率較為理想的內源性標準物，也是反映糖尿病患者腎功能損傷的一項靈敏指標，在腎小球改變的早期，就能在血液中檢測到Cys-C濃度的變化[10]。劉勇等[10]研究發現DN患者早期Cys-C濃度顯著高于健康對照者，認為Cys-C濃度是DN早期診斷的重要指標。本研究發現A組和B組Cys-C水平顯著高于對照組，腎損傷程度越高，Cys-C水平越高，這表明Cys-C可做為DN早期診斷的指標之一，與劉勇等[10]研究結果一致。

雖然mAlb、β2-MG和Cys-C可作為DN早期診斷的有效指標，但三者單獨檢測的準確性均不甚理想，本研究結果顯示三者單獨檢測的靈敏度和特異性均未超過90%，而假陽性和假陰性率均超過了10%。近年來，有研究者逐漸采用不同檢驗指標聯合檢驗的方式對DN患者進行早期診斷，并取得了理想的檢測效果。李海新等[11]采用同型半胱氨酸聯合Cys-C對DN進行早期診斷，唐明照等聯合聯合Cys-C、HCY、Hs-CRP、β2-MG以及Cr對DN進行檢測，結果檢測特異性和靈敏度顯著提高。本研究顯示mAlb、β2-MG和Cys-C三者聯合靈敏度、特異性和診斷符合率分別達到94.45%、94.64%、93.17%，顯著高于mAlb、Cys-C、β2-MG三者單獨檢測和兩兩聯合檢測的值；而假陽性率和假陰性率僅為5.36%和5.55%，均顯著低于mAlb、β2-MG、Cys-C三者單獨檢測的值，這表明聯合檢測有利于提高DN患者早期檢測的準確率，這與李福萍等[12]研究結果一致。

綜合上述，我們認為mAlb、β2-MG、Cys-C與糖尿病患者腎功能損失存在顯著相關性，三者聯合檢測對DN患者早期診斷具有較高的準確性，可作為DN早期預測的重要指標之一。

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Application of albumin combined with β2-microglobulin and cysteineproteinase in the early diagnosis of diabetic nephmpathy.

WANG Wei.Department of Clinical Laboratory,People's Hospital of Meishan City,Meishan 620010,Sichuan,CHINA

ObjectiveTo investigate the application of albumin(mAlb)combined with β2-microglobulin (β2-MG)and cysteineproteinase(Cys-C)in the early diagnosis of diabetic nephmpathy(DN).MethodsThe DN patients were divided into the microalbuminuria urinary protein group(group A,n=35),the macroalbuminuria group (group B,n=35)and healthy control group(the control group,n=36),according to the removal rate of urinary protein (UAER).The levels of mAlb,β2-MG and Cys-C between the three groups were compared.The correlation between the levels of mAlb,β2-MG,Cys-C and the risk of DN as well as the detection accuracy of mAlb associated β2-MG and Cys-C were analyzed.ResultsThe levels of mAlb,β2-MG and Cys-C in group A and group B were all significantly higher than those in the control group(P＜0.05).The levels of mAlb,β2-MG and Cys-C in group B were significantly higher than that in group A(P＜0.05).The correlation coefficient between mAlb,β2-MG,Cys-C levels and the DN risk danger were 2.92,2.75 and 2.60,all showing significantly positive correlation(P＜0.05).The detection sensitivity,specificity and diagnostic accordance rate of combined detection of mAlb,β2-MG and Cys-C reached 94.45%, 94.64%and 93.17%,respectively,all significantly higher than the value of separate detection and combined detection of two indexes(P＜0.05).The false positive rate and false negative rate was only 5.36%and 5.55%,significantly lower than the detection value of separate detection and combined detection of two indexes(P＜0.05).ConclusionThere are significantly correlations between mAlb,β2-MG,Cys-C and the renal injury.The combined detection of mAlb, Cys-C and β2-MG has higher accuracy on early diagnosis of diabetic nephropathy and could be used as a method of early clinical diagnosis on DN.

Diabetic nephmpathy;Early diagnosis;Micoralbuminuria;β2-microglobulin;Cysteineproteinase

R587.2

A

1003—6350（2014）05—0685—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.05.0266

2013-09-16)

王衛。E-mail：15966152@qq.com