先天性白內障大鼠血液生化及血液流變學分析

田小蕓，尤金煒，董 敏，許龍祥，趙志剛，陳 莉，惲時鋒

（南京軍區南京總醫院比較醫學科，南京 210002）

先天性白內障大鼠血液生化及血液流變學分析

田小蕓，尤金煒，董 敏，許龍祥，趙志剛，陳 莉，惲時鋒

（南京軍區南京總醫院比較醫學科，南京 210002）

目的 測定先天性白內障大鼠血液常規、生化正常值及血液流變學變化。方法 采用XS-800i血常規分析儀和OLYMPUSAV2700生化自動分析儀對185～211 g大鼠共計90只進行血液常規和生化檢測及用SA-6600自動血流變測試儀對血液進行流變學的測定。結果 血像檢測結果是白內障與正常對照同性比較無差異顯著性（P＞0.05）；小眼白內障與正常對照同性比較紅細胞寬度（RDW）間差異顯著（P＜0.01或P＜0.05）。血生化檢測結果是白內障大鼠與正常對照組同性間比較白蛋白（ALB）差異顯著（P＜0.01或P＜0.05）雌性與對照組比較尿素（Ure）差異顯著（P＜0.01），小眼白內障雌性與正常對照比較肌酐（Cr）差異非常顯著（P＜0.01）。白內障、小眼白內障大鼠的紅細胞是雄性的低于雌性（P ＜0.05，P ＜0.01）而血小板是雄性的高于雌性（P ＜0.01），肌酐是雄性低于雌性P＜0.01），正常組雄雌間無差異；血液流變學各組間無差異顯著性。結論 白內障大鼠與正常組大鼠間某些血常規及生化指標有一定的差異，該數據為該鼠在這領域的使用提供參考。

先天性白內障；大鼠；血常規；血生化；血液流變學

臨床上將晶狀體混濁稱為白內障，出生后即存在或出生后1年內才逐漸形成的晶狀體部分或全部混濁稱為先天性白內障。先天性白內障是造成兒童失明和弱視的主要原因，其發病率約為0.01％～0.06％，占兒童致盲性眼病的第二位。任何參與、影響晶狀體發育的基因突變都可能導致先天性白內障的發生［1-3］。2007年由屏障環境繁殖大鼠生產的仔鼠中發現5只白內障大鼠，其中3只雄鼠和2只雌鼠，于是我們將該鼠保留下來；又從屏障種鼠中找到了白內障母鼠，但此后屏障中就再也未產過白內障仔鼠。先天性白內障約有1/3是與遺傳有關。遺傳性先天性白內障有三種不同遺傳方式：常染色體顯性遺傳、常染色體隱性遺傳和X連鎖隱性遺傳3種；先天性白內障的發生、發展是一個非常復雜的過程，其致病機制至今仍未闡明，眾多學說林立，但尚無定論［4-6］。我們將白內障仔鼠進行了傳代，現小眼白內障已穩定傳代22代，封閉群白內障大鼠封閉繁殖近7年，后代中有白內障大鼠、小眼白內障大鼠及正常大鼠三種；小眼白內障大鼠近交后代5代內全部是小眼白內障大鼠，但是從第6代開始出現分化，后代中不僅有小眼白內障，還有單眼白內障及小眼無白內障情況出現，第7代還出現一只長牙鼠，在第10代時選擇了回交，繼續選擇雙眼白內障大鼠留種，從第14代開始后代均為小眼白內障大鼠，并能穩定遺傳。現就血液常規、生化及血液流變情況進行分析，為該鼠提供一些基礎數據。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

取自繁白內障、小眼白內障大鼠和正常對照185～211 g雌雄各15只進行實驗，生產許可證SCXK（軍）2007-012。

1.2 飼養管理及環境

實驗大鼠均飼養在屏障環境中，室內的溫濕度均由中央空調控制，溫度為20℃ ～26℃，相對濕度為50％～70％，光照明暗交替12 h/天，使用許可證號為SYXK（軍）2007-029。

大鼠所食飼料為Co60輻照飼料，營養成份為：粗蛋白21.8％，粗脂肪為4.0％，粗灰份為7.8％，粗纖維3.0％，水份10.1％，鈣1.7％，磷1.08％，生產許可證號為：蘇飼審（2008）01008，另每周加喂一次葵花籽。飲水為消毒的酸化水，使用的墊料、盒子等一切用具均進行131℃5 min高壓預真空滅菌。

1.3 標本采集

大鼠麻醉后先以無菌玻璃毛細管（內徑0.9～1.1 mm）經大鼠眶靜脈叢采血，血常規入專用抗凝血常規管中，血生化入1 mL離心管中，以3000 r/min的速度離心10 min，分離血清并送檢。血流變從腹主靜脈插管采血，采血后立即慢速顛倒，充分混勻，防止產生泡沫及血液凝固，切忌劇烈搖晃或震蕩，并在試管上貼上標識，采血后盡快檢測，室溫保存，不超過4 h，全自動血流變分析儀檢測。

