通脈活血散治療兔急性下肢靜脈血栓的實驗研究*

冒衛(wèi)華 薛正俊 謝翠華 張秀紅 陳曉燕

（江蘇省如皋市中醫(yī)院，江蘇 如皋 226500）

通脈活血散治療兔急性下肢靜脈血栓的實驗研究*

冒衛(wèi)華 薛正俊 謝翠華 張秀紅 陳曉燕

（江蘇省如皋市中醫(yī)院，江蘇 如皋 226500）

目的觀察通脈活血散治療兔急性下肢靜脈血栓的有效性及安全性。方法新西蘭大白兔48只建立急性下肢靜脈血栓模型后隨機分為尿激酶聯(lián)合肝素組（A組）、通脈活血散外敷組（B組），每組24只。各組在血栓形成3 d后給藥，分別在用藥后3、7、14 d檢測各組凝血指標，評估其安全性，通過靜脈彩超評估其有效性。結(jié)果B組的凝血酶原時間（PT）延長時間較A組短（P＜0.05），纖維蛋白原（FBG）較A組小（P＜0.05），A組和B組的D-二聚體值（D-D）均逐漸降至正常，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。A組和B組的溶栓效果均較好，其差異性無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結(jié)論通脈活血散治療兔急性下肢靜脈血栓是有效的，具有較高的安全性。

疾病模型 動物 靜脈血栓形成 通脈活血散 抗凝藥

深靜脈血栓形成與纖溶功能低下有密切聯(lián)系。抗凝、溶栓是治療下肢深靜脈血栓形成重要的治療方法之一，但抗凝、溶栓藥物存在出血的副作用［1］。通脈活血散是本院長期臨床應用的有效方劑，具有清營涼血、活血化瘀、溶栓通脈的作用。本實驗通過通脈活血散治療兔急性下肢靜脈血栓，對比尿激酶聯(lián)合肝素治療方案的實驗研究，觀察脈活血散治療兔急性下肢靜脈血栓的有效性及安全性。

1 材料與方法

1.1 材料 健康新西蘭大白兔48只，6月齡，體質(zhì)量2500～3000 g，雌雄不拘，由南通大學實驗動物中心提供。通脈活血散1200 g（由徐長卿、當歸、丹參、雞血藤、葛根、延胡索、桃仁、川芎、姜黃、郁金、血竭、乳香、沒藥、五靈脂、木香、白檀香、蒲黃、王不留行、三七、穿山甲、樟腦、冰片、白芥子、降香各、麝香、細辛等組成，由本院制劑室提供）；肝素鈉（河北常山生化藥業(yè)股份有限公司，生產(chǎn)批號130211）；尿激酶（天津生物化學制藥公司，生產(chǎn)批號20130101）；血常規(guī)分析儀（日本，Sysmex公司，XE-2100型）；凝血分析儀（日本，Sysmex公司，CA-1500型）；彩超（美國，飛利浦公司，IU-22型）。

1.2 急性下肢靜脈血栓形成模型的制作 3％苯巴比妥鈉40 mg/kg靜脈麻醉，固定于兔臺上，左下肢及腹股溝區(qū)備皮，常規(guī)消毒，在腹股溝區(qū)以股動脈為中心稍偏內(nèi)側(cè)作一長約2 cm切口，于股動脈內(nèi)側(cè)解剖并游離出股靜脈約3 cm，直視下置無損傷血管夾于其近端，在靜脈充盈狀態(tài)下，再與遠端置無損傷血管夾，暫時阻斷股靜脈1.5 h，經(jīng)25 G細針穿刺無血液流出，證實該段靜脈內(nèi)血栓已形成，去除血管夾，并在近心端先前阻斷處，繞以1號醫(yī)用絲線，不完全結(jié)扎，縮窄血管腔約1/3，以防止血栓脫落。造模后不用抗凝藥物，自由飲水、進食。血栓形成模型制作成功率為100％。

1.3 動物分組 48只新西蘭大白兔，隨機分為尿激酶聯(lián)合肝素組（A組）和通脈活血散治療組（B組），每組24只。A、B組再分為用藥后3、7、14 d 3個時相亞組，每個亞組段8只兔。

