大孔樹脂AB-8純化短梗五加果實中 的花色苷

郝婧瑋+趙玥琪+孫曉薇++楊金昕+柴軍紅+宛春雷

摘要：通過靜態吸附實驗，考察大孔樹脂AB-8對短梗五加果實中花色苷的最優純化條件。在pH值為4、溫度20℃、鹽濃度為2%時達到最優吸附，2小時達到吸附平衡；以 70%的乙醇溶液作為解析液，解吸平衡的時間為3小時；其吸附率和解吸率分別是86.59%、31.94%。

關鍵詞：大孔樹脂；短梗五加果實；花色苷；靜態吸附

基金項目：牡丹江師范學院校級項目——短梗五加果實高效利用工藝研究

項目編號：QY201219

中圖分類號：TS254.4 文獻標識碼：A 文章編號： 1674-0432（2014）-11-32-2

1 短梗五加及其花色苷

短梗五加，五加科五加屬落葉灌木或小喬木植物[1]，葉和果分別入藥?；ㄉ帐穷慄S酮——以黃酮核為基礎的一類物質中能呈現紅色的一族化合物[2]，因功能獨特，可用于清除體內自由基、抗腫瘤、抗癌、抗炎、抑制脂質過氧化和血小板凝集、預防糖尿病、減肥、保護視力等[3]。對利用PC、TLC、HPLC等技術測定花色苷結構有過報道[4]。

2 材料與方法

2.1 實驗用品

短梗五加果實（風干）、AB-8大孔樹脂、鹽酸、乙醇、氫氧化鈉、氯化鈉等、電子天平、微型植物粉碎機、超聲波清洗器、紫外可見分光光度計。

2.2 實驗方法

2.2.1大孔樹脂預處理采用一般方法預處理的樹脂用于樣品提取相同的體積分數乙醇浸泡4小時以上，濾除乙醇溶液，蒸餾水清洗直到檢測不到樹脂內的乙醇殘留。樹脂置于具塞廣口瓶，平衡24小時。

2.2.2濕樹脂絕干量測定稱取一定量AB-8濕樹脂3~5克×2份，于105±3℃烘干至恒重，計算絕干樹脂量。樹脂含水率計算公式如下：■

式中： α是含水率(%)； Wwet表示樹脂濕重(g)； Wdry表示樹脂干重（克）。

2.2.3 樣品溶液制備短梗五加果實（風干）100克，經粉碎后，pH在3.5以下，超聲提取50分鐘后，過濾，得到目標組分溶液。

2.2.4 靜態吸附 取5份絕干重為2.0克樹脂，分別加入同濃度過量的目標組分溶液各50毫升。水浴恒溫振蕩，其條件為：恒定溫度25 ℃，搖床搖動頻率為100 rpm，進行連續操作24小時。重復三次，取平均值。測定吸光值。

2.2.5 靜態解吸吸附達到平衡后，在吸附飽和樹脂中分別加入濃度20%、40%、60%、80%、100%的乙醇溶液50毫升，利用水浴恒溫振蕩器進行解吸附試驗，解吸條件為：恒定溫度25 ℃，搖床搖動頻率為100 rpm和連續操作24小時。重復3次，取平均值。測定解吸附溶液的吸光值。計算解吸率，公式如下： ■

式中：β是解吸率（%）；A0是吸附液初始質量濃度的吸光值；A1是吸附液剩余質量濃度的吸光值；A2是解吸液質量濃度吸光值。

2.2.6 靜態吸附時間曲線 取經過預處理的上述樹脂2.0克（絕干重），加入同濃度過量的目標組分溶液50毫升，瓶口保鮮膜密封。水浴恒溫振蕩，第0.5小時、1小時、1.5小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時分別取樣1毫升。測定吸光值。計算吸附率，公式如下：■

