鹽離子對次壺腹腺絲蛋白重組模塊的影響

王佳，陳格飛，孟清

東華大學生物科學與技術研究所，上海 201620

鹽離子對次壺腹腺絲蛋白重組模塊的影響

王佳，陳格飛，孟清

東華大學生物科學與技術研究所，上海 201620

為研究不同生理環境對蛛絲蛋白組裝及成絲的影響，首次以MiSp序列為對象，研究其NTR1SR2CT重組模塊在不同種類 (濃度) 鹽離子條件下的聚集和成纖維特性及其在成纖維過程中二級結構的變化。基于大腹園蛛MiSp全長序列構建NTR1SR2CT模塊，并在大腸桿菌Escherichia coli BL21中成功表達。借助8 mol/L尿素裂解包涵體進行變性純化得到NTR1SR2CT重組蛋白。NTR1SR2CT重組蛋白二級結構主要為無規則卷曲(Random coil) 或α螺旋 (Helix)，在自然成絲及凍干過程中部分random coil或helix轉變為β折疊 (β-sheet)，甲醇能促進該轉變過程。另外，鉀離子和磷酸根離子有利于NTR1SR2CT重組蛋白聚集從而促進絲纖維的形成。研究結果為成絲機理研究奠定了基礎，同時也為工業化生產高品質的蛛絲纖維提供了條件。

次壺腹腺絲蛋白，組裝，鹽離子，二級結構，絲纖維

蜘蛛絲是一種天然高分子量蛋白質纖維，具有良好的機械學性能和生物學品質，如強度高、彈性好、質地輕、耐高低溫及生物相容性好等，在生物醫學、材料、建筑和軍事等領域具有很大的潛在應用價值[1-4]。近期蛛絲蛋白已成功應用于人造皮膚和腫瘤細胞治療藥物傳送等生物醫學領域，但是由于蛛絲蛋白的組裝及成絲機制尚不明確等，限制了蛛絲蛋白的后續應用[5-7]。

主壺腹腺絲由主壺腹腺分泌，具有高強度和良好的延展性，主要用于逃逸和編織網框[8]。……