氟西汀對(duì)陽虛模型大鼠生物表征及血清睪酮、甲狀腺激素的影響

何貴平 包祖曉 陳世勇 張 麗 陳寶君 虞安娜 李 燕

浙江省臺(tái)州醫(yī)院心理衛(wèi)生科 臨海 317000

氟西汀對(duì)陽虛模型大鼠生物表征及血清睪酮、甲狀腺激素的影響

何貴平 包祖曉 陳世勇 張 麗 陳寶君 虞安娜 李 燕

浙江省臺(tái)州醫(yī)院心理衛(wèi)生科 臨海 317000

目的觀察鹽酸氟西汀對(duì)陽虛模型大鼠生物表征及血清睪酮、甲狀腺激素的影響，探討抑郁癥的陽虛病機(jī)。方法40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為模型組、氟西汀組、金匱腎氣丸組和空白對(duì)照組，每組10只。采用注射氫化可的松的方法建立大鼠陽虛模型，各組予相應(yīng)藥物灌胃共21天。觀察大鼠生物表征。實(shí)驗(yàn)第22天采血，測(cè)定血清睪酮（T）、三碘甲狀腺原氨酸（T3）、甲狀腺素（T4）、促甲狀腺激素（TSH）含量。結(jié)果模型組大鼠的生物表征類似中醫(yī)陽虛證表現(xiàn)，各治療組大鼠的生物表征較模型組均有不同程度的改善；與空白組比較，模型組大鼠T、T3含量顯著降低（P＜0.05，P＜0.01），T4、TSH含量無明顯差異（P＞0.05）；與模型組比較，各治療組T、T3含量明顯升高（P＜0.05）。結(jié)論鹽酸氟西汀與中醫(yī)"助陽藥"的作用類似，對(duì)陽虛模型大鼠生物表征及血清甲狀腺激素、睪酮具有一定的改善作用，陽虛是抑郁癥的重要病機(jī)。

大鼠；陽虛模型；氟西汀；金匱腎氣丸；氫化可的松

病證結(jié)合是中醫(yī)臨床的重要診療模式，它要求在臨床診療中既重視對(duì)西醫(yī)疾病的診斷，又注重對(duì)中醫(yī)證機(jī)的認(rèn)識(shí)。我們?cè)趯?duì)抑郁癥患者進(jìn)行治療的過程中，發(fā)現(xiàn)抑郁癥與陽虛證關(guān)系密切[1]，治療抑郁癥的經(jīng)典藥物鹽酸氟西汀對(duì)抑郁癥患者性欲低下、腰酸背痛、足膝酸軟、畏寒肢冷、語聲低怯等“陽虛”癥狀具有較好療效，推測(cè)氟西汀與中醫(yī)“助陽藥”的作用類似。本文試圖從“藥證相應(yīng)”的角度，觀察鹽酸氟西汀對(duì)陽虛模型大鼠生物表征及血清甲狀腺激素、睪酮的影響，進(jìn)而探討抑郁癥的陽虛病機(jī)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1動(dòng) 物 健康雄性SD大鼠40只，體質(zhì)量180～220g，由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK（浙）2008-0033。自由進(jìn)食、飲水，喂標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料，室溫22～24℃，相對(duì)濕度40%～60%，自然光照。

1.2藥物及試劑 鹽酸氟西汀膠囊（規(guī)格：20mg，禮來蘇州制藥有限公司，批號(hào)1037A）；注射用氫化可的松琥珀酸鈉（天津生物化學(xué)制藥有限公司，批號(hào)20111011）；金匱腎氣丸（河南宛西制藥有限公司，批號(hào)120902）。睪酮（T）、三碘甲狀腺原氨酸（T3）、甲狀腺素（T4）、促甲狀腺激素（TSH）酶聯(lián)免疫試劑盒（上海科華生物技術(shù)有限公司，批號(hào)201303）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1分組與給藥 SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，然后按隨機(jī)數(shù)字表將大鼠分為模型組、氟西汀組、金匱腎氣丸組和空白對(duì)照組，每組10只。模型組及給藥組每天早上予氫化可的松20mg/kg股四頭肌肌注[4]（雙側(cè)交替，臨用前用生理鹽水配制），空白對(duì)照組予等量生理鹽水肌注。在此基礎(chǔ)上氟西汀組予鹽酸氟西汀3.33mg/（kg·d），金匱腎氣丸組予金匱腎氣丸1.25g/（kg·d），空白對(duì)照組和模型組予等體積蒸餾水，連續(xù)灌胃21天。