1.4 測定儀器

血常規采用日本產sysmex，型號是XS-800i血常規分析儀自動檢測，血液生化采用 OLYMPUS AV2700生化自動分析儀進行檢測；血流變采用賽科希德SA-6600自動血流變測試儀。

1.5 統計分析

使用SPSS13.0統計軟件，采用單因素方差分析對數據進行顯著性檢驗，統計結果以±s表示，以P ＜0.05為差異有統計學意義［7-8］。

2 結果

各組大鼠的血常規檢測結果見表1，從表1中可以看出白內障與正常對照同性比較無差異顯著性（P＞0.05）；小眼白內障與正常對照同性比較RDW間差異顯著（P＜0.01或P＜0.05）。

白內障大鼠RBC、MCH、MCHC、MCV、PLT、PCT雌雄間差異非常顯著（P＜0.01）；小眼白內障大鼠的Hb、RBC雌雄間差異顯著（P＜0.05），MCHC、MCV、PLT、PCT雌雄間差異非常顯著（P＜0.01）；正常對照組MCH、MCHC、MCV雌雄間差異非常顯著（P＜0.01）。

各組大鼠的血生化檢測結果見表2。從表2中可以看出白內障大鼠與正常對照組同性間比較ALB差異顯著（P＜0.01或P＜0.05），白內障和小眼白內障雌性與對照組比較Ure差異顯著（P ＜0.01或P＜0.05），小眼白內障雌性與正常對照比較Cr差異非常顯著（P＜0.01）。

白內障大鼠的TP、ALB、Cr雌雄間差異非常顯著（P＜0.01），GL、Ure差異顯著（P ＜0.05）；小眼白內障的TP、ALB、GL、Cr雌雄間差異非常顯著（P＜0.01），CHO差異顯著（P＜0.05）；正常對照組的TP、ALB雌雄間差異非常顯著（P ＜0.01），GL、CHO差異顯著（P＜0.05）。

先天性白內障大鼠血液流變學結果見表3。結果顯示每組大鼠的血液流變指標間沒有顯著性差異（P ＞0.05）。

3 討論

正常實驗動物的各種生物學數據雖然有其一定的數值，但這是相對而言的，常因動物品種、年齡、測定方法、測定時間、測定時技術熟練程度等不同，其數值也隨之變化［9］。臨床生物化學檢驗是測定機體內各種體液化學成份的含量，通過生物化學檢查，了解疾病的發生、發展和預后等情況。白內障是影響人類健康的常見病、多發病。研究白內障的病因學及影響因素，是預防和治療該病的有力措施。然而迄今為止對白內障的發病機制還未能完全達成共識，有晶狀體上皮細胞凋亡研究，有晶狀體蛋白研究，有晶狀體氧化損傷及生化研究，有遺傳性白內障基因研究，有輻射性白內障研究等等。

本實驗用的白內障大鼠是本科室自已培育繁殖的白內障大鼠，表現為白內障、小眼白內障二種。實驗檢測結果顯示小眼白內障雄性大鼠的血紅蛋白、白內障組與小眼白內障雄性大鼠的紅細胞數、MCHC和血小板比積及正常組雄性大鼠的MCHC均低于雌性；白內障組、小眼白內障雄性大鼠的平均紅細胞體積、血小板計數及白內障組和正常組雄性大鼠的平均紅細胞體積、MCH均高于雌鼠。小眼白內障大鼠的血紅蛋白雌性高于雄性，而血小板計數是雌性低于雄性，和田小蕓等的報道相一致［9］，血紅蛋白除能與氧結合形成氧鐵血紅蛋白外，尚能與二氧化碳結合形成血紅蛋白衍生物達到組織供氧及調節酸堿平衡的作用，血小板可保護毛細血管的完整性，參與機體的凝血過程；白內障組和正常組卻沒有這種變化，是否是近交系與封閉群的區別還有待檢驗。

