高效液相色譜法測定小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏含量

侯 均

(湖北省黃石市第二人民醫院，湖北 黃石 435002)

小兒氨酚黃那敏顆粒為復方制劑，組分為對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏、人工牛黃，用于小兒感冒引起的頭痛、發熱、咽喉痛、鼻塞等。國家藥品標準(試行)[1]僅對對乙酰氨基酚進行了含量測定，未對馬來酸氯苯那敏進行含量測定。為進一步控制藥品質量，筆者對馬來酸氯苯那敏進行了含量測定，現報道如下。

1 儀器與試藥

德國產KNAUER 型高效液相色譜儀(K-501 泵、K-2501 紫外檢測器);LAC-214 型電子天平。乙腈為色譜純(天津四友精細化學品有限公司);水為注射用水;磷酸、十二烷基硫酸鈉分析純(上海化學試劑采購供應站五聯化工廠);馬來酸氯苯那敏對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為100047 -200305，供含量測定用);小兒氨酚黃那敏顆粒(黃石飛云制藥有限公司，批號為20060801，20060802，20060803)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱:Lichrospher C18柱(200 mm×4.6 mm，5 μm);流動相:乙腈-0.5%十二烷基硫酸鈉溶液-磷酸(60 ∶40 ∶0.1);流速:1.0 mL/min;檢測波長:210 nm;進樣量:20 μL。理論板數按氯苯那敏峰計算應不低于3 000。

2.2 溶液制備

稱取馬來酸氯苯那敏對照品適量，精密稱定，加流動相稀釋成質量濃度為10 μg/mL 的溶液，即得對照品溶液。取本品10 袋，稱定質量，混勻，研細，精密稱取適量(約相當于0.5 mg 的馬來酸氯苯那敏)，置50 mL 容量瓶中，加流動相40 mL，超聲處理(功率250 W，頻率33 kHz)30 min，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液。

2.3 方法學考察

專屬性試驗:取缺馬來酸氯苯那敏的陰性對照品，按供試品溶液的制備方法制得陰性對照品溶液，按擬訂色譜條件進樣測定。結果陰性對照品溶液在馬來酸氯苯那敏峰位置處無吸收峰，色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

線性關系考察:精密量取馬來酸氯苯那敏對照品21.25 mg，置100 mL 容量瓶中，加流動相適量溶解后稀釋至刻度，搖勻，精密量取3，5，10，15，20 mL，分別加流動相至100 mL，搖勻，各進樣20 μL，測定峰面積，以峰面積(Y)為縱坐標、質量濃度(X)為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程Y=0.205X-0.187，r=0.999 5(n=5)。結果表明，馬來酸氯苯那敏質量濃度在6.37 ～42.50 μg/mL 范圍內與峰面積呈良好線性關系。

精密度試驗:取同一對照品溶液，連續進樣6 次，測定氯苯那敏峰面積。結果的RSD 為0.32%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩定性試驗:取同一供試品溶液，在室溫下放置0，2，4，8，12，24 h 后分別進樣，測定氯苯那敏的峰面積。結果的RSD 為0.31%(n=6)，表明供試品溶液在24 h 內穩定性良好。

重復性試驗:取同一批(批號為20120801)樣品，依法測定6 次。結果馬來酸氯苯那敏含量為標示量的98.01%，RSD 為0.33%(n=6)，表明方法重復性良好。

加樣回收試驗:精密稱取已測定含量的樣品9 份(批號為20120801，含量為161.2 μg/g)，精密加入對照品溶液2，3，4 mL(質量濃度為152.92 μg/mL)，按供試品溶液制備方法進行處理，測定含量，并計算回收率。結果見表1。

表1 馬來酸氯苯那敏加樣回收試驗結果(n=9)

2.4 樣品含量測定

取樣品3 批，按擬訂方法測定樣品含量。結果批號為20120801，20120802，20120803 的3 批樣品中，馬來酸氯苯那敏的含量(標示量)分別為97.99%，97.82%，97.48%，RSD 分別為0.68%，0.75%，0.72%。

3 討論

與文獻[2]報道的流動相體系比較，采用乙腈-0.5%十二烷基硫酸鈉溶液-磷酸(60 ∶40 ∶0.1)流動相體系所得色譜圖，馬來酸氯苯那敏的峰形優，分離效果好，保留時間適中。

供試品溶液和對照品溶液中，馬來酸氯苯那敏呈解離狀態存在，故在色譜圖中出現有馬來酸峰。因此，在馬來酸氯苯那敏含量測定時以氯苯那敏峰面積來計算。

在預試驗中，分別采用了加熱回流和超聲波提取的方法，以正交試驗的方法對小兒氨酚黃那敏顆粒中馬來酸氯苯那敏含量進行測定。結果加熱回流和超聲波提取在含量上基本一致，為簡化操作，選擇超聲波提取，根據正交試驗結果確定了小兒氨酚黃那敏顆粒供試品溶液的制備方法。

[1] WS-10001 -(HD-0214)-2002，國家藥品標準(試行)[S].

[2] 翟 紅，丁子杰，趙紅旗，等. 反相高效液相色譜法測定咳特靈膠囊中馬來酸氯苯那敏的含量[J]. 時珍國醫國藥，2002，13(10):595-596.