式中： ω是吸附率（%）；A0是吸附液初始質量濃度的吸光值；A1是吸附液剩余質量濃度的吸光值。

2.2.7 靜態解吸時間曲線 取上述2.2.6飽和吸附樹脂，過濾出溶液。精密加入50毫升已確定的洗脫溶劑，震蕩不同時間。第0.5小時、1小時、1.5小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時分別用移液槍取樣1毫升。測定吸光值。

2.2.8 pH對吸附的影響 以稀鹽酸或稀氫氧化鈉溶液將目標組分溶液調至不同pH后（pH＝1、2、3、4、5、6、7、8、9），分別加入2.0g的AB-8樹脂（絕干重），振蕩吸附。

2.2.9 鹽效應對吸附量的影響 取目標組分溶液，加入氯化鈉使其在溶液中的質量濃度分別為2%、3%、4%、5%，加入2.0g的AB-8樹脂（絕干重），振蕩吸附。

2.2.10 溫度對靜態飽和吸附率的影響取4份2.0 克樹脂（絕干重）置于錐形瓶中，加入同濃度過量的目標組分溶液各50毫升，在不同溫度下（0℃、20℃、30℃、40℃）振蕩吸附，每0.5小時取樣1毫升檢測。

3 結果與分析

3.1 AB-8樹脂的靜態吸附和解吸能力

經2.2.4實驗，測得AB-8樹脂分離花色苷吸附率為87.80%。從不同濃度乙醇對樹脂解析的吸光值可知70%乙醇解析能力較優。不同濃度乙醇解析率分別為11.11%、23.61%、27.78%、31.94%、29.17%。

3.2 靜態吸附動力學曲線

吸附速率也是評定樹脂性質的重要因素[5]。由圖3-1可知，吸附速率隨時間的增長而增加，在2小時左右AB-8樹脂達到吸附平衡。

3.3 靜態解吸動力學曲線

解吸速率隨時間的增長而增加，在3小時左右AB-8樹脂達到解析平衡。

3.4 pH值對靜態吸附的影響

pH值不論是在實驗中還是在工業生產中，都有著重要作用[6]。 AB-8大孔樹脂在25℃、振蕩頻率100rpm吸附3小時的情況下，進行實驗操作。當pH值為4時，吸附率最高，可達到86.59%。

3.5 鹽效應對吸附量的影響

AB-8大孔樹脂在25℃、振蕩頻率100rpm吸附3小時的情況下，進行實驗操作。隨著鹽濃度的增加，吸附率降低。綜合考慮，加入氯化鈉質量濃度為2%較好。

3.6 溫度對靜態吸附的影響

考察了不同溫度下的吸附率。由圖3-2可知，當溫度為20℃時，為最佳吸附率。

4 結論

通過實驗，得到如下結果：最優吸附條件為在pH值為4，溫度20℃、鹽濃度為2%時2小時達到吸附平衡；解吸條件70%的乙醇溶液，解吸平衡的時間為3小時；其吸附率和解吸率分別是86.59%、31.94%。

參考文獻

[1] 王冬梅,尉芹,馬希漢.大孔吸附樹脂在藥用植物有效成分分離中的應用[J]. 西北林學院學報,2002,(1).

[2]劉洋.刺五加主要活性成分的提取分離及微粉化制備[D].哈爾濱：東北林業大學,生命科學與技術學院,2010.

[3] 姜平平,呂曉玲,朱惠麗.花色苷類物質分離鑒定方法[J].中國食品添加劑,2003,（4）:108-109.

[4] 董函竹,劉沛溢,譚天偉.發酵生產S-腺苷-L-蛋氨酸培養條件的優化研究[J].微生物學通報,2006,33(1):110-113.

[5] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京：化學化工出版社, 2005:143-144.

[6] 陳勇,張晴.AB-8大孔吸附樹脂吸附和分離紫甘薯色素的研究[J].中國食品添加劑,2001,（1）:6-9.