1.4 藥物治療 成功建模后3 d，A組給予耳緣靜脈注入尿激酶10000 U/kg和皮下肝素鈉500 U/kg，用藥量參照人和動物體表面積劑量換算法［2］。B組給予通脈活血散每只10 g，用蜂蜜調(diào)制后，外敷整只患肢，外用專制護套保護，每2日換藥1次。

1.5 觀察指標 血栓形成3 d后開始用藥，為了便于整個治療療程的連續(xù)觀察，分別于用藥后的第3、7、14日進行觀察和檢測，療程為14 d。（1）血液學指標包括治療前及治療后3、7、14 d檢測凝血酶原時間（PT），纖維蛋白原（FBG），D-二聚體（D-D）。（2）靜脈血栓的溶栓效果：血栓形成后的第3日及用藥后的3、7、14 d行下肢靜脈彩超檢查，了解血栓再通情況。

1.6 療效標準 以采超結(jié)果評定。顯效：下肢靜脈完全通暢。有效：下肢靜脈部分通暢。無效：下肢靜脈不通暢。

1.7 統(tǒng)計學處理 血液學指標采用單因素方差分析（SNK-q檢驗），靜脈血栓的溶栓效果以等級資料表示，采用多個樣本兩兩比較的軼和檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血液指標變化比較 見表1。溶栓后A組和B組相比較，在不同的時間段均出現(xiàn)PT值延長、FBG值降低（P＜0.01），A組和B組的值在用藥后的第3日差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），A組和B組在用藥后的第7、14日D-D值逐漸降至正常，組間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

表1 兩組不同時間凝血酶原PT、FBG值比較s）

表1 兩組不同時間凝血酶原PT、FBG值比較s）

與A組比較，*P＜0.05。

組 別D-D（μg/L）A組 血栓形成第3日 0.015±0.004（n＝24）用藥后第3日 0.029±0.005用藥后第7日 0.018±0.003 7.17±0.19* 4.42±0.17*（n＝24）用藥后第3日 8.64±0.14* 4.13±0.17* 0.033±0.004*用藥后第7日 10.80±0.23 3.96±0.21 0.027±0.003 PT（s） FBG（g/L）7.20±0.15 4.47±0.20 11.71±0.18 3.26±0.15 12.56±0.30 2.73±0.19 B組 血栓形成第3日 0.016±0.003*

2.2 兩組靜脈血栓的溶栓效果比較 見表2。在用藥后第3、7日，A、B組的溶栓效果差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），第14日時，兩組溶栓效果差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

表2 兩組不同時間溶栓效果比較（n）

3 討論

抗凝、溶栓治療是目前治療急性下肢深靜脈血栓的主要方法，但外周靜脈溶栓治療也加大了大出血的風險［3］。下肢深靜脈血栓形成是靜脈回流障礙性疾病，Virehow提出其病因與患肢局部血流緩慢、血管內(nèi)膜損傷、血液高凝狀態(tài)3大因素有關(guān)［4］。各種手術(shù)后、創(chuàng)傷與骨折、產(chǎn)后、惡性腫瘤及長期臥床的慢性疾病，是導致該病形成的主要誘因。抗凝治療是目前治療深靜脈血栓的基石［5］，肝素是最普遍的抗凝藥物。本病屬于中醫(yī)學“脈痹”、“血痹”等范疇，其發(fā)生與濕熱、氣滯、寒凝、血瘀等因素有關(guān)，以瘀血阻滯、脈絡不通為主要病理機制［6］，故活血化瘀為基本法則而貫穿于治療的始終，并根據(jù)辨證結(jié)合清熱利濕、理氣行滯、溫陽通脈等，可有效提高治療的針對性和療效。本方以中藥局部外敷為主，遵吳師機“外治之理，即內(nèi)治之理，外治之藥，即內(nèi)治之藥，所異者法耳”之說。中藥經(jīng)皮膚，腧穴、五官、九竅滲透吸收，達到治療目的，有簡、便、廉、驗等特點和無胃腸道反應及肝腎損害等毒副作用，為國內(nèi)外醫(yī)藥界所矚目。正基于此，本實驗就“通脈活血散”治療兔急性下肢靜脈血栓的有效性及安全性進行探討。

