腸桿菌科細菌 ESBLs 和 AmpC 酶檢測及耐藥性分析

牛文娟

腸桿菌科細菌 ESBLs 和 AmpC 酶檢測及耐藥性分析

牛文娟

目的 分析腸桿菌科細菌 ESBLs 和 AmpC 酶檢測檢測結果 , 并探討其耐藥性。方法 收集本院近年來收治患者標本培養的 150 株腸桿菌作為對象進行研究 , AmpC 酶與 ESBLs 表型分別采用雙紙片確診試驗及雙紙片氯唑西林增效試驗檢測 , 同時對菌株對 10 種抗菌藥物耐藥性進行觀察。結果 150株腸桿菌中檢出 ESBLs 菌 79 株 , AmpC 酶菌 65 株 ；頭孢曲松、氨曲南、哌拉西林、頭孢噻肟耐藥性 ：單產 AmpC 酶菌 ＜ 非產酶菌 , 比較差異有統計學意義 (P＜0.05)；4 重耐藥率、8 重耐藥率 ：高產 AmpC酶菌 ＜ 非產酶菌 , 比較差異有統計學意義 (P＜0.05)。結論 ESBLs 和 AmpC 酶是導致腸桿菌細菌耐藥的重要因素 , 可根據具體藥敏結果給予患者針對性的治療 , 實現抗菌治療的有效性。

腸桿菌 ；ESBLs ；AmpC 酶 ；耐藥性

隨著抗生素藥物在臨床的使用 , 臨床抗感染等治療水平明顯提高 , 然而藥物產生的耐藥性也呈現出上升趨勢 , 為抗感染治療增加了難度 , 臨床關于細菌耐藥性研究不斷深入。腸桿菌是臨床常見耐藥菌 , 其中 ESBLs 和 AmpC 酶的腸桿菌科細菌明顯增加 , 已經成為重要的致病菌［1］。作者對腸桿菌科細菌 ESBLs 和 AmpC 酶檢測結果進行觀察 , 同時探討其耐藥性 , 具體如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 本院自 2011 年 12 月 ～2013 年 12 月收治的患者標本培養的 150 株腸桿菌 , 所有細菌均由 VITEK60 微生物鑒定儀及配套 GNB 鑒定卡確認 , 具體見表1。

1. 2 檢測方法 ESBLs 檢測 ：檢測方法為雙紙片確診試驗(紙片擴散法 )篩選表型 , 經確證試驗后進行檢測 , 菌株可能產 ESBLs ：孢噻肟抑菌環直徑≥ 27 mm, 頭孢他啶抑菌環直徑≥ 22 mm, 確證試驗后 , 比較加入克拉維酸藥物與為加入克拉維酸抑菌環 , 若數值增加 ＞5 mm 則證實產 ESBLs。

AmpC 酶：表型篩選方法為雙紙片氯唑西林增效試驗 (紙片擴散法 ), 確證方法為改良后的 Hodge 試驗。產 AmpC 酶 ：頭孢西丁抑菌圈直徑 ＜18 mm, 經確證試驗發現 , 頭孢西丁抑菌圈數值 ＞2 mm 則說明產 AmpC 酶。對 2 種檢測方法檢測結果進行統計 , 之后進行藥檢試驗 , 對產酶菌與產酶菌的檢測結果進行比較分析。

采用紙片擴散法進行藥敏試驗 , 測定抗生素耐藥性 , 銅綠假單胞菌 ATCC27853 及大腸埃希菌 ATCC25922 為質控菌。

1. 3 統計學方法 采用 SPSS18.0 統計學軟件處理 , 計量資料均數 ± 標準差 ( x-±s)表示 , 采用 t檢驗 , 組間對比采用χ2檢驗 , P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 150株腸桿菌內檢出 ESBLs菌 79株 (52.7%), AmpC酶菌 65株 (43.3%)。 其 中 單 產 ESBLs 菌 65株 (43.3%)、AmpC酶菌 52株 (34.7%)、不產 AmpC 酶 10株 (6.7%)、不產 ESBLs 15株 (10%)、產 AmpC 酶和 ESBLs 菌 8株 (5.3%)。

2. 2 在頭孢曲松、氨曲南、哌拉西林、頭孢噻肟耐藥性方面 ,單產 AmpC酶菌與非產酶菌比較差異有統計學意義 (P＜0.05)；高產 AmpC酶菌與非產酶菌在 4重耐藥率、8重耐藥方面差異有統計學意義 (P＜0.05), 具體見表2。

表1 分離細菌菌種分析 (n, %)

表2 150株受檢菌對 10種抗菌藥物耐藥性分析 (%)

3 討論

ESBLs能夠水解頭孢霉素類、青霉素類、單環內酰胺類抗生素 , 可在不同菌株見轉移傳播［2］。AmpC 酶是不動桿菌、腸桿菌、銅綠假單胞菌等革蘭陰性桿菌產生的 β- 內酰胺酶 ,是導致抗生素耐藥性產生的重要原因［2］。研究顯示 AmpC 酶可對革蘭陰性菌 (動桿菌、銅綠假單胞菌、腸桿菌 )等耐藥性較強 , 與 ESBLs 比較 , 底物酶更高 , 同時對酶抑制劑等具有較差的敏感性。有研究者在對惡性腫瘤、重癥及長期住院患者進行研究時發現 , 患者體內存在可產酶的酶株 , 而在使用免疫抑制劑時間較長或者免疫缺陷患者 , 檢出率較高。

CTX 腸桿菌科是國內臨床常見的病原菌 , 對環丙沙星、丁胺卡那等藥物表現為中性耐藥性 , 因此在臨床治療中 , 需要謹慎［3］；腸桿菌對亞胺硫霉素及頭孢吡肟敏感性較高 , 因此可在臨床推廣使用。本次研究顯示 , 150 株腸桿菌內檢出ESBLs 菌 79 株 , AmpC 酶菌 65 株 , 其中大腸埃希菌、克雷伯菌屬細菌檢出率最高 , 與羅蘭等研究結果具有相似性。藥敏結果顯示所有受檢菌對 1～3 代頭孢菌素耐藥性均較高 , 其中產 AmpC 酶和 ESBLs 菌耐藥性相較非產酶均明顯較大 , 由此可見 , 在受檢菌耐藥性原因中 , 產 AmpC 酶和 ESBLs 菌有著重要作用。根據本次研究顯示 , 在對 AmpC 酶治療中可采用亞胺培南等碳青霉烯類抗菌藥物進行治療 , 或者采用頭孢吡肟等四代頭孢對單產 AmpC 酶菌感染進行治療 , 而也可根據患者的藥敏情況具體選擇哌拉西林、頭孢哌酮等抗菌藥物。

總之 , 在臨床抗感染治療時 , 要加強對 AmpC 酶、ESBLs等耐藥酶的檢測 , 從而為臨床治療提供有效的參考依據。

［1］周志慧 .兩種檢測陰溝腸桿菌 AmpC 酶方法的比較 .中華檢驗醫學雜志 , 2012, 25(05):88.

［2］楊鳳霞 , 徐志強 , 王克強 , 等 . 產 AmpC 酶革蘭陰性桿菌的分布及耐藥性分析 . 中華醫院感染學雜志 , 2009, 19(13):53-51.

［3］徐修禮 , 耐頭孢噻肟腸桿菌科細菌 ESBLs 和 AmpC 酶的攜帶率及耐藥性 .中華微生物學和免疫學雜志 , 2004, 24(4):267.

2014-04-15］

450000 河南省鄭州市金水區總醫院檢驗科