紫外分光光度法測定北蟲草片劑中腺苷的含量

姚玉蘭，李芳，鄭一敏，胥秀英，傅善權

(重慶理工大學藥學與生物工程學院，重慶 400054)

紫外分光光度法測定北蟲草片劑中腺苷的含量

姚玉蘭，李芳，鄭一敏，胥秀英，傅善權

(重慶理工大學藥學與生物工程學院，重慶 400054)

為了測定北蟲草片劑中腺苷的含量，采用紫外分光光度法進行了腺苷含量的測定。結果表明:腺苷線性范圍為0.004～0.012 g/L，r=0.999 7，回收率為100.94%(n=5)，RSD= 1.12%。該方法操作簡單、快速，線性關系良好，可用于北蟲草制劑的質量控制。

北蟲草;腺苷;紫外分光光度法

北蟲草(Cordyceps militaris L.Link.)又稱北冬蟲夏草，俗稱蛹蟲草，是冬蟲夏草的一種。冬蟲夏草具有顯著的藥用價值。受生長條件的限制，天然蟲草產量有限，野生資源被過度采掘，產量逐年減少，遠遠不能滿足人們生活的需要。目前，人工培育的北蟲草子實體可作為冬蟲夏草的替代品，在醫藥、食品、保健等領域應用越來越廣泛［1］。腺苷是北冬蟲夏草生物體的主要活性成分，參與人體代謝和生理調節，具有降低血壓、減慢心律、抑制血小板聚集等藥理活性［2］。紫外分光光度法常用于中成藥或中藥提取物的分析，尤其是在有效部位群的含量分析測定中具有獨特的優勢［3-4］。本文采用紫外分光光度法進行蟲草片劑中腺苷含量的測定，為北蟲草及其制劑質量控制提供了實驗依據。

1 儀器與試藥

TU-1901雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司);電子天平;SB-50D超聲波清洗機(寧波新芝生物科技股份有限公司)。

乙醇為95%分析純;三蒸水為實驗室自制;腺苷購自國藥集團化學試劑有限公司，批號為F 20080125;蟲草片劑為實驗室自制。

2 實驗方法

2.1 溶液配制

對照品溶液配制:精密稱取腺苷標準品25 mg置于25 mL量瓶中，加95%的乙醇定容至刻度，搖勻，制成濃度為1 mg/mL的對照品溶液，備用。

供試品溶液配制:取實驗室自制的蟲草片20片，粉碎，精密稱取樣品粉末25 mg置于25 mL量瓶中，加95%的乙醇定容至刻度，超聲5 min，制成1 mg/mL的溶液，備用。

2.2 吸收波長的選擇

分別取上述樣品和對照品溶液稀釋液一定量，在100～400 nm范圍內掃描，隨行做陰性樣品，結果見圖1～3。由圖1～3可知:陰性樣品沒用干擾，蟲草片劑的紫外吸收峰與腺苷一致，均在200 nm和260 nm有吸收。考慮到200 nm溶劑干擾較大，故以260 nm作為檢驗波長。

圖1 陰性樣品掃描圖譜

圖2 腺苷對照品掃描圖譜

圖3 蟲草片劑掃描圖譜

2.3 線性關系考察

分別精密量取不同量的本文2.1節中的對照品溶液稀釋定容成0.004，0.005，0.006，0.007，0.008，0.010，0.012 mg/mL，搖勻。按紫外分光光度法［4］在260 nm波長處進行檢測。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，測得標準曲線為Abs= 51.911 62C+0.033 14，r=0.999 7，表明在0.004～0.012 mg/mL范圍內腺苷濃度與吸收度呈良好的線性關系。

2.4 精密度實驗

取濃度為0.008 mg/mL對照品溶液，按上述測定方法連續測5次，計算RSD為0.09%。結果表明儀器精密度良好。

2.5 溶液的穩定性實驗

分別取同一份樣品，按上述腺苷含量測定項下放置不同時間，在一定間隔內分別測定吸光度，計算RSD為1.4%。結果表明，樣品在100 min內穩定性好。

2.6 重復性實驗

分別取同一批樣品6份，按本文2.1節的方法制備成樣品溶液，測定腺苷吸收度，計算RSD為1.9%。結果表明:測定方法重復性好。

2.7 回收率實驗

稱取一定量蟲草片劑細粉，按對照品與樣品量為1∶1加入對照品，按本文2.1節樣品溶液制備方法制備5份供試液，測定，計算回收率為100.94%(n=5)，RSD=1.12%。實驗結果見表1。

表1 腺苷回收率實驗結果(μg，n=5)

2.8 樣品含量測定

按本文2.1節制備供試品溶液3批，分別測定吸收度，計算含量。結果表明(見表2)片劑含量穩定。

表2 樣品含量測定結果(n=3)

3 結束語

北冬蟲夏草近年來越來越受到國內外各界的關注，可用于食品、藥品、保健品的生產。人們通常食用的方法為燉湯。本項目將北冬蟲夏草進行超微化處理，再做成片劑，攜帶、儲存、使用都較方便。腺苷是北冬蟲夏草的主要有效成分之一。本文采用紫外分光光度法測定其含量，方法簡單、快速、準確、重復性好，且成本低，可作為常規的質量檢測手段。

［1］袁延強，劉可春，韓利文，等.HPLC法測定北蟲草中的蟲草素含量［J］.中國食物與營養，2010(6):61.

［2］盧鋼，孫軍，孫立偉，等.微波萃取HPLC測定北冬蟲夏草中腺苷的新方法研究［J］.吉林醫學院學報，2010，31(3):128.

［3］呂凜，陶寧萍.紫外分光光度法檢測桔皮中總黃酮含量的方法研究［J］.現代食品科技，2009，25(2):217.

［4］吉昌群.紫外分光光度法測定白子草中總黃酮含量［J］.海峽藥學，2009，21(3):66.

［5］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［M］.北京:化學工業出版社，2010，附錄IVA.

(責任編輯 何杰玲)

Determination of Adenosine from Cordyceps Militaris(L.)Link.
with UV Spectrophotometry

YAO Yu-lan，LI Fang，ZHENG Yi-min，XU Xiu-ying，FU Shan-quan

(College of Pharmaceutical and Biological Engineering，
Chongqing University of Technology，Chongqing 400054，China)

A rapid detection method of Adenosine in Cordyceps militaris(L.)Link.with UV spectrophotometry was established.The result show that the adenosine linear range is 0.004～0.012 g/L (r=0.9997)and recovery rate is 100.94%(n=5)，RSD=1.12%.The method is simple，fast and has a good linear relationship.The method is easy to determine the content of Cordyceps militaris (L.)Link.

Cordyceps militaris(L.)Link;adenosine;UV spectrophotometry

Q525

A

1674-8425(2014)06-0078-03

10.3969/j.issn.1674-8425(z).2014.06.015

2013-08-19

姚玉蘭(1991—)，女，上海奉賢人，主要從事天然藥物研究;通訊作者鄭一敏(1963—)，男，四川廣安人，碩士，研究員，主要從事天然藥物研究與開發。

姚玉蘭，李芳，鄭一敏，等.紫外分光光度法測定北蟲草片劑中腺苷的含量［J］.重慶理工大學學報:自然科學版，2014(6):78-80.

format:YAO Yu-lan，LI Fang，ZHENG Yi-min，et al.Determination of Adenosine from Cordyceps Militaris(L.) Link.with UV Spectrophotometry［J］.Journal of Chongqing University of Technology:Natural Science，2014 (6):78-80.