HPLC法測定益腎調經口服液中芍藥苷的含量

陳 靜

（河南省商丘市第一人民醫院藥劑科，商丘476000）

HPLC法測定益腎調經口服液中芍藥苷的含量

陳 靜

（河南省商丘市第一人民醫院藥劑科，商丘476000）

目的建立HPLC法測定益腎調經口服液中芍藥苷含量的方法。方法采用Eclipse XDB-C18色譜柱，乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）為流動相；流速1.0ml·min-1；檢測波長230nm。結果芍藥苷在0.5165～2.066μg范圍內線性關系良好（r=0.9995），平均回收率為98.15%，RSD=0.91%（n=6）。結論本方法操作簡便，專屬性強，結果準確，可用于益腎調經口服液的質量控制。

芍藥苷；高效液相色譜法；含量測定；益腎調經口服液

益腎調經口服液是由白芍、紫石英、柴胡、鎖陽、枸杞子等藥材加工制成的醫院制劑，具有補腎疏肝，活血化瘀，調經之功效，用于調節垂體卵巢功能，促使卵泡發育，主要治療月經不調，無排卵性不孕等［1］。現行質量標準中未收載含量測定項目，不能有效地控制藥品質量。白芍為方中主藥，芍藥苷是白芍的主要有效成分［2］，本文以芍藥苷為指標成分，建立了益腎調經口服液中芍藥苷的高效液相測定法，為該制劑的質量控制提供了客觀的含量評價方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器Agilent 1260型高效液相色譜儀，AUW-220D電子分析天平，5210DT超聲處理器。

1.2 試藥芍藥苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110736-200934）；乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。益腎調經口服液（由柘城縣人民醫院提供，批號：130112、130311、130611）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件色譜柱：Eclipse XDB-C18色譜柱（4.6 ×150mm）；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）為流動相［3］；流速1.0ml·min-1；檢測波長230nm；進樣量10μl；理論板數應不低于2000。

2.2 線性關系考察取芍藥苷對照品約10mg，精密稱定，置100ml棕色量瓶中，加甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。按照“2.1”項色譜條件，分別進樣5、8、10、12、15、20μl，記錄芍藥苷峰面積值，以峰面積積分值（Y）對對照品濃度（X）進行線性回歸，得回歸方程：Y=285.34X+106.33 r=0.9995。結果表明，芍藥苷對照品濃度在0.5165～2.066μg范圍內與峰面積值呈良好的線性關系。

2.3 對照品溶液的制備取芍藥苷對照品約10mg，精密稱定，置100ml棕色量瓶中，加甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.4 供試品溶液及陰性對照溶液的制備精密量取本品約2ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇35ml，超聲處理30分鐘，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，作為供試品溶液。另取缺白芍的其他味藥按處方工藝制成陰性制劑，按上述方法制備陰性對照溶液。

2.5 干擾試驗取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各10μl，按照“2.1”項色譜條件，分別進樣測定，記錄色譜圖，結果見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.6 精密度試驗取同一對照品溶液，重復進樣5次，每次10μl，記錄峰面積，RSD=0.97%（n=5），表明精密度良好。

2.7 穩定性試驗取同一對照品溶液，分別在0、1、2、3、4、5、6h進樣測定，RSD=0.88%，供試品溶液在6小時內峰面積基本穩定。

2.8 加樣回收率試驗精密量取6份已知含量為2.389mg／ml的樣品0.5ml，置50ml量瓶中，分別精密加入濃度為0.1190mg／ml對照品溶液10ml，按照“2.4”項下供試品溶液制備方法制備溶液，按照“2.1”項色譜條件，分別測定，結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果（%）

2.9 樣品測定取3批樣品，按“2.4”項下方法制備供試液，各進樣10μl，按外標法計算芍藥苷的含量，結果見表2。

表2 3批樣品中芍藥苷的含量（n，%）

3 討論

試驗過程中，參考有關文獻［3-4］，考察了不同提取溶媒對芍藥苷提取率的影響，結果表明，芍藥苷易溶于稀乙醇和甲醇，但甲醇毒性較大，故選用稀乙醇提取。比較了超聲、回流等提取方法，結果顯示超聲提取簡便、快速，提取完全。

［1］河南省食品藥品監督管理局.河南省醫療機構制劑標準［S］.2004.

［2］國家藥典委員會，中華人民共和國藥典（一部）［S］.2010年版.北京：中國醫藥科技出版社，96-97.

［3］尹寧寧，徐華玲，徐麗華.白芍中芍藥苷含量測定影響因素的實驗研究［J］.中國醫藥導報，2009，6（11）：43-44.

［4］張瓊英.高效液相色譜法測定健兒樂顆粒中芍藥苷含量［J］.中國藥業，2010，19（17）：23.

醫書常見典故拾萃

理瀹：代指醫藥。《子華子·北宮意問》云：“子華子居北苓，北宮意公仲承侍，縱言而及于醫。子華曰：‘醫者理也，理者意也。藥者瀹也，瀹者養也。’”以此命名者有，吳師機改《外治醫說》為《理瀹駢文》，其自跋云：“《外治醫說》刊既成，時賢皆云不甚解。其欲得吾之說者，則取其方而已。予知說之不行也，而要圍墾遂棄。爰改名駢方，借《子華子》‘醫者理也，藥者瀹也’之句，摘理瀹二字以題其篇。”

珠塵：為傳說中的仙藥。晉·王嘉《拾遺記·虞舜》云：“（憑霄雀）常游丹海之際，時來蒼梧之野，銜青砂珠，積成壟阜，名曰珠丘。其珠輕細，風吹如塵起，名曰珠塵……仙人方迴《游南岳七言贊》曰：珠塵圓潔輕且明，有道服者得長生。”此言“珠塵”為輕細如塵的青砂珠，為傳說中的仙藥，服之可以長生。以此為書名者為清代吳省三的《藝海珠塵》。

——國家中醫藥管理局網站

De t e r mina tio n o f Pae onif o rin in Yis h en Tiaojin g Or al Liq uid b y HPL C

Chen Jing(Pharmacy Department,Shangqiu First People's Hospital,Shangqiu,Henan Province,476000,China)

ObjectiveTo establish a HPLC method of determination of paeoniforin in Yishen Tiaojing oral liquid.MethodThe chromatographic sxstem consisted of C18 column，used acetonitrile-0.1%phosphatesolution（14∶86）as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 230nm，the flow rate was 1.0ml·min-1.ResultsThe paeoniforin have a good a linear relationship in the range of 0.5165～2.066μg（r= 0.9995），the average recoverx vas 98.15%and RSD=0.91%（n=6）.ConolusionThe established method is accurate，sensitive and simple.It can be used for qualitx control of Yishen Tiaojing oral liquid.

Paeoniforin；HPLC；Determination；Yishen Tiaojing oral liquid

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.02.104

：1672-2779（2014）-02-0154-02

??楊 杰 本文校對：劉曉云

2013-10-17）