不同植物蛋白水平的代乳粉對羔羊胸腺和脾臟組織器官的影響

熊忙利,李光芒

(1.咸陽職業技術學院，陜西 咸陽 712000; 2.藍田縣普化鎮畜牧獸醫站,陜西 藍田 710505)

羔羊代乳粉能有效節省羊乳、降低飼喂成本、增加養羊經濟效益。代乳粉的使用是養羊業發展的趨勢，有著非常廣闊的應用前景。隨著羊奶制品價格的上漲，現代羔羊代乳粉主要是根據羔羊的營養需要采用來源廣、價格低的植物性原料代替羊奶飼喂羔羊。本試驗是根據羔羊營養需要及鮮羊奶組分配制羔羊代乳粉，研究價格低廉、來源廣泛的植物性蛋白原料代替鮮羊奶對羔羊早期脾臟和胸腺器官及其組織形態的影響，從而為羔羊代乳粉的使用提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗隨機選取體質健康、體重接近、剛出生的關中奶山羊羔羊，陜西省永壽縣綠康生態養殖專業合作社提供。

1.2 試驗設計

試驗采用單因子隨機區組試驗設計。隨機選取體質健壯、體重接近、剛出生的關中奶山羊羔羊45只，將45只羔羊隨機分成3組(Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組)，每組3個重復，每個重復5只羔羊。Ⅰ組飼喂植物蛋白水平為65%代乳粉、Ⅱ組飼喂植物蛋白水平為75%代乳粉、Ⅲ組飼喂植物蛋白水平為85%代乳粉。

羔羊出生后0～5日齡飼喂初乳，飼養管理按常規進行。試驗分為預飼期和試驗期，預試期6～10日齡逐漸過渡到代乳粉，試驗期10～70日齡(60 d)各組按照不同植物蛋白水平的代乳粉飼喂。飼喂時，先用65℃左右溫開水沖調代乳粉，再用涼開水調制成含12%的干物質液體(溫度38℃左右)飼喂羔羊。飼喂時做到定人、定時、定量、定溫，代乳粉飼喂30min后自由飲涼開水。7日齡后在飼喂代乳粉基礎上添加優質青干草，15日齡后添加精料，自由采食和飲水。

試驗所用代乳粉參照羔羊飼養標準(NRC，2001))進行配制。不同植物蛋白水平代乳粉營養組成和成分見表1。

1.3 測定項目

試驗結束后，停食24 h，測定羔羊體重，每組隨機選擇5只羔羊靜脈放血處死，取1/3的胸腺和脾臟，將其稱重后放入100 ml·L-1的中性福爾馬林固定液內，按常規制作成石蠟包埋塊，以5 μm連續切片，HE染色后在顯微鏡下觀察并照相。顯微鏡由咸陽職業技術學院提供，型號為：江南永新XD-202生物倒置顯微鏡。

脾臟指數=脾臟重量/宰前活重，胸腺指數=胸腺重量(g)/宰前活重(kg)；胸腺皮質細胞數是用400倍鏡的顯微鏡記錄胸腺皮質區的淋巴細胞數量，總共計算12處胸腺小葉皮質淋巴細胞數量，計算平均數值即為胸腺皮質淋巴細胞數量；胸腺皮質厚度是用100倍鏡的顯微鏡測量一個胸腺小葉皮質最寬處和最窄處的數值，計算平均值即為一個胸腺小葉皮質厚度，按照同樣方法測量胸腺小葉30個，計算平均值為胸腺皮質厚度；脾臟中央動脈周圍淋巴鞘細胞數：在400倍鏡下，以脾中央小動脈為中點，計壓在標線下的淋巴細胞數，按同樣方法計算5個脾中央小動脈周圍淋巴鞘細胞數，取均數即為脾中央小動脈周圍淋巴鞘細胞數。