白內障、小眼白內障和正常對照組雌性鼠的總蛋白、白蛋白和球蛋白值均高于雄性鼠，血清蛋白具有維持血液正常膠體滲透壓和PH，運輸多種代謝物，調節被運輸物質的生理作用和解除其毒性，免疫作用以及營養作用等多種功能。血清蛋白水平主要反映肝臟合成功能和腎臟病變造成蛋白丟失的情況。不僅存在于血清內，也分部于各種細胞外液，并不斷進行互相交換［10］。本實驗無論是白內障大鼠還是對照組大鼠均表現為雌性蛋白升高現象，這可能是雌性鼠的生理決定。白內障組、小眼白內障與正常對照組間球蛋白無組間差異，血清球蛋白是多種蛋白質的混合物，包括具有防御作用的免疫球蛋白和補體等，說明這方面的免疫功能無差異。白內障、小眼白內障鼠雌性組肌酐均高于雄性組，而對照組雖然從數字上看也是雌性高于雄性，但沒有統計學差異，是否是白內障基因和性別共同作用的結果還待探討；血肌酐濃度取決于機體產生和攝入與腎臟的排泄能力，基本不受飲食、高分解代謝等腎外因素影響，在外源性肌酐攝入量穩定，體內肌酐生成量恒定的情況下，其濃度主要取決于腎小球的濾過功能。因此，肌酐濃度可以在一定程度上準確反映腎小球濾過功能的損害程度［10］。本實驗檢測結果為白內障與正常對照組肌酐無組間差異，說明腎臟功能是好的，但白內障組間存在性別差異而對照組沒有，這種差異是否是白內障突變基因引起還有待進一步驗證。

血液流變學是研究血液流變特異性在疾病的發生與發展及疾病的診治中作用的一門流體力學與醫學交叉的新型學科，血流流變學是從流體力學角度來評價血液的流動性及影響流動性的因素，為我們認識血液拓展了新的視野，與血液流動學相關的不僅僅是血液病，，同時與心血管疾病、神經系統、呼吸系統等疾病也有密切的關系，因此通過血液流變學的研究和對其指標的檢測可對多種疾病的病因，病理生理及臨床療效作出恰當的評價［11］。而中醫認為白內障多有陰陽失調，氣血不足，氣滯血瘀，其血流變具有粘、濃、凝、聚之共性，尤其是對老年性白內障，先天性白內障多由于發育不良或胚胎時期感染、中毒、營養不良等所致［12-13］，本實驗中所測大鼠血流變各組間無差異，一方面是因為本實驗大鼠是先天性白內障；另一方面也是因為該大鼠不是老年大鼠，這在疾病研究機制、藥物治療及預防上就有別于其它類型的白內障，為該病的預防、治療及藥物篩選提供理想的模型動物。

表1 先天性白內障大鼠的血常規變化Tab.1 Blood routine values of the rats with congenital cataract

表2 白內臟大鼠血生化檢測結果Tab.2 Blood biochemical parameters of the rats with congenital cataract

表3 白內障大鼠血液流變情況Tab.3 Hemorheology levels of the rats with congenital cataract

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Analysis of the routine blood counts and blood biochem ical parameters and hemorheology in the rats w ith congenital cataract

TIAN Xiao-yun，YOU Jing-wei，Dong-Min，XU Long-xiang，ZHAO Zhi-gang，CHEN Li，YUN Shi-feng
（Department of Comparative Medicine，Nanjing General Hospital of Nanjing Military Command，Nanjing 210002，China）

Objective Tomeasure the range of routine blood counts and blood biochemical parameters，to analyze hemorheology of the rats with congenital cataract.Methods Blood samples were taken from 90 rats with congenital cataract weight about 185～211 g.Routine blood analysis was performed and blood biochemical and hemorheology paramenters were determind using an automatic blood biochemical and hemorheology analyzer.Results There were no significant difference（P ＞ 0.05）between the cataract rats and the normal rats in Blood test results；but there were significant difference between themicrophthalmos cataract rats and the normal same-sex rats（P ＜0.01 or P ＜0.05）.The biochemical results is the cataract rats and the normal rats were different significantly in ALB group（P ＜0.01 or P＜0.05），and the femalemicrophthalmos cataract rats compared with the control rats had significant difference in Ure（P＜0.01），the female cataract rats ompared with the normal ratswere very significant difference in Cr group（P ＜0.05 or P＜0.01）.The erythrocyte counts of themale cataract rats and malemicrophthalmos cataract ratswere significantly lower than that in the female ones，respectively（P ＜0.05，P ＜0.01）.The platelet counts of the male cataract rats and the malemicrophthalmos cataract ratswere significantly higher than that in the female ones，respectively（P＜0.01），and thecreatinine of themale cataract rats and themalemicrophthalmos cataract ratswere significantly lower then that in the female ones，respectively（P＜0.01）.Therewere no significantdifference in every group on hemorheology.Conclusions There were significant differences in some blood indexes between the congenital cataract rats and the normal rats.These datamay become useful reference for biomedical researcher in this field.

Congenital cataract；Rat；Routine blood counts；Blood biochemical parameters；Hemorheology

R319 R332

A

1671-7856（2014）03-0020-05

10.3969.j.issn.1671.7856.2014.003.005

南京總醫院基金（2011001）。

田小蕓（1965-），女，碩士，副主任技師，研究方向：醫學實驗動物繁育，tianxiaoyun838@sina.com。

惲時鋒（1965-），男，主任，博士，主任技師，研究方向：醫學實驗動物管理。

2014-01-20

研究報告