王瑾 王光磊 王宮
·實驗研究·
牛樟芝緩解體力疲勞作用的實驗研究
王瑾 王光磊 王宮
目的 研究牛樟芝緩解體力疲勞的作用。方法 小鼠隨機分成空白組和牛樟芝低、中、高劑量組 , 進行負重游泳實驗、血清尿素氮測定、肝糖元測定和全血乳酸測定。結果 牛樟芝中、高劑量組能明顯延長小鼠負重游泳時間 , 并降低小鼠運動后血清尿素氮含量 ;牛樟芝低、中、高劑量組均能提高給藥后小鼠肝糖原儲備 , 減少小鼠運動后乳酸的產生。結論 牛樟芝具有緩解體力疲勞作用。
牛樟芝 ;體力疲勞 ;血清尿素氮 ;肝糖原 ;全血乳酸
牛樟芝 (antrodia camphorata) 又名牛樟菇、樟窟內菇、紅樟芝 , 是一種原產于我國臺灣省的珍稀藥用菌 ,主要分布在臺灣省的桃園、苗栗、南投、高雄及屏東等地海拔 1000 m以上的深山密林中 , 通常腐生牛樟樹 (cinnamomum kanehirae hayata)上百年的樹干空洞內。現代研究表明[1], 牛樟芝含有多糖 (β-D- 葡聚糖 )、三帖類化合物、超氧化物歧化酶 (SOD)、腺苷、小分子蛋白質 (含免疫蛋白 )、維生素、固醇類、木質素、不飽和長鏈脂肪酸、麥角甾醇、微量元素鍺等、凝集素、氨基酸、薄孔菌酸 (antrodiaacid)等多種生理活性物質;具有益胃整腸、鎮痛抗菌、強化免疫、抗過敏、抗癌等多種功效 , 但對其緩解體力疲勞作用的報告還較少。
1. 1 樣品 牛樟芝微粉 (臺灣亞新生物科技股份有限公司 ,性狀為土黃色粉末 , 不溶于水 ;人體推薦量為 12 g/60 kg Bw/d)。
1. 2 實 驗 動 物 雄 性 清 潔 級 KM種 小 鼠 , 體 重 18~22 g[ 由 上 海 斯 萊 克 實 驗 動 物 有 限 責 任 公 司 提 供 , 許可證號 :SCXK(滬 ) 2007-0005, 合格證編號 :2007000526592]。
1. 3 儀器與試劑 日立 KY2000半自動生化分析儀 ;血清尿素氮、肝糖原、全血乳酸試劑盒 (南京建成生物工程研究所 ,批號 :20111125);CMC-Na(國藥集團化學試劑有限公司 , 批號 :F20110523);游泳箱 (尺寸 60 cm×50 cm×40 cm)
2. 1 分組與給藥 小鼠隨機分成四組 , 每組 10只。牛樟芝微粉按照人體推薦量的 5、10、30倍 , 即 1、2、6 g/kg的劑量設低、中、高劑量組 , 用 0.4%CMC-Na溶液配置成混懸液 ,灌胃給藥 ;空白組按 0.2 ml/10 g劑量灌胃給予 0.4%CMC-Na溶液 ;1次 /d, 動物每周稱重 2次 , 按體重調整給藥劑量。
2. 2 負重游泳實驗 連續給藥 30 d, 于實驗第 30天 , 灌胃給予受試物 30 min后 , 各組小鼠負重 5%鉛皮 , 置于尺寸 60 cm×50 cm×40 cm, 水深 30 cm, 水溫 25℃的游泳箱中游泳 ,記錄小鼠自游泳開始至死亡的時間。
2. 3 血清尿素氮測定 連續給藥 30 d, 于實驗第 30天 , 灌胃給予受試物 30 min后 , 將小鼠置于尺寸 60 cm×50 cm×40 cm, 水深 30 cm, 水溫 30℃的游泳箱中不負重游泳 90 min,運動后休息 60 min, 眼眶靜脈叢采血 , 按試劑盒方法測定血清中尿素氮含量。
