蒼耳草的薄層鑒別研究

劉婷 王仕平

摘要：本文通過實驗，采用薄層色譜法，對不同產地的10批蒼耳草藥材進行了系統的定性分析，研究和建立了蒼耳草的薄層色譜方法。這種方法靈敏、準確、專屬性強、重復性好，可用于蒼耳草的質量控制。

關鍵詞：蒼耳草 薄層色譜 綠原酸

蒼耳草為菊科植物蒼耳Xanthium sibiricum Patrin.干燥地上部分具有祛風散熱、除濕解毒的功效，用于治療感冒、頭風、頭暈、鼻淵、目赤、風濕痹痛、拘攣麻木、目翳、風癩、疔腫、熱毒瘡瘍、皮膚瘙癢，痢疾等癥狀。全草含蒼耳苷（strumaroside）、隱蒼耳內酯（xanthinin）、蒼耳內酯（xanthumin）、8-（3-異戊烯基）-5，7，3，4-四羥基黃酮、咖啡酸（caffeic acid）、1，4-二咖啡?？鼘幩帷ⅵ?谷甾醇、豆甾醇、二十八醇、β-香樹脂醇等。蒼耳草分布在全國各地，山東、江西宜春、湖北、江蘇及安徽等都是它的主產區。該品種類型多收載于各地方的藥材標準中，如《江西省中藥材標準》1996年版。為了更有效地控制蒼耳草的質量，筆者參考了相關文獻，研究和建立了蒼耳草的TLC鑒別法。

一、儀器與試藥

儀器包括BP211D Sartorius電子天平（十萬分之一，由德國賽多利斯公司制造）；FA2004電子天平（萬分之一，由上海天平儀器公司制造）；KH-250DB型數控超聲波清洗器（由昆山禾創超聲儀器有限公司制造）；CAMAG紫外觀測箱（254 nm/365 nm）（由瑞士卡瑪公司制造）；929型薄層鋪板儀。

試藥包括綠原酸對照品（由中國食品藥品檢定研究院提供，批號是110753-201214，含量為96.6%）；蒼耳草對照藥材（自采，經本草考證為菊科植物蒼耳Xanthium sibiricum Patrin的干燥地上部分）；蒼耳草藥材（自采或市場購買）；硅膠GF254（由青島海洋化工廠生產）；聚酰胺薄膜（由臺州市路橋私家生化塑料廠生產）；其他試劑均為分析純。

二、方法與結果

第一步，取蒼耳草粉末（過三號篩）1g，置具塞錐形瓶中，加50%甲醇25 mL，超聲（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，進行過濾，然后濾液蒸干，殘渣加50%甲醇1mL進行溶解，作為供試品溶液。另外，取蒼耳草對照藥材粉末（過三號篩）約1g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B）試驗，吸取上述對照藥材溶液、供試品溶液、空白試劑溶液各2μL，分別點于同一以0.5%羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（16：4：1）為展開劑，展開，取出晾干，在紫外光燈（254 nm/365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，分別顯現相同顏色的熒光斑點，空白試劑無影響（見圖1）。

1～5.供試品；6.對照藥材；7～9.供試品；10.空白；11～12.供試品

圖1 薄層色譜圖

第二步，取蒼耳草粉末（過三號篩）2g，置具塞錐形瓶中，加乙醚25 mL，超聲（功率250 W，頻率40 kHz）20 min，進行過濾，濾液低溫揮至約1 mL，作為供試品溶液。另外，取蒼耳草對照藥材粉末（過三號篩）約2 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB）試驗，吸取上述對照藥材溶液、供試品溶液、空白試劑溶液各2 μL，分別點于同一以0.5%羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠GF254薄層板上，以環己烷-乙酸乙酯-甲酸（10：2：0.2）為展開劑，展開，取出晾干，分別在日光和紫外光燈（254 nm/365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，分別顯現相同顏色的斑點或熒光斑點，空白試劑無影響（見圖2）。

1～5.供試品；6.對照藥材；7～9.供試品；10.空白；11～12.供試品

圖2 薄層色譜圖

第三步，取蒼耳草粉末（過三號篩）1g，置具塞錐形瓶中，加石油醚（30℃～60℃）25mL，超聲10 min（功率250 W，頻率40 kHz），放冷，棄去石油醚液，藥渣揮干，殘渣加稀鹽酸1mL與乙酸乙酯20 mL，搖勻，超聲30 min，進行過濾，濾液蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取蒼耳草對照藥材粉末1g，同法制成對照藥材溶液。取綠原酸對照品適量，加甲醇制成2 mg·mL-1的溶液，作為對照品溶液。按照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B）試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液、供試品溶液、空白試劑溶液各2μL，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開劑，展開，取出晾干，在紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品和對照藥材色譜相應的位置上，分別顯現相同顏色的熒光斑點，空白試劑無影響（見圖3）。

4.綠原酸；5.對照藥材 7.空白（A圖）；其他為供試品

圖3 薄層色譜圖

三、討論

在蒼耳子的薄層鑒別中，有的文獻采用蘆丁作為對照品。但是，在本文中，筆者采用了對照藥材和綠原酸對照品作為參照。

在第一個試驗中，筆者分別考察了甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（16：4：1）、正丁醇-冰醋酸-水（4：1： 5）上層溶液、乙酸乙酯-丁酮-甲醇-水（6：2：1：1）展開系統；在第二個試驗中，筆者分別考察了環己烷-乙酸乙酯-甲酸（10：2：0.2）和正己烷-乙酸乙酯（9：1）展開系統；在第三個試驗中，筆者分別考察了乙酸丁酯-甲酸-水（7：2.5：2.5）上層溶液、乙酸乙酯-甲醇-甲酸（8：1：1）、醋酸展開系統，并同時采用了硅膠GF254薄層板及聚酰胺薄膜試驗。

結果表明：在第一個實驗中，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（16：4：1）展開的效果最好；在第二個實驗中，以環己烷-乙酸乙酯-甲酸（10：2：0.2）為展開系統的效果最好；在第三個實驗中，采用醋酸為展開劑，聚酰胺薄膜展開的效果最好。

綜上所述，本文采用了兩種不同極性的溶劑提取后展開，能夠很好地鑒別出蒼耳草的不同成分，可作為鑒別蒼耳草藥材的方法，同時也可以作為以蒼耳草為原料，采用不同提取工藝制劑的鑒別方式。

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（作者單位：劉婷 宜春職業技術學院；王仕平 宜春市食品藥品檢驗所 ）