新生兒血流感染病原菌分布及耐藥性新趨勢研究

廖旭東

深圳市婦幼保健院檢驗科，廣東 深圳 518028

新生兒的免疫功能還未發育完全，抵抗力差，在出現血流感染時非常容易引發敗血癥。敗血癥是常見的新生兒血流感染，在活產嬰中發生率占0.1%～1.0%[1]，尤其對早產嬰兒來說，敗血癥的發生率更為顯著。因此，臨床在診治新生兒期間，需要對其血流感染情況進行及時了解，在使用或者更換抗生素之前，應及時抽取血樣送檢血培養，以起到有效預防和減少敗血癥發生率的作用[2]。為了探討新生兒血流感染病原菌的分布情況以及耐藥性的新趨勢，本文統計并對照分析了2009年及2012年深圳市婦幼保健院（以下簡稱“我院”）新生兒血流感染病原菌的分布和耐藥性情況，分析結果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用回顧病歷方法收集我院2009年及2012年新生兒血流感染病原菌的分布和耐藥性情況資料。

1.2 診斷方法

在患兒使用或者更換抗生素之前，從頸靜脈、橈靜脈以及股靜脈等不同部位進行2次采血[3]，在無菌操作要求下抽取1～3 mL血液，然后注入有樹脂吸附劑的血培養瓶（由法國生物-梅里埃公司提供），增菌時運用BACTEC9240全自動血培養儀。把陽性報警的血培養瓶在血平板（由安圖綠科生物工程有限公司提供）中轉種，對純菌落分離，在鑒定菌株和藥敏試驗時運用DL-醫學檢驗系統進行補充紙片法[4]。

1.3 評定標準

依照美國臨床和實驗室標準協會（NCCLS）2004年制定的試驗標準對藥敏結果進行判斷，并以大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923以及銅綠假單胞菌ATCC27853為質控菌株。

1.4 統計學方法

應用SPSS 16.0統計學軟件進行數據分析，計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病原菌種類

2009年我院共上報80例新生兒血流感染病例，有9株分離病原菌，分離陽性率為11.2%；2012年共上報110例新生兒血流感染病例，有29株分離病原菌，分離陽性率為26.3%。較2009、2012年我院分離病原菌陽性率明顯升高（P＜0.05）。革蘭陰性需氧桿菌是我院新生兒血流感染的主要病原菌，占近50%，革蘭陽性菌和真菌其次。2009年金黃色葡萄球菌為我院感染率最高的病原菌，2012年轉變為白色念珠菌為我院感染率最高的病原菌，2009年及2012年我院白色念珠菌感染率分別為7.2%、12.3%，即較2009、2012年我院新生兒白色念珠菌感染率明顯升高（P＜0.05）。

2.2 革蘭陰性菌對抗菌藥的耐藥情況

2009年及2012年我院革蘭陰性菌對哌拉西林、頭孢唑啉以及氨芐西林的耐藥率較高。相較于其他抗菌藥，2012年亞胺培南的耐藥率較低（P＜0.05）。對第三代頭孢菌素的耐藥率呈上升趨勢的病原菌有沙雷菌屬、枸櫞酸桿菌屬以及腸桿菌屬。見表1。

2.3 革蘭陽性菌對抗菌藥的耐藥情況

2009年我院3種球菌對萬古霉素均高度敏感，然而2012年出現耐萬古霉素腸球菌（VRE）率為6.3%。2012年我院耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 （MRSA）和表皮葡萄球菌（MRSE）比率分別為79.3%、88.4%，較2009年的74.5%、67.4%均明顯升高（P＜0.05）。見表2。

表1 革蘭陰性菌對各種抗菌藥的耐藥率（%）

表2 革蘭陽性菌對各種抗菌藥的耐藥率（%）

3 討論

血流感染可能會引發全身性感染，并且癥狀比較嚴重，由于新生兒的免疫功能還沒有完全發育，使得其更加容易出現感染，特別是早產兒，非常容易出現菌血癥和敗血癥。2009年我院有80例新生兒發生血流感染，共有9株分離病原菌，分離陽性率為11.2%；2012年我院有110例新生兒血流感染病例，有29株分離病原菌，分離陽性率為26.3%；2012年病原菌分離陽性率明顯高于2009年，差異有統計學意義（P＜0.05），說明我院新生兒感染至2012年明顯增加，提示必須加強對新生兒真菌感染的控制。

2009年及2012年革蘭陰性需氧桿菌是我院新生兒血流感染的主要病原菌，占到了近50%，革蘭陽性菌和真菌其次。這與楊曉華等[1]研究新生兒血培養病原菌分布及耐藥性結果一致，其研究的589例新生兒血培養標本中，共檢測出病原菌228株，總陽性率為6.35%，其中革蘭陰性菌194株，占總分離率的85.09%，這充分說明革蘭陰性需氧桿菌是造成新生兒血流感染的主要病原菌。在本研究中，金黃色葡萄球菌是2009年我院新生兒血流感染中分離率最高的病原菌，而到了2012年轉變為白色念球菌分離率最高，其所占的比例由2009年的7.2%上升到了2012年的12.3%。一般認為，葡萄球菌是最為常見的一種化膿細菌，在自然界中廣泛分布。相關研究表明，葡萄球菌是醫務人員身上攜帶最多的病菌，是醫院交叉感染的重要來源，具有較強的致病性和耐藥性。而白色念珠菌是霉菌的一種，可存在于人體口腔、上呼吸道以及陰道和腸道中，在正常者集體中數量較少，不容易引起疾病，但是新生兒免疫能力較差，防御力下降，會導致正常菌群的失調，從而導致大量細菌的繁殖引發疾病。