2. 4 肝糖元測定 連續給藥 45 d, 于實驗第 45天 , 灌胃給予受試物 30 min后 , 取肝臟 , 按試劑盒方法測定肝糖原含量。
2. 5 全血乳酸測定 連續給藥 40 d, 于實驗第 40天 , 灌胃給予受試物 30 min后 , 眼眶采血 , 后負重 4%在水溫 30℃水箱中游泳 10 min后第 2次采血 , 休息 20 min后第 3次采血 ,每次采血量為 50 μl, 按試劑盒方法測定全血乳酸含量。
2. 6 統計學方法 實驗數據用 SPSS19.0軟件進行方差分析 ,方差齊時 , 采用多個實驗組和一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計分析 ;方差不齊時 , 改用秩和檢驗進行統計。P<0.05表示差異有統計學意義。
3. 1 牛樟芝對小鼠負重游泳時間的影響 牛樟芝中、高劑量組的負重游泳時間明顯高于空白對照組 , 差異有統計學意義 (P<0.05);表明牛樟芝明顯延長小鼠負重游泳時間。
表1 牛樟芝對小鼠負重游泳時間的影響
表1 牛樟芝對小鼠負重游泳時間的影響
注 :與空白對照組比較 ,aP<0.05
組別 劑量 ( g / k g ) 動物數 (只 ) 游泳時間 ( s )空白組低劑量組中劑量組高劑量組4 2 4 . 3 0 ± 2 2 7 . 2 6 6 2 1 . 6 0 ± 2 7 9 . 3 6 6 5 2 . 3 0 ± 2 1 6 . 5 9a9 6 3 . 5 5 ± 6 0 1 . 0 3a0 1 2 6 1 0 1 0 1 0 1 0
3. 2 牛樟芝對小鼠運動時血清尿素氮的影響 牛樟芝中、高劑量組游泳后血清尿素氮含量明顯低于空白對照組 , 差異有統計學意義 (P<0.05);表明牛樟芝能明顯降低小鼠運動后血清尿素氮含量。
3. 3 牛樟芝對小鼠運動時肝糖元含量的影響 牛樟芝低、中、高劑量組給予受試物后肝糖原含量明顯高于空白對照組 ,差異有統計學意義 (P<0.05或 P<0.01);表明牛樟芝能明顯提高給藥后小鼠肝糖原儲備。
3. 4 牛樟芝對小鼠運動后全血乳酸含量的影響 運動后 0 min牛樟芝低、高劑量組血乳酸含量明顯低于空白對照組 , 差異有統計學意義 (P<0.05);小鼠休息 20 min后 , 牛樟芝中劑量組血乳酸含量明顯低于空白對照組 , 差異有統計學意義(P<0.01);運動后牛樟芝低、中、高劑量組血乳酸產生量顯著低于空白對照組 , 差異有統計學意義 (P<0.01);通過計算血乳酸曲線下面積 , 牛樟芝低、中、高劑量組血乳酸曲線下面積明顯小于空白對照組 , 差異有統計學意義 (P<0.05);表明牛樟芝能明顯減少小鼠運動后乳酸的產生。
本實驗研究表明 , 牛樟芝微粉能明顯延長小鼠負重游泳時間 , 降低小鼠運動后血清尿素氮含量 , 提高給藥后小鼠肝糖原儲備 , 減少小鼠運動后乳酸的產生[2]。因此 , 牛樟芝微粉具有緩解體力疲勞作用。
[1]張奉蘇 ,陳菲 ,傅興圣 ,等 .高效毛細管電泳法同時測定牛樟芝中 5 種核苷類成分的含量 . 中國藥學雜志 , 2013,48(12):1018-1021.
[2]孫海鳳 .從牛樟芝菌絲體分離的中性多糖對瘡皰丙酸桿菌 - 脂多糖誘導的小鼠肝損傷的肝保護作用 .國外醫藥 (植物藥分冊 ), 2007,22(3):121.
2014-04-14]
350003 福建福州 , 福建省中醫藥研究院
王宮