作者簡介：郝婧瑋，碩士學歷，牡丹江師范學院生命科學與技術學院，助教，研究方向：植物化學與植物藥。

摘要：通過靜態吸附實驗，考察大孔樹脂AB-8對短梗五加果實中花色苷的最優純化條件。在pH值為4、溫度20℃、鹽濃度為2%時達到最優吸附，2小時達到吸附平衡；以 70%的乙醇溶液作為解析液，解吸平衡的時間為3小時；其吸附率和解吸率分別是86.59%、31.94%。

關鍵詞：大孔樹脂；短梗五加果實；花色苷；靜態吸附

基金項目：牡丹江師范學院校級項目——短梗五加果實高效利用工藝研究

項目編號：QY201219

中圖分類號：TS254.4 文獻標識碼：A 文章編號： 1674-0432（2014）-11-32-2

1 短梗五加及其花色苷

短梗五加，五加科五加屬落葉灌木或小喬木植物[1]，葉和果分別入藥。花色苷是類黃酮——以黃酮核為基礎的一類物質中能呈現紅色的一族化合物[2]，因功能獨特，可用于清除體內自由基、抗腫瘤、抗癌、抗炎、抑制脂質過氧化和血小板凝集、預防糖尿病、減肥、保護視力等[3]。對利用PC、TLC、HPLC等技術測定花色苷結構有過報道[4]。

2 材料與方法

2.1 實驗用品

短梗五加果實（風干）、AB-8大孔樹脂、鹽酸、乙醇、氫氧化鈉、氯化鈉等、電子天平、微型植物粉碎機、超聲波清洗器、紫外可見分光光度計。

2.2 實驗方法

2.2.1大孔樹脂預處理采用一般方法預處理的樹脂用于樣品提取相同的體積分數乙醇浸泡4小時以上，濾除乙醇溶液，蒸餾水清洗直到檢測不到樹脂內的乙醇殘留。樹脂置于具塞廣口瓶，平衡24小時。

2.2.2濕樹脂絕干量測定稱取一定量AB-8濕樹脂3~5克×2份，于105±3℃烘干至恒重，計算絕干樹脂量。樹脂含水率計算公式如下：■

式中： α是含水率(%)； Wwet表示樹脂濕重(g)； Wdry表示樹脂干重（克）。

2.2.3 樣品溶液制備短梗五加果實（風干）100克，經粉碎后，pH在3.5以下，超聲提取50分鐘后，過濾，得到目標組分溶液。

2.2.4 靜態吸附 取5份絕干重為2.0克樹脂，分別加入同濃度過量的目標組分溶液各50毫升。水浴恒溫振蕩，其條件為：恒定溫度25 ℃，搖床搖動頻率為100 rpm，進行連續操作24小時。重復三次，取平均值。測定吸光值。

2.2.5 靜態解吸吸附達到平衡后，在吸附飽和樹脂中分別加入濃度20%、40%、60%、80%、100%的乙醇溶液50毫升，利用水浴恒溫振蕩器進行解吸附試驗，解吸條件為：恒定溫度25 ℃，搖床搖動頻率為100 rpm和連續操作24小時。重復3次，取平均值。測定解吸附溶液的吸光值。計算解吸率，公式如下： ■

式中：β是解吸率（%）；A0是吸附液初始質量濃度的吸光值；A1是吸附液剩余質量濃度的吸光值；A2是解吸液質量濃度吸光值。

2.2.6 靜態吸附時間曲線 取經過預處理的上述樹脂2.0克（絕干重），加入同濃度過量的目標組分溶液50毫升，瓶口保鮮膜密封。水浴恒溫振蕩，第0.5小時、1小時、1.5小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時分別取樣1毫升。測定吸光值。計算吸附率，公式如下：■

