一種新型的生物素誘導的真核基因表達調控系統的建立

葉玲玲，劉紅，李世崇，王啟偉，藍三春，陳昭烈

1 軍事醫學科學院生物工程研究所，北京 100071

2 軍事醫學科學院附屬醫院，北京 100071

生物技術與方法

一種新型的生物素誘導的真核基因表達調控系統的建立

葉玲玲1，劉紅1，李世崇1，王啟偉1，藍三春2，陳昭烈1

1 軍事醫學科學院生物工程研究所，北京 100071

2 軍事醫學科學院附屬醫院，北京 100071

為建立一種適用于生物制藥工業和基因治療領域的基因表達調控系統，構建枯草芽胞桿菌生物素連接酶 (BS-BirA) 與轉錄激活結構域的融合蛋白，以其表達載體為調控載體；在弱化的CMV啟動子上游連接BS-BirA特異的操縱子序列，獲得響應載體，從而得到響應于生物素的真核基因表達調控系統BS-Biotin-On。以增強型綠色熒光蛋白 (EGFP) 為報告基因對該系統進行考察，結果表明，與現有的類似調控系統相比，該系統具有良好的誘導率；可通過調節培養體系中生物素的濃度，實現對目的基因表達水平快速、較高效的調節。上述結果表明，BS-Biotin-On系統可能為外源基因的調控表達提供新的選擇。

生物素，基因表達調控系統，誘導率，BirA

基因表達調控系統能夠在時空上控制目的基因的表達，現已廣泛應用于基礎研究和應用研究中，例如，功能基因組研究、組織工程、系統生物學、藥物研發、基因治療、生物藥物生產和功能材料的設計等[1-4]。最初開發的適用于哺乳動物細胞的基因表達調控系統采用的誘導劑分子包括抗生素、免疫抑制劑或激素及其衍生物等，這些調控系統在培養體系和轉基因動物中表現出了良好的調控效果，但是由于具有生理活性的誘導劑分子具有某些臨床副作用，使得它們在基因治療和生物藥物生產中的應用受到了限制[5-6]。……