注射用間苯三酚與5種溶媒配伍穩定性及不溶性微粒考察*

吳繼禹,梁晶,黃愛芳

(溫州醫科大學附屬第一醫院藥劑科,溫州 325000)

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注射用間苯三酚與5種溶媒配伍穩定性及不溶性微粒考察*

吳繼禹,梁晶,黃愛芳

(溫州醫科大學附屬第一醫院藥劑科,溫州 325000)

目的 建立注射用間苯三酚的含量測定方法,并考察該藥與5種常用溶媒的配伍穩定性。方法用高效液相色譜法測定注射用間苯三酚與5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液、葡萄糖氯化鈉注射液、復方氯化鈉注射液配伍后不同時間點間苯三酚的含量,同時考察配伍液外觀、顏色、pH及不溶性微粒的變化。結果在室溫條件下放置6 h,5種配伍液外觀、pH、含量均無明顯變化,不溶性微粒符合相關規定。結論注射用間苯三酚與5種輸液配伍在6 h內穩定。

間苯三酚;穩定性;色譜法,高效液相;微粒,不溶性

間苯三酚(phloroglucinol)是新型親肌性非阿托品非罌粟堿類純平滑肌解痙藥,其對痙攣的胃腸道和泌尿生殖系的平滑肌有解痙作用,但對非痙攣平滑肌影響很小。臨床主要用于治療消化系統和膽道功能障礙引起的急性痙攣性疼痛;急性痙攣性尿道、膀胱、腎絞痛;婦科痙攣性疼痛[1]。注射用間苯三酚按照其藥物說明書是稀釋于5%或10%葡萄糖注射液中,而沒有提及是否可以選用其他臨床常用輸液作為本品的稀釋溶媒。由于部分患者病情需要,臨床上常需其他輸液作為配伍溶媒,給醫師和藥師臨床用藥造成困擾。為了科學、安全應用本品,避免由于配伍不當引起不良反應,筆者模擬臨床用藥情況,以注射用間苯三酚分別與5種臨床常用輸液配伍進行考察,為臨床合理用藥提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Waters高效液相色譜儀,2487紫外-可見檢測器;B2500-DTH超聲脫氣機(上海必信超聲有限公司);PH2-3C精密pH計(上海雷磁儀器廠);756MC紫外分光光度計(上海第三儀器分析廠);GWJ-4型智能微粒監測儀(天津市天大天發科技有限公司)。

1.2 試藥 注射用間苯三酚(南京恒生制藥廠,規格: 4 mL∶40 mg,批號:110906,110915,110927);間苯三酚標準品(國家環境保護總局標準樣品研究所,批號: 43510,規格:1 mg·mL-1);5%葡萄糖注射液(昆明南疆制藥有限公司,批號:C1108040,規格:100 mL);10%葡萄糖注射液(批號:11022603,規格:250 mL),葡萄糖氯化鈉注射液(批號:11062603,規格:250 mL),0.9%氯化鈉注射液(批號:10103001,規格:500 mL),復方氯化鈉注射液(批號:11080501,規格:500 mL),均由浙江康樂藥業股份有限公司生產;乙腈為色譜純,其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 間苯三酚含量測定方法的考察

2.1.1 對照品溶液的制備 精密量取間苯三酚標準品1 mL,置10 mL量瓶中,加入適量流動相[1%磷酸鹽緩沖液(pH 2.02)∶乙腈=(96∶4)]稀釋至刻度,搖勻;再精密量取1 mL,置25 mL量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻,即得,每毫升相當于間苯三酚(C6H6O3)0.004 mg。

2.1.2 供試品溶液的制備 精密量取注射用間苯三酚樣品1 mL,置100 mL量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻;再精密量取1 mL,置25 mL量瓶中,加流動相稀釋至刻度,作為供試品溶液。

2.1.3 空白對照液的制備 用1%磷酸鹽緩沖液(pH:2.02)∶乙腈=96∶4的流動相作空白對照。

2.1.4 測定波長的選擇 取上述對照品溶液,以流動相為空白,在波長200～350 nm處進行掃描,結果在(216±1)nm處有最大吸收峰,故選擇216 nm作為測定波長。

2.1.5 色譜條件 Waters高效液相色譜儀;2487紫外-可見檢測器;Symmetry C18色譜柱(4.6 mm× 150 mm,5μm);流動相:1%磷酸鹽緩沖液(pH:2.02)∶乙腈=96∶4;檢測波長:216 nm;流速: 1.0 mL·min-1;柱溫:25℃;進樣:10 μL。

