海藻多糖對肝癌小鼠的相關因子作用

陳愛東 朱正日 陳東麟

海藻多糖對肝癌小鼠的相關因子作用

陳愛東 朱正日 陳東麟

目的 研究海藻多糖對肝癌小鼠模型中TNF-a和VEGF表達的影響，從而分析該藥物的臨床應用價值。方法 采用接種H22肝癌細胞株的種植瘤小鼠模型，通過灌胃給藥大、中、小劑量的海藻多糖對其體內腫瘤細胞生長的影響，陽性組給予豬苓多糖，模型對照組給予相同體積的0.9%氯化鈉注射液。ELISA法檢測對肝癌小鼠模型外周血血清中TNF-a和VEGF含量的影響。結果 海藻多糖各劑量組均對肝癌細胞生長有抑制作用，能夠提高肝癌小鼠外周血血清中TNF-a及減少VEGF的含量，此現象以中劑量為佳。結論 海藻多糖在小鼠體內具有抑制肝癌小鼠模型癌細胞增殖和擴散的作用。

海藻多糖；TNF-a；VEGF；肝癌

肝癌是我國常見的腹部好發的惡性腫瘤，平均患病年齡為43.7歲。肝癌惡性程度既高又發展迅速，若不積極治療或者治療方案不妥，患病后生存年限不超過半年。肝癌早期無癥狀，一旦發病表現出病理特征，大部分已是晚期，因此，給疾病的診治帶來了很大的困難，這也是其病死率高的另一因素，鑒于以上該疾病的特點，探尋一種能夠針對發病后，對其轉移和惡化有極大遏制作用的一種良藥，通過外界藥物的干預延長患者生存時間和控制癌細胞轉移[1]。

1 材料與方法

1.1 藥品和試劑 海藻多糖（青島大學醫學院制備）；肝素鈉（靈泰藥業提供）；豬苓多糖；TNF-a和VEGF測試劑盒（哈爾濱海霞試劑公司）。

1.2 實驗動物 SPF級健康昆明種小鼠，體重（20.0 ±2.0）g，雌雄各半，H22肝癌細胞種鼠。

1.3 儀器 電子天平（上海科技發展公司）；電熱恒溫水浴鍋（四川泰陽儀器公司）；微量移液器（成都儀器廠）；TD5M-WS型臺式低速離心機（北京宏遠醫療器械公司）。

1.4 實驗方法 將接種了H22肝癌細胞株的小鼠40只小鼠隨機分為五組，每組8只，分別對小鼠進行灌胃給藥。藥物為海藻多糖大（200 mg/kg）劑量組、中（100 mg/kg）劑量組、小（50 mg/kg）劑量組，陽性組給豬苓多糖100 mg/kg，模型對照組給予相同體積的0.9%氯化鈉注射液，連續給藥15 d。最后給藥當天將小鼠處死，眼球取血，檢測血清中TNF-a和VEGF含量。海藻多糖對小鼠外周血血清TNF-a和VEGF的測定（ELISA法）。

1.5 統計學分析 采用SPSS 18.0軟件處理，計量數據由（±s）表示，樣本比較采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

由表1實驗數據可得，海藻多糖大、中、小劑量組對腫瘤均有抑制作用，使TNF-a的含量升高，同時使VEGF含量下降，以中劑量組最為明顯，差異有統計學意義（P＜0.01）。

表1 海藻多糖對肝癌小鼠外周血清中TNF-a和VEGF含量的影響(±s)

表1 海藻多糖對肝癌小鼠外周血清中TNF-a和VEGF含量的影響(±s)

注：與陽性組比較*P＜0.01

組別 劑量[mg(kg·d)]TNF-a(μg/ml) VEGF(μg/ml)模型照組 - 23.0±1.5*3.4±0.4*陽性組 100 31.0±1.3*1.4±0.3*低劑量組 50 25.3±1.7*1.6±0.4*中劑量組 100 27.6±1.8*1.7±0.4*高劑量組 200 26.9±1.4*1.6±0.4*

3 討論

海藻多糖是多糖的混合物[2]。目前的研究主要集中于其所包含的糖單元及含量層次上。其重要功能大致有對機體免疫器官的調節作用、抗腫瘤、抗氧化、抗病毒、抗菌抗炎等。有資料記載，抗腫瘤作用主要是由于其可以激活機體的免疫系統，提高機體自身的抗腫瘤能力，釋放腫瘤殺傷的生物因子，間接起到控制腫瘤增長和轉移的效果。

豬苓多糖[3]早已應用于抗腫瘤領域中，本實驗中，通過復制H22肝癌疾病模型，對照比較不同劑量對腫瘤動物的體內相關因子檢測進一步判斷海藻多糖拮抗癌細胞增殖的效果，結果表明，海藻多糖各劑量組對腫瘤均有抑制作用，數據顯示可以使TNF-a的含量升高，同時使VEGF含量不同程度下降，以中劑量組最為明顯，結合TNF-a和VEGF對腫瘤生長和轉移的生物學效應可以得出，該藥物對肝癌的發生發展有一定的影響，希望通過更多的實驗證實其具體機制。

[1] Bazan JF,Bucon KB,Hardiman G,et al.A new class of membranebound chemokine with a CX3C motif[J].Nature,2007(385):640-644.

[2] 季宇彬,高世勇,張秀娟,等.羊棲菜多糖抗腫瘤作用及其作用機制的研究[J].中國海洋藥物雜志,2004(4):7-7.

[3] 徐紅薇,李波,田景先.豬苓多糖與IL-2協同誘導PBMC殺傷腫瘤細胞活性的實驗研究[J].中國免疫學雜志,1998,14(2):109- 111.

R322.4+7

A

1673-5846(2014)07-0227-02

黑龍江牡丹江醫學院紅旗醫院，黑龍江牡丹江 157011