1.4 數據處理

試驗數據采用SPSS 15.0統計軟件進行分析以P<0.05為差異顯著性判斷標準。

2 結果與分析

2.1 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊脾臟和胸腺指數的影響

結果見表2。由表2可知，Ⅰ組和Ⅱ組胸腺指數、脾臟指數均顯著高于Ⅲ組(P<0.05)。Ⅰ組和Ⅱ組胸腺指數分別較Ⅲ組高18.75%、15.62%，脾臟指數分別較Ⅲ組高12.06%、9.93%。

表1 不同植物蛋白水平代乳粉營養組成和成分

表2 不同植物蛋白水平的代乳粉對羔羊

注：同列數據肩標小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)，肩標小寫字母相同或無肩標表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

2.2 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊胸腺皮質厚度級皮質細胞數的影響

結果見表3。

由表3可知，Ⅰ組和Ⅱ組皮質厚度均顯著高于Ⅲ組(P<0.05)，Ⅰ組和Ⅱ組皮質厚度分別較Ⅲ組高35.75%、22.86%，胸腺皮質細胞個數各組間差異不顯著(P>0.05)。

2.3 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊脾臟中央小動脈周圍淋巴鞘細胞數的影響

結果見表4。

表3 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊胸腺皮質厚度及皮質細胞數測定結果

表4 不同植物性代乳粉對羔羊脾臟中央小動脈周圍淋巴鞘細胞數測定結果

由表4可知，脾臟中央小動脈周圍淋巴鞘的淋巴細胞數各組間差異不顯著(P>0.05)。

3 討論

3.1 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊胸腺指數及胸腺組織學形態影響的討論

胸腺皮質厚度和胸腺指數是反映胸腺組織器官生長發育的重要指標之一。試驗表明試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的胸腺皮質厚度和胸腺指數均顯著高于Ⅲ組，而Ⅰ組和Ⅱ組之間差異不顯著。說明用植物蛋白水平為85%的代乳粉代替鮮羊乳對羔羊早期胸腺的生長發育有一定的抑制作用。

影響胸腺生長發育受阻的原因：羔羊對乳蛋白的消化率高于對植物蛋白的消化率，隨著植物性蛋白水平的增多，羔羊對代乳粉中的蛋白質消化率下降，導致羔羊對植物蛋白質的消化吸收降低，研究發現蛋白質的種類和數量影響羔羊胸腺生長的發育和胸腺皮質厚度；研究發現大豆中的胰蛋白酶抑制因子會抑制飼糧中半胱氨酸和蛋氨吸收，而蛋氨酸對動物脾臟和胸腺組織器官的發育影響較大。因此，植物蛋白水平的增加會抑制羔羊胸腺的生長發育。

3.2 不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊脾臟指數及脾臟組織學形態影響的討論

脾臟指數是衡量脾臟生長發育的重要指標之一，脾臟指數增大表明機體免疫功能增強。試驗表明試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組脾臟指數顯著高于Ⅲ組，Ⅰ組和Ⅱ組脾臟指數分別較Ⅲ組高12.06%、9.93%，Ⅰ組和Ⅱ組之間差異不顯著。說明用植物蛋白水平為85%的代乳粉代替鮮羊乳對羔羊脾臟發育有抑制作用。

觀察顯示Ⅰ組和Ⅱ組動脈周圍淋巴鞘較Ⅲ組略厚，計數結果顯示各組間動脈周圍淋巴鞘淋巴細胞數量差異不顯著，說明不同植物蛋白水平代乳粉對羔羊細胞免疫應答有一定增強作用，其原因可能與乳清蛋白的免疫增進作用有關，需進一步研究。

綜上所述，與含85%植物蛋白代乳粉相比較，代乳粉中植物蛋白水平為75%、65%時對羔羊10～70日齡脾臟和胸腺器官的正常發育影響較小，而且植物蛋白水平為75%的代乳粉比植物蛋白水平為65%的代乳粉原料價格便宜。可見，選用植物蛋白水平為75%的代乳粉對羔羊脾臟和胸腺組織器官的生長發育影響較小且成本較低。