式中： ω是吸附率（%）；A0是吸附液初始質量濃度的吸光值；A1是吸附液剩余質量濃度的吸光值。

2.2.7 靜態解吸時間曲線 取上述2.2.6飽和吸附樹脂，過濾出溶液。精密加入50毫升已確定的洗脫溶劑，震蕩不同時間。第0.5小時、1小時、1.5小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時分別用移液槍取樣1毫升。測定吸光值。

2.2.8 pH對吸附的影響 以稀鹽酸或稀氫氧化鈉溶液將目標組分溶液調至不同pH后（pH＝1、2、3、4、5、6、7、8、9），分別加入2.0g的AB-8樹脂（絕干重），振蕩吸附。

2.2.9 鹽效應對吸附量的影響 取目標組分溶液，加入氯化鈉使其在溶液中的質量濃度分別為2%、3%、4%、5%，加入2.0g的AB-8樹脂（絕干重），振蕩吸附。

2.2.10 溫度對靜態飽和吸附率的影響取4份2.0 克樹脂（絕干重）置于錐形瓶中，加入同濃度過量的目標組分溶液各50毫升，在不同溫度下（0℃、20℃、30℃、40℃）振蕩吸附，每0.5小時取樣1毫升檢測。

3 結果與分析

3.1 AB-8樹脂的靜態吸附和解吸能力

經2.2.4實驗，測得AB-8樹脂分離花色苷吸附率為87.80%。從不同濃度乙醇對樹脂解析的吸光值可知70%乙醇解析能力較優。不同濃度乙醇解析率分別為11.11%、23.61%、27.78%、31.94%、29.17%。

3.2 靜態吸附動力學曲線

吸附速率也是評定樹脂性質的重要因素[5]。由圖3-1可知，吸附速率隨時間的增長而增加，在2小時左右AB-8樹脂達到吸附平衡。

3.3 靜態解吸動力學曲線

解吸速率隨時間的增長而增加，在3小時左右AB-8樹脂達到解析平衡。

3.4 pH值對靜態吸附的影響

pH值不論是在實驗中還是在工業生產中，都有著重要作用[6]。 AB-8大孔樹脂在25℃、振蕩頻率100rpm吸附3小時的情況下，進行實驗操作。當pH值為4時，吸附率最高，可達到86.59%。

3.5 鹽效應對吸附量的影響

AB-8大孔樹脂在25℃、振蕩頻率100rpm吸附3小時的情況下，進行實驗操作。隨著鹽濃度的增加，吸附率降低。綜合考慮，加入氯化鈉質量濃度為2%較好。

3.6 溫度對靜態吸附的影響

考察了不同溫度下的吸附率。由圖3-2可知，當溫度為20℃時，為最佳吸附率。

4 結論

通過實驗，得到如下結果：最優吸附條件為在pH值為4，溫度20℃、鹽濃度為2%時2小時達到吸附平衡；解吸條件70%的乙醇溶液，解吸平衡的時間為3小時；其吸附率和解吸率分別是86.59%、31.94%。

參考文獻

[1] 王冬梅,尉芹,馬希漢.大孔吸附樹脂在藥用植物有效成分分離中的應用[J]. 西北林學院學報,2002,(1).

[2]劉洋.刺五加主要活性成分的提取分離及微粉化制備[D].哈爾濱：東北林業大學,生命科學與技術學院,2010.

[3] 姜平平,呂曉玲,朱惠麗.花色苷類物質分離鑒定方法[J].中國食品添加劑,2003,（4）:108-109.

[4] 董函竹,劉沛溢,譚天偉.發酵生產S-腺苷-L-蛋氨酸培養條件的優化研究[J].微生物學通報,2006,33(1):110-113.

[5] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京：化學化工出版社, 2005:143-144.

[6] 陳勇,張晴.AB-8大孔吸附樹脂吸附和分離紫甘薯色素的研究[J].中國食品添加劑,2001,（1）:6-9.

