高效液相色譜法在藥物分析中的研究進展

呂丹 劉冠男

摘 要：高效液相色譜法作為藥物分析的常規方法應用廣泛，本文對其在藥物含量測定及藥代動力學研究上的應用進行綜述。

關鍵詞：高效液相色譜法；藥物分析；研究；進展

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatogra

phy，HPLC） 是一項柱色譜分離技術，因分析速度快、分離效率高、檢測靈敏度高、檢測自動化、適用范圍廣、組分易回收、樣品處理較簡單等特點已廣泛應用于各種藥物及其制劑的分析測定。隨著與質譜、核磁共振波譜等的聯用技術的發展，HPLC的應用將愈加廣泛[1]。

一、高效液相色譜法作為藥物分析的常規方法在藥物分析中的應用

高效液相色譜法作為藥物分析中的最主要的分析方法，常被作為常規分析和檢驗方法[2]。近年來這個方面的研究較多，陳英紅等通過對人參糖肽注射液中多糖1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化，采用高效液相色譜法進行組成糖分析，建立了人參糖肽注射液特征圖譜。該方法操作簡便，分離度高，重復性及穩定性良好，可有效控制人參糖肽注射液的質量，同時可作為酸性雜多糖的測定方法。陳金泉等建立抗艾滋病藥物更昔洛韋、阿昔洛韋、噴昔洛韋和伐昔洛韋的HPLC快速檢測方法。采用同一色譜體系實現對四種藥物的分析，該檢測方法快速、簡便，準確。這些研究充分利用了高效液相色譜操作簡單，靈敏度高，回收率高的特點。

二、高效液相色譜在藥物分析測定中的研究進展

高效液相色譜法是一種集分離和測定為一體的分析方法，其作為藥物分析中藥物鑒別、雜質檢查及含量測定的重要方法。

（一）在鑒別中的應用。HPLC用于藥物鑒別時，一般規定按供試品含量測定項下的高效液相色譜條件進行實驗。要求供試品和對照品色譜峰的保留時間一致。在HPLC法中，保留時間與組分的結構和性質有關，是定性的參數。如頭抱拉定、頭孢噻酚鈉等頭孢類藥物以及地西泮注射液、曲安奈德注射液等多種藥物均采用HPLC法進行鑒別。

（二）在有關物質檢查中的應用。目前藥品的有關物質的檢查方法主要有薄層色譜法（TLC）、高效液相色譜法（HPLC）、氣相色譜法（GC）、紫外分光光度法（UV）及容量分析法等多種。近年來隨著儀器分析技術的發展，HPLC分離效果佳分離速度快的特點使其成為最主要的檢測有關物質的方法。

（三）在藥物（含中藥）成分含量測定上的應用。在藥物分析中，高效液相色譜由于其專一性，靈敏度高，快速簡便的特點，廣泛的應用于藥物分析中的定量分析，尤其在干擾因素較多的時候表現出更大的優越性。中藥材及其制劑組成復雜，不少有效成分的含量測定也越來越多地采用了高效液相色譜法。李翔等建立高效液相色譜法測定麻杏口服液中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量。該方法簡便準確，快速可靠，能夠用于麻杏口服液的含量測定和質量控制。

（四）在藥物的質量控制上的應用。在早期各國的藥典中，藥品質量多用化學分析方法來控制，該方法難以對藥品生產、儲存中產生的有關物質、及微量雜質進行監測。隨著HPLC方法的發展，此類問題得到較好的解決。HPLC在止痛藥、抗生素、抗病毒藥、抗高血壓藥、抗抑郁藥、消化系統藥等藥物質量控制中有著廣泛的應用。如氨基糖苷類抗生素的結構因缺少強紫外吸收基團，故常用柱前或柱后衍生化來分析測定，但是這種方法前處理過于繁瑣，衍生過程可能導致樣品的降解，不適用于對相關物質的控制，但利用蒸發光散射檢測器檢測的HPLC法控制氨基糖苷類抗生素的質量可以得到滿意的結果。

三、高效液相色譜在藥物動力學研究進展

體內樣品大多具有采樣量少，待測物濃度低，干擾物多等特點，基于這些特點HPLC特別適用于藥代動力學研究與臨床藥物監測體內樣品中大多數小分子藥物及其特定代謝產物的測定。付洪瑜等建立了大鼠血漿中卡瓦內酯麻醉椒苦素的液相色譜質譜聯用定量的分析方法，并用于大鼠體內藥物動力學研究。所建立的HPLC-MS/MS定量分析方法特異、快速、靈敏，可用于麻醉椒苦素臨床前藥物動力學研究。戴青等建立測定人體血漿中氨磺必利高效液相色譜法，測定健康志愿者口服氨磺必利片48h內血藥濃度，進行藥動學研究。本法簡便、快速、經濟、準確，可用于測定人血漿中氨磺必利的濃度及藥動學研究。

四、展望

HPLC的出現為藥物分析的發展創造了新的契機，經過近四十多年的發展，HPLC已經成為一種廣泛應用于藥物分析、環境監測、食品檢驗和法學檢驗等領域的一種比較成熟而且具有巨大潛力的分析技術。隨著HPLC-MS聯用技術的應用更加廣泛，無疑將進一步促進生命科學和藥學的研究和發展。

參考文獻：

[1] 李發美主編，分析化學[M].人民衛生出版社，2007：385.

[2] 孫毓慶主編，現代色譜法及其在藥物分析中的應用[M].科學出版社，2005.

[3] 陳英紅，羅浩銘，王穎，姜瑞芝.HPLC法建立人參糖肽注射液特征圖譜的研究[J].藥物分析雜志，2014，34（2）：360-363