高壓蒸汽滅菌法對(duì)三七細(xì)粉中3種成分含量的影響

王 影，張德柱

（1．陜西省商洛市食品藥品檢驗(yàn)所，陜西 渭南 726000； 2．陜西盤(pán)龍藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，陜西 西安 711400）

三七又名田七，具有良好的止血和造血功效，能加強(qiáng)和改善 冠脈微循環(huán)。三七入藥歷史悠久，作用奇特，被歷代醫(yī)家視為藥中之寶，故有“金不換”之說(shuō)。三七在中成藥制劑品種中大量使用，所含的皂苷類(lèi)成分三七皂苷R1、人參皂苷 Rg1、人參皂苷 Rb1是主要有效成分，也是《中國(guó)藥典》中評(píng)價(jià)三七藥材質(zhì)量?jī)?yōu)劣的指標(biāo)成分，其含量的高低直接影響藥品的效果。皂苷類(lèi)成分在酸、堿、高溫等條件下不穩(wěn)定，而含三七的中藥制劑中的三七藥材一般以細(xì)粉入藥。現(xiàn)規(guī)定生藥細(xì)粉應(yīng)經(jīng)微生物限度測(cè)定合格后方能入藥，我國(guó)中藥制劑一般都是采用高壓蒸汽對(duì)生藥材進(jìn)行滅菌。現(xiàn)有的報(bào)道對(duì)該滅菌方法的看法不一[1-2]。為了明確該處理工藝對(duì)三七藥材細(xì)粉有效成分可能造成的影響，對(duì)三七經(jīng)高壓蒸汽滅菌后有效成分含量的影響進(jìn)行研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

FZ102型微型植物粉碎機(jī)(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)；YXQ LS-50SI型高壓蒸汽滅菌柜(上海博迅實(shí)業(yè)有限公司)；101-1型干燥箱(上海市實(shí)驗(yàn)儀器總廠)；FA2004型電子天平(上海精科科學(xué)儀器有限公司)；KQ-250B型超聲儀(昆山市超聲儀器有限公司)；LC-l0ATVP型高效液相色譜議(日本島津公司)；Hypersil-C18柱(大連依利特分析儀器有限公司)；CDMC-21型色譜工作站（伍豪色譜工作站）。三七藥材購(gòu)于陜西商洛盤(pán)龍植物藥業(yè)有限公司（產(chǎn)地為云南）；三七皂苷 R1對(duì)照品(批號(hào)為110745-200312)、人參皂苷 Rg1對(duì)照品(批號(hào)為110703-200726)、人參皂苷 Rb1對(duì)照品（批號(hào)為 110704-200921），均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，供含量測(cè)定用；甲醇、乙腈為色譜純，水為雙重蒸餾水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2．1 藥材處理

取同一批次的三七適量，粉碎成細(xì)粉，過(guò)120目篩，將細(xì)粉混合均勻。取滅菌前樣品，作為樣品1；其余的三七粉作為樣品2，置高壓蒸汽滅菌柜中，121℃滅菌30 min，置干燥箱中，60℃干燥 1．5 h。

2．2 有效成分含量測(cè)定方法

參照 2010年版《中國(guó)藥典（一部）》[3]，將三七皂苷 R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1的含量作為本次研究的考察指標(biāo)，并參考文獻(xiàn)[4]中三七皂苷 R1、人參皂苷 Rg1、人參皂苷 Rb1的含量測(cè)定方法，分別對(duì)上述2份樣品進(jìn)行含量測(cè)定。

2．3 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動(dòng)相：乙腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相 B，按0～20 min流動(dòng)相 A(%)20→40、流動(dòng)相 B(%)80→60，20 ～26 min 流動(dòng)相 A(%)40→20、流動(dòng)相 B(%)60→80；進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)：203 nm。理論板數(shù)按三七皂苷R1峰計(jì)應(yīng)不低于3 000，色譜圖見(jiàn)圖1。

2．4 溶液制備

取三七皂苷R1對(duì)照品、人參皂苷Rg1對(duì)照品和人參皂苷Rb1對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含三七皂苷R10．178 mg、人參皂苷 Rg10．427 9 mg、人參皂苷 Rb10．331 5 mg的混合溶液，即得對(duì)照品溶液。精密稱(chēng)定樣品 1(0．207 8 g)、樣品 2(0．202 2 g)，分別置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，稱(chēng)定質(zhì)量，超聲處理30 min，取出，放冷，再稱(chēng)定質(zhì)量，用50%甲醇補(bǔ)足減失質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2．5 樣品含量測(cè)定

分別精密量取對(duì)照品溶液和2種供試品溶液各10 μL，注入高效液相色譜儀，測(cè)定含量。結(jié)果見(jiàn)表1。

圖1 高效液相色譜圖

表1 樣品含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

由表1可見(jiàn)，在高壓蒸汽滅菌后三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷 Rb1含量分別下降了 37．65% ，36．49% ，31．25% ，以三者的總含量計(jì)，下降34．82%。研究結(jié)果表明，三七經(jīng)高壓蒸汽滅菌后有效成分下降明顯，不宜采用高壓蒸汽滅菌法對(duì)三七進(jìn)行滅菌處理。為了保證三七含量和微生物限度檢測(cè)合格，應(yīng)采用其他消毒滅菌方法。

[1]方茂水，鐘 彬．對(duì)三七片原料藥材滅菌方法的探討[J]．基層中藥雜志，1995，9（2）:17．

[2]黃朋納，潘育方．高壓蒸汽滅菌對(duì)三七中有效成分的影響[J]．科技資訊，2006(12)：254．

[3]國(guó)家藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典（一部）[M]．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：11-12．

[4]國(guó)家藥典委員會(huì)．2010年版中華人民共和國(guó)藥典第一增補(bǔ)本《丹七片》[M]．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2012：14．