2.2大鼠生物表征觀察 觀察各組動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程中精神狀態(tài)、生長(zhǎng)發(fā)育情況、活動(dòng)度、對(duì)外來刺激反應(yīng)、大小便、毛發(fā)等情況。

2.3大鼠血清T、T3、T4、TSH含量測(cè)定 實(shí)驗(yàn)第22天，進(jìn)行眶動(dòng)靜脈采血，4℃，3000r/min離心10min，取上清備用，T、T3、T4、TSH含量測(cè)定嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)分析均采用SAS8.2軟件包完成。血清T、T3、T4、TSH含量比較，采用單因素方差分析及t檢驗(yàn)。采用雙側(cè)檢驗(yàn)，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1各組大鼠生物表征 實(shí)驗(yàn)前各組大鼠發(fā)育正常，行為活躍，對(duì)外來刺激反應(yīng)靈敏，毛發(fā)光澤整齊，大小便正常。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組無死亡大鼠。空白對(duì)照組大鼠與實(shí)驗(yàn)前比較一般狀況相似，無明顯差異；而模型組大鼠少動(dòng)，精神不振，喜歡扎堆，對(duì)外來刺激反應(yīng)差，反抗力減弱，體質(zhì)量增長(zhǎng)緩慢，毛發(fā)枯槁，大便溏薄；各治療組體質(zhì)量增長(zhǎng)、精神狀態(tài)等一般情況較模型組均有不同程度改善，與空白對(duì)照組大鼠相近。

3.2各組大鼠血清T、T3、T4、TSH含量 與空白對(duì)照組比較，模型組T、T3含量明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或0.01）；與模型組比較，氟西汀組和金匱腎氣丸組T、T3含量明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。各組T4、TSH含量無明顯差異（P＞0.05）。見表1。

表1 各組大鼠血T、T3、T4、TSH含量比較（）

表1 各組大鼠血T、T3、T4、TSH含量比較（）

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05

組別空白對(duì)照組模型組氟西汀組金匱腎氣丸組n/只10 10 10 10 T3/（pmol/L）152.59±15.76 135.74±13.26* 150.57±13.61△148.16±9.33△T4/（nmol/L）11.92±1.18 12.45±1.67 11.83±1.48 11.58±1.73 TSH/（mIU/L）27.90±1.84 29.54±2.50 28.47±2.48 28.83±2.60 T/（nmol/L）224.94±15.19 193.85±21.88** 219.41±24.02△218.15±23.21△

4 討論

中醫(yī)研究中，糖皮質(zhì)激素模型是制作陽虛證尤其是腎陽虛的經(jīng)典動(dòng)物模型，此模型由鄺安堃教授建立，在給大鼠注射糖皮質(zhì)激素后，動(dòng)物會(huì)出現(xiàn)一系列的“耗竭”現(xiàn)象，即反應(yīng)遲鈍、自發(fā)活動(dòng)時(shí)間降低（精神不振），毛發(fā)疏松，失去光澤（脫毛），蜷曲、拱背、喜擠臥在一起、肢尾冷、肛溫降低、耐寒時(shí)間縮短（畏寒肢冷）、游泳存活時(shí)間縮短（腰膝酸軟）、雄性動(dòng)物陰莖勃起潛伏時(shí)間延長(zhǎng)（性功能減退）、呼吸深遲（氣短而喘）、尿液白濁等病理狀態(tài)[2-3]。這些病態(tài)的外觀表現(xiàn)與中醫(yī)陽虛證患者的臨床表現(xiàn)類似，故此模型被廣泛應(yīng)用于陽虛證的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。