新生兒免疫功能低下，對于各種病菌的抵抗能力較差，容易感染。2009～2012年我院新生兒血流真菌感染率越來越高，已經成為感染的首要致病菌。通過白色念珠菌、細菌以及抗菌藥三者之間關系的體外實驗可以得出，抗菌藥殺死或者抑制正常菌群中的敏感菌株時，會引發微生態出現失衡情況，減弱了生物屏障的作用，白色念珠菌就會大量繁殖，從而使得菌群失調而出現真菌感染[5]。因此，要想預防新生兒血流的真菌感染，合理使用抗菌藥是關鍵所在，應當引起臨床醫師的重視。

具有廣泛耐藥性的致病菌在國內外都是一個棘手的問題。大量研究證實，葡萄球菌對磺胺類、紅霉素類和苯唑西林的耐藥性均在60%以上，因而對于新生兒敗血癥的治療藥物已經不能夠首選紅霉素、苯唑西林、青霉素等藥物。雖然葡萄球菌對氯霉素和環丙沙星的耐藥性在33%以下，還沒有發現耐萬古霉素的葡萄球菌，但是經國內的研究證明，耐萬古霉素的葡萄球菌株已經被發現。本研究顯示，革蘭陰性菌對氨芐西林的耐藥率較高，對第二代頭孢菌素的耐藥率也在50%以上，對第三代頭孢菌素的耐藥性呈增長勢頭。與未加酶抑制劑者相比，革蘭陰性菌對加酶抑制劑的抗菌藥敏感性高，這說明產酶菌在我院革蘭陰性菌感染中比例較高。據相關資料調查顯示，血流感染的首要病原菌為凝固酶陰性葡萄球菌，在總細菌數當中，凝固酶陰性葡萄球菌占到了43%[6]。然而因為凝固酶陰性葡萄球菌是一個正常菌群，臨床上在對新生兒采血中如果延長了操作時間抑或沒有充分消毒都會形成污染，凝固酶陰性葡萄球菌是最為常見的污染菌。但是由于凝固酶陰性葡萄球菌能夠生產毒力因子，致病性高，同時在凝固酶陰性葡萄球菌耐藥性日趨增加的形勢下，對于新生兒這一抵抗力較弱的群體來說，就愈發顯示出了它的致病性[7]。革蘭陰性桿菌的耐藥機制主要包括以下幾個方面：①抗菌藥物的靶位數目和作用靶位改變，使病菌不與抗菌藥物相結合；②病菌產生鈍化酶或者滅活酶，從而使抗菌藥物的結構改變或者使抗菌藥物失活，導致不能夠殺滅病菌；③革蘭陰性菌會使細菌細胞壁的通透性改變，使抗菌藥物藥性不能夠進入病菌體內；④病菌通過主動排外作用，將藥物排出病菌體外；⑤細菌分泌的細胞外多糖蛋白復合物能夠將細菌自身包圍，形成細菌生物被膜，也會使革蘭陰性菌產生耐藥性。

目前，耐甲氧西林葡萄球菌引發的感染發病率不斷增加成為了革蘭陽性菌耐藥的突出表現[8]，這也成為了一個世界性的難題。在本研究當中，MRSA和MRSE的發病率由2009年的74.5%和67.4%上升到2012年的79.3%和88.4%，其中，與MRSA的上升幅度相比，MRSE的上升幅度比較明顯。由于VRE的主要危害不只是尚無抗菌藥治療由它引起的感染，更為重要的是它可以把萬古霉素耐藥的基因向毒力更強的金黃色葡萄球菌進行傳遞，對新生兒造成的威脅更大[9]。基于此，對VRE所引發的感染進行預防與控制有著重要意義。

總之，為了對細菌耐藥性的增長速度進行控制，要適時增加對產超廣譜β內酰胺酶菌和一些耐藥率明顯增高的新生兒血流感染病原菌的監測[10]，并提升抗菌藥的應用管理。廣大醫務人員要提高自身的消毒意識，勤洗手，杜絕交叉感染的機會。另外，要防止抗生素濫用或者抗生素過度使用，這也將成為以后臨床工作中的重點。

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[9]譚雪梅.臨床常見革蘭陰性桿菌感染的耐藥性分析[J].檢驗醫學與臨床，2013，10（6）：694-695.

[10]呂金娥，許云敏，杜艷.新生兒重癥監護室腸桿菌科產碳青霉烯酶株的耐藥性分析[J].檢驗醫學與臨床，2013，10（6）：732-733.