MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表達及其與肺癌轉移和預后關系的研究

王紅民 張小紅

MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表達及其與肺癌轉移和預后關系的研究

王紅民 張小紅

目的 探討基質金屬蛋白酶 -2(MMP-2)和基質金屬蛋白酶 -9(MMP-9)在肺癌中的表達水平及其與肺癌轉移、肺癌預后的相關聯系。方法 對 80 例非小細胞肺癌患者和 20 例肺良性病變患者進行 LSAB 法檢測其 MMP-2 和 MMP-9 的表達水平 , 并檢測其在腺癌、鱗癌和腺鱗混合癌中的表達水平以及在不同分化程度腫瘤中的表達水平 , 將檢測的數據進行對比 , 分析 MMP-2 和 MMP-9 的表達水平與肺癌轉移和預后的相關聯系。結果 MMP-2、MMP-9 在鱗癌中的表達水平最高 , 而表達水平較低的腺癌和腺鱗混合癌之間差異不大 , MMP-2 與 MMP-9 在不同分化程度的腫瘤中表達水平差異不大 , MMP-2、MMP-9 在肺癌預后方面的表達水平差異具有統計學意義 (P＜0.05)。結論 MMP-2 與 MMP-3 在肺癌中的表達水平與肺癌的轉移有密切的關系 , 同時可能成為檢測肺癌預后的重要指標。

基質金屬蛋白酶 -2 ；基質金屬蛋白酶 -9 ；肺癌的轉移 ；預后

肺癌是常見的惡性腫瘤之一［1］。是具有發病率高和死亡率增長快的癌癥疾病 , 嚴重的威脅著人們的健康和生命［2］。目前對于肺癌的治療療效不明顯 , 主要原因是肺癌具有癌瘤侵襲和轉移等特點 , 同時發病過程中往往有伴隨癥的發生 ,作者對于發病以及癌瘤轉移的根本了解不深刻 , 所以治療難以起到療效。本次研究就本院的 80例非小細胞肺癌患者和 20 例肺良性病變患者開展研究 , 通過對其中兩種基質金屬蛋白酶的表達水平檢測及對比來證實研究的正確性 , 現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資 料 本院 在 2013年 1月 ~2014年 1月 收治的肺癌患者中 , 選擇具有可比性的 80例非小細胞肺癌患者以及 20例肺良性病變患者 , 其中男 52例 , 女 48例 , 平均年齡(54±9)歲 , 所有患者均確診為肺癌患者 , 其中腺癌患者有 41例 , 鱗癌患者有 44例 , 腺鱗混合癌患者有 15例 ；分化程度方面低分化癌患者有 46例 , 中分化癌患者有 40例 , 高分化癌患者有 14例。

1. 2 主要試劑 基質金屬蛋白酶 -2兔抗人多克隆抗體 , 基質金屬蛋白酶 -9兔抗人多克隆抗體 , 生物素化羊抗兔抗體 ,過氧化物酶-鏈親和素復合物。

1. 3 方法 對肺癌患者采用 LSAB法進行檢測 , 先經過 3%的過氧化氫阻斷內源性過氧化酶 20 min, 接著在微波爐中行抗原修復 , 時間約為 15 min, 隨后依次加入 1:20的正常羊血清 , MMP-2加入 1:100的一抗、1:200的二抗和 1:200的三抗 , MMP-9加 入 1:50的 一 抗、1:200的 二 抗 和 1：200的 三 抗 ,隨后在恒溫箱中孵育 30 min, 溫度調至 37℃ , 最后進行 PBS沖洗在 DAB-H2O2顯色和蘇木素復染 , 制成切片 , 在 400鏡下觀察每張切片的 5~10個視野 , 每個視野計數 100~200個腫瘤細胞 , 共計 1000個細胞 , 在計算出每張切片的陽性細胞百分數作為該切片上的表達水平。

1. 4 統計學方法 采用 SPSS15.0統計學軟件對數據進行統計學分析。計量資料以均數 ± 標準差 ( x-±s)表示 , 采用 t檢驗 ；計數資料采用χ2檢驗 , P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表達水平及其與肺癌轉移的關系 MMP-2、MMP-9在鱗癌中的表達水平最高 , 而表達水平較低的腺癌和腺鱗混合癌之間差異不大 , 且 MMP-2與 MMP-9在不同分化程度的腫瘤中表達水平差異無統計學意義 (P＞0.05), 見表1。

