綠原酸對體外培養的人鼻咽癌細胞株CNE-1的作用

姚素艷，李全勝，鄭德宇

(1. 遼寧醫學院病理生理學教研室，遼寧錦州 121001；2. 盤錦市中心醫院耳鼻喉科，遼寧盤錦 124000；3. 遼寧醫學院解剖學教研室，遼寧錦州 121001)

◇中醫藥研究◇

綠原酸對體外培養的人鼻咽癌細胞株CNE-1的作用

姚素艷1，李全勝2，鄭德宇3

(1. 遼寧醫學院病理生理學教研室，遼寧錦州 121001；2. 盤錦市中心醫院耳鼻喉科，遼寧盤錦 124000；3. 遼寧醫學院解剖學教研室，遼寧錦州 121001)

目的 探討綠原酸(chlorogenic acid, CHA)對體外培養狀態下人鼻咽癌細胞株CNE-1的作用及其機制。方法 在無菌狀態下復蘇人鼻咽癌細胞株CNE-1，取傳4代的細胞，向培養基內加入CHA，使其終濃度達到0、25、50、100、200、500 μmol/L，應用CCK-8體外抑制實驗進行篩選CHA的最佳抑癌濃度。選擇CHA最佳抑癌濃度，作用于CNE-1細胞系。檢測人鼻咽癌細胞株CNE-1中端粒酶活性、抑癌基因p27和p16的表達、細胞周期蛋白(cyclin D1)和細胞周期蛋白依賴激酶(CDK4)的表達。結果 經CCK-8體外抑制實驗進行篩選CHA的最佳抑癌濃度為100 μmol/L。人鼻咽癌細胞株CNE-1的培養基中加入終濃度為100 μmol/L的CHA，維持10 d，CNE-1細胞株中其端粒酶活性為1.621，遠低于試劑盒中的陽性對照和未處理的CNE-1細胞株，差異具有統計學意義(P<0.01)。應用CHA處理CNE-1細胞株10 d后，抑癌基因p27和p16均有少量的表達，而在陽性對照組(HT1080細胞)和未處理的CNE-1細胞幾乎沒有表達。應用CHA處理CNE-1細胞株10 d后，cyclin D1和CDK4的表達量與陽性對照組(HT1080細胞)和未處理的CNE-1細胞相比明顯降低。結論 應用100 μmol/L CHA 10 d，可以降低CNE-1細胞株端粒酶活性、增加抑癌基因的表達，降低細胞周期蛋白的表達。CHA對人鼻咽癌細胞株CNE-1的作用是通過活化抑癌基因和抑制細胞周期蛋白的表達來實現的。

綠原酸；鼻咽癌；抑癌基因；細胞周期蛋白；端粒酶；p27；p16

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)是我國最常見頭頸部惡性腫瘤，是威脅人類健康的十大惡性腫瘤之一[1-2]。由于鼻咽部特殊的解剖學位置，發病時多為中晚期，手術根治非常困難[3-4]。臨床上手術治療只是一種輔助治療手段，放療或放化綜合治療已成為鼻咽癌的主要治療手段。研究發現p27和p16均為抑癌基因，在各種類型的腫瘤細胞中，幾乎都有p27蛋白的表達降低[5]。……