復方氟替陰道泡騰栓的制備及其質量控制

陳 梅（連云港市第一人民醫院藥學部，江蘇 連云港 222001）

混合性陰道炎是指陰道受多種病菌（如細菌、霉菌等）、原蟲（如滴蟲）侵襲造成陰道菌群失調而引起的炎癥性病變。臨床實踐證明，由單純某一種病原引起的陰道炎極少，多屬于混合感染，因此臨床表現各異、輕重不同[1]。由于陰道炎患病部位的特殊性，局部給藥可提高藥物作用濃度，并避免全身用藥的不良反應，治療效果好。陰道泡騰栓在陰道吸水發泡后，藥物可迅速分散到陰道的各個部位，深達子宮頸，與同等劑量的口服劑型相比療效更佳，成為治療該疾病的常用劑型[2]。氟羅沙星（Fleroxacin）是第三代氟喹諾酮類抗菌藥物，具有抗菌譜廣、抗菌力強、半衰期長等優點，是控制呼吸、泌尿、生殖系統感染的有效藥物[3]；替硝唑則對滴蟲和大多數厭氧菌有抑制或殺滅作用，且有研究證明替硝唑與氟喹諾酮類抗菌藥物配伍非常穩定[4]。因此，筆者根據臨床常用劑量采用上述兩種藥物制成了復方氟替陰道泡騰栓，并探討了制備工藝和質量控制標準，現報道如下。

1 材料

1.1 儀器

1100型高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；電熱恒溫水浴箱（江蘇常熟醫療器械廠）。

1.2 藥品與試劑

氟羅沙星對照品、替硝唑對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號:201209、120801，純度:99.8%、99.5%）；氟羅沙星原料藥（青島制藥股份有限公司，批號:120801，純度:99.3%）；替硝唑原料藥（天津天藥藥業股份有限公司，批號:121102，純度:99.7%）；半合成脂肪酸甘油三酯（湖北江陵制藥廠，批號:120191，純度:99.0%）；其他輔料均為藥用級，試劑均為分析純。

1.3 動物

家兔，♀，體質量250～300 g，由江蘇綠葉制藥有限公司提供，許可證號:SCXK（蘇）2011-0011。

2 方法與結果

2.1 處方

氟羅沙星200 g，替硝唑500 g，碳酸氫鈉216 g，酒石酸氫鉀380 g，聚山梨酯8020 ml，月桂氮酮3 ml，半合成脂肪酸甘油三酯適量，共制成1000粒。

2.2 制備

取碳酸氫鈉于60℃下干燥2 h、酒石酸氫鉀于105℃下干燥3 h，研細，過6號篩備用；取半合成脂肪酸甘油三酯適量，置搪瓷桶內，經水浴加熱融化后加入氟羅沙星和替硝唑（100目細粉）攪勻，再加入聚山梨酯80、月桂氮酮，充分攪拌均勻后注入栓模內（溫度40℃，栓模內均勻涂抹潤滑劑），待栓劑凝結后鏟去溢出部分，啟模，包裝即可。每粒含氟羅沙星0.2 g、替硝唑0.5 g，共制備3批，批號為20130520、20130525、20130530。

2.3 質量控制

2.3.1 外觀性狀。本品為淡黃色圓錐形，長約30 mm，最大直徑約為15 mm，栓殼厚度約為3 mm，表面光滑細膩、色澤均一。

2.3.2 鑒別。在含量測定項下，樣品溶液主峰的保留時間分別與氟羅沙星對照品溶液和替硝唑對照品溶液主峰的保留時間一致。

2.3.3 檢查[5]。（1）質量差異:取泡騰栓10粒，精密稱量并計算出平均粒質量，參照2010年版《中國藥典》附錄質量差異檢查法，將每粒泡騰栓質量與平均粒質量進行比較，其質量差異在±7.5%以內。（2）融變時限:取泡騰栓3粒，參照2010年版《中國藥典》附錄“融變時限檢查法”檢查，結果本品在25 min內全部融化，符合規定。（3）發泡量:按2010年版《中國藥典》附錄ⅠA陰道泡騰片的相關內容檢測發泡時間和發泡量。取直徑約為1.5 cm的20 ml量筒，加入蒸餾水1 ml，置（40±2）℃水浴中5 min后，加入本品1粒，測得本品平均起始發泡時間為4.6 min，平均發泡量為（15±2.5）ml，符合藥典標準。

2.4 含量測定

2.4.1 檢測波長的選擇。精密稱取氟羅沙星、替硝唑、空白輔料（栓劑基質）適量，分別用甲醇-二氯甲烷（1∶1）溶解，配制替硝唑溶液（8.0 μg/ml）、氟羅沙星溶液（20.0 μg/ml）及空白輔料溶液，分別在200～600 nm波長范圍內進行掃描。結果顯示，空白輔料不干擾氟羅沙星和替硝唑的吸收；最大吸收波長氟羅沙星為288 nm，替硝唑為312.5 nm。分別以上述波長對本復方制劑進行測定，結果288 nm波長檢測時靈敏度較高，故選擇其作為同時測定兩種主藥含量的檢測波長[6]。