2. 2 MMP-2、MMP-9在 肺 癌 中 的 表 達 水 平 與 預 后 的 關 系MMP-2、MMP-9在肺癌預后方面的表達水平差異具有統計學意義 (P＜0.05), 與預后有著密切的相關性。見表2。

表1 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表達水平及其與肺癌轉移的關系

表1 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表達水平及其與肺癌轉移的關系

注 ：兩組比較 ,aP<0.05,bP>0.05

MMP-2(%)PMMP-9(%)P非小細胞肺癌 8061.3±16.9a<0.0566.1±19.2a<0.05肺良性病變 2016.8±10.2 17.2±9.6腺癌 4156.2±13.6a<0.0563.5±15.5a<0.05鱗癌 4465.4±18.1 73.7±19.3腺鱗混合癌 1555.8±12.9 62.1±16.6低分化癌 4661.2±14.3b>0.0570.4±15.7b>0.05中分化癌 4056.8±15.4 68.3±16.1高分化癌 1455.3±17.1 67.8±17.4項目 例數

表2 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表達水平與預后的關系

3 討論

惡性腫瘤的侵襲轉移是一個及其復雜的過程［3］。肺癌細胞突破細胞處基質和毛細血管基底膜 , 隨后侵入到相鄰的淋巴系統或者進入血循環 , 隨后通過毛細血管在進入其他處的組織或者器官里并著床生成腫瘤血管 , 這就完成了肺癌轉移。近些年的研究表明 , 肺癌的轉移是一個極其復雜的多基因調控的多階段、多步驟過程并且基質金屬蛋白酶是肺癌轉移中最重要的蛋白酶［4］。本次研究通過 MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表達水平檢測及其與肺癌轉移和預后的關系分析,發現 MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表達水平明顯比在肺良性病變中的表達水平高 , 同時 MMP-2、MMP-9 在鱗癌中的表達水平最高 , 而表達水平較低的腺癌和腺鱗混合癌之間差異不大 , 且 MMP-2 與 MMP-9 在不同分化程度的腫瘤中表達水平差異無統計學意義 (P＞0.05), 同時 MMP-2、MMP-9 在肺癌預后方面的表達水平差異具有統計學意義 (P＜0.05)。與薛洋等［5］的 MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表達及其與肺癌轉移和預后關系的研究結果基本一致。結合以往的研究 , MMP-2與 MMP-3 在肺癌中的表達水平檢測肺癌轉移和預后都有重要意義。

［1］蔡銘 ,翁鳶 ,王志強 ,等 .基質金屬蛋白酶在早期肺癌中的表達 .中華實驗外科雜志 , 2010,27(5):612-613.

［2］李莉 ,劉少揚 ,江大瓊 .基質金屬蛋白酶及其抑制劑在腫瘤發展和治療中的作用 .腫瘤防治研究 , 2004,31(2):321-323.

［3］李濤 ,曾昭沖 ,王魯 ,等 .放射后肺癌細胞 MMP-2 表達、活性的變化及其對侵襲性的影響 .中華實驗外科雜志 , 2007, 24(12): 1525-1527.

［4］梅 同 華 ,羅 彬 ,馬 英 .肺 癌 患 者 肺 組 織 MMP-2、MMP-7 和TIMP-2 表 達 及 意 義 .第 三 軍 醫 大 學 學 報 , 2004,26(16):1491-1493.

［5］薛 洋 ,周 清 華 ,張 尚 福 ,等 .MMP-2、MMP-9 在 肺 癌 中 的 表達及其與肺癌轉移和預后關系的研究 .華西醫學 , 2008, 23(2): 225-226.

2014-04-16］

450052 鄭州大學第一附屬醫院呼吸內科 /河南省高等學校臨床醫學重點學科開放實驗室 (王紅民 )；鄭州大學附屬鄭州中心醫院 /鄭州市中心醫院呼吸內科 (張小紅 )