瘢痕疙瘩間充質干細胞的分離與培養及其生長曲線的研究

宋海峰，劉 濤，張衍國

(第四軍醫大學唐都醫院皮膚科，陜西西安 710038)

◇技術方法研究◇

瘢痕疙瘩間充質干細胞的分離與培養及其生長曲線的研究

宋海峰，劉 濤，張衍國

(第四軍醫大學唐都醫院皮膚科，陜西西安 710038)

目的 探索獲得瘢痕疙瘩來源的高純度間充質干細胞(MSCs)的培養方法。方法 來源于第四軍醫大學唐都醫院皮膚科住院的4例患者的瘢痕疙瘩標本，所取病變部位均位于前胸及后背皮膚，采用DMEM∶F12/(100 mL/L)胎牛血清(FBS)初步培養，再改用低糖DMEM/(100 mL/L)FBS培養，接著用低糖DMEM/(10 mL/L)FBS培養，最后用無血清的干細胞培養基(SCM)培養，并通過觀察細胞形態特征及應用流式細胞術檢測細胞表面標記物的表達情況進行鑒定。結果 經血清梯度培養后得到了長梭形、形態均一，純度較高的纖維樣細胞，經流式細胞儀檢測后細胞表面標記物表達情況為：CD29為99.99%，CD44為99.7%，CD45為0.69%，CD73為99.96%。結論 血清濃度逐漸降低的梯度培養法可獲得高純度的瘢痕疙瘩MSCs。

瘢痕疙瘩；間充質干細胞；CD29；CD44；CD45；CD73；細胞生長曲線

瘢痕分為生理性瘢痕和病理性瘢痕，而病理性瘢痕又分為增生性瘢痕和瘢痕疙瘩。瘢痕疙瘩主要由局部創傷和表皮異位等造成真皮損失和膠原的異常聚集所致，在臨床上表現為呈“蟹足樣”浸潤性生長[1]。一般不自行萎縮，切除后易于復發，但一般不會發生轉移和惡變[2]。目前瘢痕疙瘩的發病機制不清，也無理想的治療方法[3]。而間充質干細胞(mesenchymal stem cells, MSCs)是來源于早期中胚層的一類多能干細胞，目前已經從骨髓、骨膜、皮膚等組織處分離得到MSCs[4]。……