2.1.6 系統適應性實驗 分別取空白對照液、對照品溶液、供試品溶液各10 μL,按照“2.1.5”項色譜條件檢測,結果見圖1。

圖1 3種溶液高效液相色譜圖

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2.1.7 標準曲線的繪制 精密量取1 mg·mL-1間苯三酚對照品溶液200 μL置于EP管中,加流動相200 μL溶解,等倍稀釋,搖勻,重復上述步驟至0.97 μg·mL-1,按照“2.1.5”色譜條件測定,以峰面積(A)為縱坐標,樣品濃度(C)為橫坐標,進行線性回歸,得標準曲線:A=24 399C+11 360,r=0.999 9(n= 10)。結果表明,間苯三酚在質量濃度0.97～500.00 μg·mL-1內線性關系良好。

2.1.8 精密度實驗 取對照品溶液,按照“2.1.5”色譜條件,注入高效液相色譜儀,重復進樣6次,記錄峰面積,RSD為0.84%(n=6),表明本法精密度良好。

2.1.9 加樣回收實驗 精密量取已知含量的同一批號注射用間苯三酚(批號:110927)樣品9份,每份1 mL,分別加入質量濃度為1 mg·mL-1的間苯三酚對照品溶液2,4,8 mL,按“2.1.2”項下規定進行稀釋,按HPLC法進行加樣回收實驗,每份平行操作兩次,結果平均回收率100.91%,RSD=1.90%。見表1。

2.1.10 含量測定 取供試品溶液,按照“2.1.5”色譜條件,注入高效液相色譜儀,測定峰面積,計算注射用間苯三酚的含量。結果見表2。

表1 間苯三酚加樣回收率實驗結果

表2 注射用間苯三酚含量測定結果 %,n=3

2.2 配伍液穩定性實驗[2-4]

2.2.1 配伍溶液的配制 模擬臨床常用用藥濃度,取注射用間苯三酚一支,分別用5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化鈉注射液、0.9%氯化鈉注射液、復方氯化鈉注射液100 mL,配制成含間苯三酚質量濃度約為0.4 mg·mL-1的5種配伍溶液。

2.2.2 外觀性狀與pH 分別在0,1,2,3,4,5,6 h后,觀察上述配伍液的外觀,用納氏比色管觀察顏色變化并測定pH。pH變化見表3。

2.2.3 含量變化 精密量取上述時間點配伍液,稀釋100倍,在“2.1.5”色譜條件下,按峰面積外標法計算各時間點相對于0 h時的相對百分含量。結果見表4。

2.2.4 不溶性微粒檢查 分別精密量取上述時間點配伍液5 mL,采用《中華人民共和國藥典》2010年版規定的光阻法,測定其每毫升不溶性微粒數[5]。結果見表5。

2.2.5 配伍結果 間苯三酚與5種輸液的配伍溶液在6 h內,各時間點配伍液外觀均澄清無混濁無沉淀,含量無明顯改變,pH變化范圍在0.06～0.17。不溶性微粒均符合《中華人民共和國藥典》2010年版一部相關規定。

3 討論

間苯三酚及其制劑尚未被《中華人民共和國藥典》收載,高效液相色譜法檢測間苯三酚所用的流動相多為乙腈-水作為流動相,回收率不高[6-7]。經過摸索,建立1%磷酸鹽緩沖液(pH2.02)-乙腈(96∶4)為流動相,加樣回收率高,峰型對稱,可用于間苯三酚的含量測定。

表3 5種配伍液不同時間pH變化

表4 5種配伍液中間苯三酚相對含量變化 %

表5 間苯三酚與5種輸液配伍后不同粒徑微粒的變化 粒·mL-1

輸液中不溶性微粒的存在將對人體造成嚴重的危害,各國藥典都對輸液微粒作嚴格要求,《中華人民共和國藥典》明確規定微粒的檢查方法和限量標準[8]。本實驗采用光阻法測定不溶性微粒。從結果可知,間苯三酚與5種輸液配伍后,其≥10 μm的微粒數均在10粒以下,≥25 μm的微粒數為0,且在6 h內無明顯變化,符合《中華人民共和國藥典》每毫升中含≥10 μm微粒不得超過25粒,≥25 μm微粒不得超過3粒的規定。

配伍穩定性實驗表明,注射用間苯三酚與5種臨床常用輸液溶媒配伍后6 h內外觀、pH、含量均無明顯變化,不溶性微粒數符合《中華人民共和國藥典》規定。說明注射用間苯三酚與此5種輸液配伍6 h內均穩定,可以配伍使用,并為注射用間苯三酚在臨床上合理使用提供了用藥依據。

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DOI 10.3870/yydb.2014.10.036

R971;R969.2

B

1004-0781(2014)10-1385-03

2013-11-07

2014-02-16

*溫州市科技計劃項目(Y20120099)

吳繼禹(1977-),男,浙江溫州人,副主任藥師,碩士,從事醫院藥學研究。電話:0577-86550291,E-mail:sord@ tom.com。