HPLC法測定二辛歸蒼通竅丸中阿魏酸的含量

朱會建

（河南省商丘市第一人民醫院藥劑科，商丘476000）

HPLC法測定二辛歸蒼通竅丸中阿魏酸的含量

朱會建

（河南省商丘市第一人民醫院藥劑科，商丘476000）

目的建立二辛歸蒼通竅丸中阿魏酸的含量測定方法。方法采用HPLC法，色譜條件為：色譜柱：Eclipse XDB-C18；流動相：甲醇-1%醋酸（30∶70）；流速：1.0ml·min-1；檢測波長：321nm。結果阿魏酸進樣量在0.04004～0.4004μg范圍內線性關系良好（r=0.9996），平均回收率為98.36%，RSD=1.13%（n=6）。結論本方法操作簡便，專屬性強，結果準確，可用于二辛歸蒼通竅丸的質量控制。

阿魏酸；高效液相色譜法；二辛歸蒼通竅丸；川芎

二辛歸蒼通竅丸，是由辛夷花、川芎、細辛、蒼耳子等藥材加工制成的復方制劑，具有辛芳開竅、活血止痛之功效，主治鼻竇炎、上額竇炎。原標準中僅有顯微鑒別，沒有定量指標，本文以方中君藥川芎的有效成分阿魏酸為指標，建立了二辛歸蒼通竅丸中阿魏酸的高效液相測定方法，操作簡便、省時、準確，可作為二辛歸蒼通竅丸的質量控制方法。

1 儀器與試藥

Agilent 1260型高效液相色譜儀，AUW-220D電子分析天平，5210DT超聲處理器；阿魏酸對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110773-200611）；乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件色譜柱：Eclipse XDB-C18色譜柱（4.6m150mm，5um）；流動相：甲醇-1%醋酸溶液（30∶70）為流動相；流速1.0ml·min-1；檢測波長321nm；進樣量10μl。

2.2 線性關系考察取阿魏酸對照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加70%甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml置25 ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，搖勻。按照“2.1”項色譜條件，分別進樣2、5、8、10、12、14、16、18、20μl，記錄阿魏酸峰面積值，以峰面積積分值（Y）對對照品進樣量（X）進行線性回歸，得回歸方程：Y=3719.2X+106.34r=0.9996。結果表明，阿魏酸對照品進樣量在0.04004～0.4004μg范圍內與峰面積值呈良好的線性關系。

2.3 對照品溶液的制備取阿魏酸對照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加70%甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置25ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.4 供試品溶液及陰性對照溶液的制備取本品約4.0g，研細，精密稱定，置25ml量瓶中，加入70%甲醇適量，超聲處理30分鐘，放冷，加70%甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，作為供試品溶液。另取缺川芎的其他味藥按處方工藝制成陰性制劑，按上述方法制備陰性對照溶液。

2.5 干擾試驗取上述3種溶液，按照上述色譜條件，分別注入高效液相色譜儀，進樣測定，記錄色譜圖，結果表明供試品溶液在與對照品溶液色譜相應的位置上，有相應的色譜峰，而陰性對照溶液在此保留時間無干擾。色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.6 精密度試驗取同一對照品溶液，重復進樣5次，每次10μl，記錄峰面積，RSD=1.12%（n=5），表明精密度良好。

2.7 穩定性試驗取同一對照品溶液，分別在0、1、2、3、4、5、6h進樣測定，RSD=1.03%，供試品溶液在6小時內峰面積基本穩定。

2.8 加樣回收率試驗稱取6份已測得阿魏酸含量的供試品（含量為0.01122mg／g），每份約2.0g，精密稱定，置25ml量瓶中，另分別精密加入對照品溶液（濃度為0.02202mg／ml）1.00ml，制備成供試品溶液，分別測定阿魏酸的含量，結果見表1。

2.9 樣品測定取3批樣品，按“2.4”項下方法制備供試液，各進樣10μl，按外標法計算阿魏酸的含量，結果見表2。

表1 加樣回收率試驗結果

表2 3批樣品中阿魏酸的含量（n，%）

3 討論

阿魏酸是川芎的有效成分，本文建立的高效液相色譜法測定阿魏酸的含量，該方法操作簡便，雜質對測定無干擾，重復性好，對控制該制劑的內在質量具有重要意義。

本文參考有關文獻［1-2］，針對本制劑的制備工藝及輔料的特性和影響因素，通過試驗證明，超聲處理30分鐘提取較為完全，且操作簡便快捷，故采用超聲提取。

［1］張秀麗.HPLC法測定川芎中阿魏酸的含量［J］.中國藥事，2009，23（5）：469-471.

［2］潘瑩.HPLC法同時測定通脈顆粒中丹參素、阿魏酸和葛根素的含量［J］.中國藥房，2011，22（4）：377-378.

醫書常見典故拾萃

上池、窺垣：喻指醫術高明。《史記·扁鵲倉公列傳》記載，扁鵲少時為人舍長，舍客長桑君常謹遇之，出入十余年，乃呼扁鵲私坐，間與語曰：“我有禁方，年老，欲傳與公，公毋泄。”扁鵲曰：“敬諾。”乃出其懷中藥予扁鵲：“飲是以上池之水三十日，當知物矣。”……扁鵲以其言，飲藥三十日，視見垣一方人。以此視病，盡見五臟癥結，特以診脈為名耳。后遂以“上池”“窺垣”以喻醫術高明。以此命名者有明代馬時可的《上池雜說》，清代陳養晦的《傷寒五法》附《傷寒論》，康熙六年刊本又名《窺垣秘術》。

和緩：喻指良醫。醫和、醫緩，為春秋時秦國兩個名醫，后人常并稱之為“和緩”。如晉摯虞《疾愈賦》曰：“講和緩之余論，尋越人之遺方。”故以和緩喻良醫。以此命名者，如清代全子久《和緩醫風》。

——國家中醫藥管理局網站

De te r mina tion o f Fe r ulic a cid in Er xin Guic an g Ton g qiao Pill b y HPLC

Zhu Huijian
(Pharmacy Department,Shangqiu First People's Hospital,Shangqiu,Henan Province,476000,China)

ObjectiveTo set up a method to determine Ferulic acid in Erwin Guicang Tongqiao pill.Methodhe content of ferulic acid vas determined bx HPLC.The chromatographic sxstem consisted of C18column，using methanol-1%Acetic acid solution（30∶70）as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 321 nm，the flow rate was 1.0ml·min-1.ResultsThe ferulic acid had a good Linear relation in the range of 0.04004～0.4004μg（r=0.9996），the average recoverx vas 98.36%and RSD=1.13%（n= 6）.ConolusionThe established method vas simple，sensitive and accurate.It could be used for qualitx control of Erwin Guicang Tongqiao pill.

Ferulic acid；HPLC；Erwin Guicang Tongqiao pill；Chuanwiong

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.02.106

：1672-2779（2014）-02-0158-02

??蘇 玲 本文校對：劉曉云

2013-10-17）