2.4.2 色譜條件。色譜柱為Zorbax SB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為0.05 mol檸檬酸-乙腈（65∶35，用三乙胺調pH至4.0），流速為1 ml/min；檢測波長為288 nm；進樣量為20 μl。取空白輔料、氟羅沙星和替硝唑的對照品溶液、供試品溶液（批號:20130520）進樣測定，色譜見圖1。

圖1 高效液相色譜圖A.空白輔料；B.對照品溶液；C.供試品溶液；1.氟羅沙星；2.替硝唑Fig 1 HPLC chromatogramsA.blank excipients；B.reference solution；C.sample solution；1.fleroxacin；2.tinidazole

由圖1可知，空白輔料對樣品測定無干擾，氟羅沙星與替硝唑峰分離完全，峰形良好，氟羅沙星、替硝唑的保留時間分別為3.80、4.95 min。

2.4.3 標準曲線的繪制。精密稱取105℃干燥至恒質量后的氟羅沙星50 mg、替硝唑100 mg，分別置于100 ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，再精密量取1、2、3、4、5、6、8 ml，分別置于50 ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻。取20 μl進樣測定，以峰面積（A）為縱坐標、質量濃度（c）為橫坐標進行線性回歸，得氟羅沙星、替硝唑的回歸方程為:A＝46052.1c+203051.7（r＝0.9986）、A＝30407.1c+75032.5（r＝0.9994），檢測質量濃度的線性范圍分別為10.0～80.0、20.0～160.0 μg/ml。

2.4.4 精密度試驗。取“2.4.3”項下質量濃度為80.0 μg/ml的氟羅沙星對照品溶液和120.0 μg/ml的替硝唑對照品溶液，按“2.4.1”項下色譜條件連續進樣測定6次，結果氟羅沙星和替硝唑峰面積的RSD分別為0.48%和0.63%（n＝6），表明該方法精密度良好。

2.4.5 回收率試驗。按處方比例分別精密稱取氟羅沙星、替硝唑和空白輔料，按“2.1”和“2.2”項下方法制備成80%、100%、120%3種水平的復方氟替陰道泡騰栓；按“2.4.6”項下方法制成供試品溶液，各取樣20 μl進樣，測定峰面積，計算回收率，結果見表1。

表1 回收率試驗結果（n＝3）Tab 1 Results of recovery tests（n＝3）

2.4.6 樣品含量測定。取泡騰栓10粒，水浴加熱熔化，混勻，冷卻，切碎，精密稱取適量（約含氟羅沙星20 mg、替硝唑50 mg），置于50 ml量瓶中，水浴將樣品熔融，加入流動相適量使其完全溶解，定容至50 ml；精密吸取1 ml，用流動相稀釋并定容至50 ml。取樣20 μl進樣，測定峰面積，代入回歸方程計算含量。結果3批樣品中氟羅沙星含量分別為標示量的97.35%、102.38%、98.52%；替硝唑含量分別為標示量的98.55%、101.27%、99.83%。

2.5 穩定性試驗

將制成的復方氟替陰道泡騰栓分別于5、25、35℃下放置0、30、60、90 d，留樣期間對其外觀性狀、融變時限、發泡量、含量等指標進行觀察、測定。結果顯示，與0 d比較，該泡騰栓的上述指標均無明顯變化，初步表明在觀察期內樣品相對穩定。

2.6 陰道刺激性試驗

取♀家兔6只，均分為2組，一組兔每天陰道給予復方氟替陰道泡騰栓1枚，每日1次，連續給藥7 d，末次給藥后24 h內處死家兔，觀察所有家兔陰道及子宮黏膜組織的變化；另一組兔給予0.9%氯化鈉注射液作為對照組，同法操作。結果顯示，與對照組比較，給藥家兔的陰道及子宮黏膜組織均未見紅腫現象，初步認為本品局部用藥對陰道無明顯刺激性。

3 討論

復方氟替陰道泡騰栓是根據女性生理特點研制的一種陰道泡騰栓劑。氟羅沙星為第三代喹諾酮類藥物，具有廣譜抗菌作用，替硝唑對滴蟲和厭氧菌的活性很強，二者聯合用于陰道炎治療中，可發揮藥物協同作用，提高治療效果[7]。本研究結果顯示，所制復方氟替陰道泡騰栓留樣觀察90 d，外觀顏色無變化，融變時限、發泡量、含量等指標穩定，提示復方氟替陰道泡騰栓質量穩定。

綜上所述，復方氟替陰道泡騰栓處方合理、制備工藝簡便、質量穩定可控，是治療混合性陰道炎較好的劑型，其臨床作用值得進一步研究。

[1]盛福德，湯勇，陳秀梅，等.細菌性陰道炎患者陰道微生態的實驗研究[J].現代檢驗醫學雜志，2013，28（3）:78.

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[3]李全國，張云鳳.氟羅沙星與洛美沙星后效應的對比研究[J].中國當代醫藥，2014，21（6）:182.

[4]李博，楊興官，李紅玉.復方替硝唑載體栓的制備及質量考察[J].中國藥房，2012，23（37）:3502.

[5]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:二部[S].2010年版.北京:中國醫藥科技出版社，2010:附錄6、8、85.

[6]張雷，李欣，李中華，等.氟替中空泡騰栓的研制[J].中國藥業，2003，14（8）:468.

[7]張海俠.乳酸左氧氟沙星聯合替硝唑治療婦科盆腔炎的療效觀察[J].中國老年保健醫學，2010，8（3）:37.

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