本實驗證實通脈活血散可以有效的溶解血栓，起到抗栓的作用，出血風險低，具有相對較高的安全性。血液學指標檢測表明，溶栓后的3 d、7 d、14 d，A組和B組相比，A組的PT延長時間大于B組，A組的FBG值較B組小；PT延長、FBG值降低說明溶栓有效，但是隨著PT延長、FBG值降低伴隨而來的出血的風險性也會增加，可見A組出血的危險性較B組大，這可能與尿激酶激活全身纖溶系統(tǒng)有關(guān)，由此提示通脈活血散治療組的安全性較高。目前，尿激酶治療劑量無統(tǒng)一標準，現(xiàn)有增大劑量的趨勢［7］。尿激酶劑量過大可引起全身纖溶系統(tǒng)激活而導致嚴重出血等并發(fā)癥，所以不能通過不斷追加劑量來維持溶栓效果。另外，尿激酶和肝素的主要副作用是出血，兩者同時應用更容易發(fā)。而從本方配伍及治療來看有如下特點。（1）本方均以益氣活血為主，特別是活血通絡更為重要，活血化瘀之品數(shù)量多且量較大，如當歸、丹參、玄胡、桃仁、川芎、姜黃、郁金、血竭、乳香、沒藥、五靈脂、蒲黃、王不留行、三七、穿山甲、降香等具有行氣活血、破瘀之功效；徐長卿為活血解毒、利水消腫；葛根生用能破血治瘡、散郁火；白芥子豁痰利氣、散結(jié)通絡止痛；雞血藤補血活血、舒筋通絡；白檀香有辛溫行散、利氣之功效。（2）為了促進敷于局部的藥物對皮膚的穿透力，本方中還配伍了大量芳香性藥物，如樟腦、冰片、細辛、麝香等。據(jù)離體皮膚實驗表明，芳香類藥物敷于局部，可使皮質(zhì)層透皮能力提高6～8倍。（3）藥物直接作用病變部位，并以蜂蜜為基質(zhì)，使藥力更加持久，治療效果更加顯著。（4）本方治療下肢靜脈血栓形成既放寬了手術(shù)及抗凝藥物溶栓對發(fā)病時間的嚴格要求，又避免了出血等并發(fā)癥的發(fā)生率，同時減少了監(jiān)測凝血功能的檢驗次數(shù)，為患者節(jié)省了住院時間和費用。（5）藥物配置及使用方法比較簡潔，適合基層醫(yī)療機構(gòu)推廣使用。參考文獻

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An Experimental Study on Tongmaihuoxue Powder Treating Rabbits w ith Acute Venous Thrombosis ofLower Limb

MAO Wei-hua，XUE Zheng-jun，XIE Cui-hua，et al. Rugao Hospital of Traditional ChineseMedicine in Jiangsu Province，Jiangsu，Rugao 226500，China

Objective：To investigate the effectiveness and safety of Tongmaihuoxue powder treating rabbits with acute venous thrombosis of lower limb.M ethods：The acute venous thrombosis model was established with 48 rabbits and they were random ly divided into two groups：combination of urokinase and heparin group （A）and Tongmai huoxue powder group（B），each group including 24 rabbits.Drugs were administrated 3 days after thrombosis.Coagulation index was tested to assess the safety.Doppler ultrasound was used to assess the effectiveness on day 3，day 7，and day 14.Results：The prolongation of prothmmbin time（PT）in group B was shorter than that in group A（P＜0.05）.Fibrinogen（FBG）value in group B was lower than that in group A（P＜0.05）.D-dimer（D-D）value in group A and group B gradually returned to normal range.There was no difference between two groups（P＞0.05）.The thrombolytic effect was better but was not statistically different between group A and group B（P＞0.05）.Conclusion：Tongmaihuoxue powder treating rabbits with acute deep venous thrombosis is effective and safe.

Disease model，Animal；Venous thrombosis；Tongmaihuoxue powder；Anticoagulants

R285.5

A

1004-745X（2014）04-0635-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2014.04.030

江蘇省南通市科技社會發(fā)展計劃資助項目（No.S11938）

2013-12-22）