本研究根據(jù)“藥證相應(yīng)”原理，以經(jīng)典的助陽中藥金匱腎氣丸為對(duì)照，觀察經(jīng)典的抗抑郁西藥鹽酸氟西汀對(duì)氫化可的松誘導(dǎo)的經(jīng)典中醫(yī)陽虛動(dòng)物模型的干預(yù)作用，借此探討抑郁癥與中醫(yī)陽虛證的關(guān)系。結(jié)果表明，氟西汀組和金匱腎氣丸組大鼠的體質(zhì)量增長(zhǎng)、精神狀況等生物表征較模型組均有不同程度的改善，提示氟西汀具有類似金匱腎氣丸的“助陽”作用，陽虛是抑郁癥的重要病機(jī)。

在微觀辨證指標(biāo)方面，相關(guān)研究表明陽虛證存在性腺功能和甲狀腺功能低下[4]，本研究結(jié)果顯示，模型組T、T3含量較空白對(duì)照組明顯降低，與文獻(xiàn)報(bào)道一致；而氟西汀組和金匱腎氣丸組T、T3含量較模型組明顯升高。提示氟西汀可有效改善中醫(yī)陽虛證的微觀辨證指標(biāo)，進(jìn)一步佐證了其“助陽”功效。

值得注意的是，甲狀腺激素水平的動(dòng)態(tài)下降與抑郁狀態(tài)發(fā)生有關(guān)[5]，給血雄激素水平低下的抑郁癥者補(bǔ)充睪酮對(duì)抑郁癥有一定的治療效果[6]，而糖皮質(zhì)激素模型是一種新型有效的抑郁癥動(dòng)物模型[7]。提示抑郁癥與中醫(yī)陽虛病機(jī)之間存在一定的聯(lián)系。

因此，本研究不僅從“藥證相應(yīng)”角度論證了抑郁癥與中醫(yī)陽虛病機(jī)之間的關(guān)系，而且說明氟西汀與中醫(yī)“助陽藥”的作用類似。

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［4］劉欣，張冰，崔一然，等.基于垂體-靶腺軸相關(guān)指標(biāo)動(dòng)態(tài)觀察氫考誘導(dǎo)大鼠陽虛狀態(tài)［J］.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，25（1）：53-55.

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修回日期：2014-05-20

Effect of Fluoxetine Hydrochloride Capsules on Symptoms and Serum testosterone and Thyroid Hormones in Rat Models with Yan Deficiency

HE Guiping,BAO Zuxiao,CHEN Shiyong,ZHANG Li,CHEN Baojun,YU An'na, LI Yan. Department of Mental Health,Taizhou Hospital of Zhejiang Province,Linhai(317000),China

ObjectiveTo investigate the effect of fluoxetine hydrochloride capsules（FHC）on symptoms and serum testosterone and thyroid hormones in model rats with Yan deficiency,in an attempt to explore the mechanism of depression with Chinese differentiation syndrome theory.MethodsForty male SD rats were randomly divided in to model group,FHC group,Jinkuishenqiwan group,and blank control group,10 rats in each group.The rat model of Yan deficiency was made by injection of hydrocortisone.The drug group was given the corresponding drugs for 21d,respectively.At the end of the study,the biological characteristics were observed.Blood was drawn on D22 to detect the serum levels of testosterone（T）,triiodothyronine（T3）,tetraiodothyronine（T4）,and thyroid stimulating hormone（TSH）.ResultsRats in model group had symptoms of Yan deficiency.The symptoms of Yan deficiency were improved in FHC group and Jinkuishenqiwan group.Compared with blank control group,the serum levels of T and T3 was decreased in model groups（P＜0.05,P＜0.01）,while the levels of T4 and TSH was not different（P＞0.05）.Compared with model group,the levels of T and T3 were increased in two drug groups（P＜0.05）.ConclusionFHC has similar effect as Chinese medicine of"increasing Yan".It can improve the symptoms of Yan deficiency and increase the levels of T and T3.Yan deficiency may play important role in development of depression.

rats；Yan deficiency model；fluoxetine hydrochloride capsules；Jinkuishenqiwan；hydrocortisone

2014-04-08