甲基化特異性多重連接探針擴增及甲基化特異性PCR診斷Prader-Willi綜合征方法比較

王 薇，魏 珉，宋紅梅，邱正慶，施惠萍，趙時敏

中國醫學科學院 北京協和醫學院 北京協和醫院兒科， 北京 100730

·論 著·

甲基化特異性多重連接探針擴增及甲基化特異性PCR診斷Prader-Willi綜合征方法比較

王 薇，魏 珉，宋紅梅，邱正慶，施惠萍，趙時敏

中國醫學科學院 北京協和醫學院 北京協和醫院兒科， 北京 100730

目的 應用甲基化特異性PCR(methylation-specific PCR，MS-PCR)和甲基化特異性多重連接探針擴增(methylation-specific multiplex ligation-dependent probe amplification，MS-MLPA)方法對Prader-Willi綜合征(Prader-Willi syndrome，PWS)進行診斷并比較兩種方法的差異。方法 回顧性研究2005年10月至2014年2月到北京協和醫院就診的患兒及正常對照共102例，男57例，女45例。其中正常對照16例；熒光原位雜交或高分辨染色體確診PWS陽性對照2例；臨床疑似PWS患兒84例。提取受試者外周血基因組DNA分別應用MS-PCR及MS-MLPA方法進行基因分析，對疑似患兒進行確診和遺傳類型分型，并計算兩種方法的特異性、敏感性及準確度，應用卡方檢驗對兩種方法進行比較。結果 MS-PCR結果示正常對照及陽性對照與其表型全部相符，84例疑似患兒中有39例提示為PWS，45例提示正常。MS-MLPA結果示除正常對照外的86例受試者中，29例提示為父源缺失型PWS；9例提示為母源二體型PWS；47例提示為正常；1例因DNA過于陳舊未檢出有效結果。對比兩種方法檢測結果，有2例MS-PCR結果顯示為PWS，但MS-MLPA結果顯示為正常，通過增加DNA用量重新進行MS-PCR檢測后，除外PWS。結合臨床表現，受試者中明確診斷PWS的患兒39例，非PWS者63例。MS-PCR方法共出現2例假陽性，假陽性率為3.17%(2/63)。MS-PCR方法敏感性100%，特異性96.83%,準確度98.03%；MS-MLPA方法敏感性97.43%，特異性100%，準確度99.02%。兩種方法的敏感性、特異性及準確度差異無統計學意義(P均>0.05)。結……