作者簡介：郝婧瑋，碩士學歷，牡丹江師范學院生命科學與技術學院，助教，研究方向：植物化學與植物藥。

摘要：通過靜態吸附實驗，考察大孔樹脂AB-8對短梗五加果實中花色苷的最優純化條件。在pH值為4、溫度20℃、鹽濃度為2%時達到最優吸附，2小時達到吸附平衡；以 70%的乙醇溶液作為解析液，解吸平衡的時間為3小時；其吸附率和解吸率分別是86.59%、31.94%。

關鍵詞：大孔樹脂；短梗五加果實；花色苷；靜態吸附

基金項目：牡丹江師范學院校級項目——短梗五加果實高效利用工藝研究

項目編號：QY201219

中圖分類號：TS254.4 文獻標識碼：A 文章編號： 1674-0432（2014）-11-32-2

1 短梗五加及其花色苷

短梗五加，五加科五加屬落葉灌木或小喬木植物[1]，葉和果分別入藥?；ㄉ帐穷慄S酮——以黃酮核為基礎的一類物質中能呈現紅色的一族化合物[2]，因功能獨特，可用于清除體內自由基、抗腫瘤、抗癌、抗炎、抑制脂質過氧化和血小板凝集、預防糖尿病、減肥、保護視力等[3]。對利用PC、TLC、HPLC等技術測定花色苷結構有過報道[4]。

2 材料與方法

2.1 實驗用品

短梗五加果實（風干）、AB-8大孔樹脂、鹽酸、乙醇、氫氧化鈉、氯化鈉等、電子天平、微型植物粉碎機、超聲波清洗器、紫外可見分光光度計。

2.2 實驗方法

2.2.1大孔樹脂預處理采用一般方法預處理的樹脂用于樣品提取相同的體積分數乙醇浸泡4小時以上，濾除乙醇溶液，蒸餾水清洗直到檢測不到樹脂內的乙醇殘留。樹脂置于具塞廣口瓶，平衡24小時。

2.2.2濕樹脂絕干量測定稱取一定量AB-8濕樹脂3~5克×2份，于105±3℃烘干至恒重，計算絕干樹脂量。樹脂含水率計算公式如下：■

式中： α是含水率(%)； Wwet表示樹脂濕重(g)； Wdry表示樹脂干重（克）。

2.2.3 樣品溶液制備短梗五加果實（風干）100克，經粉碎后，pH在3.5以下，超聲提取50分鐘后，過濾，得到目標組分溶液。

2.2.4 靜態吸附 取5份絕干重為2.0克樹脂，分別加入同濃度過量的目標組分溶液各50毫升。水浴恒溫振蕩，其條件為：恒定溫度25 ℃，搖床搖動頻率為100 rpm，進行連續操作24小時。重復三次，取平均值。測定吸光值。

2.2.5 靜態解吸吸附達到平衡后，在吸附飽和樹脂中分別加入濃度20%、40%、60%、80%、100%的乙醇溶液50毫升，利用水浴恒溫振蕩器進行解吸附試驗，解吸條件為：恒定溫度25 ℃，搖床搖動頻率為100 rpm和連續操作24小時。重復3次，取平均值。測定解吸附溶液的吸光值。計算解吸率，公式如下： ■

式中：β是解吸率（%）；A0是吸附液初始質量濃度的吸光值；A1是吸附液剩余質量濃度的吸光值；A2是解吸液質量濃度吸光值。

2.2.6 靜態吸附時間曲線 取經過預處理的上述樹脂2.0克（絕干重），加入同濃度過量的目標組分溶液50毫升，瓶口保鮮膜密封。水浴恒溫振蕩，第0.5小時、1小時、1.5小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時分別取樣1毫升。測定吸光值。計算吸附率，公式如下：■

式中： ω是吸附率（%）；A0是吸附液初始質量濃度的吸光值；A1是吸附液剩余質量濃度的吸光值。

2.2.7 靜態解吸時間曲線 取上述2.2.6飽和吸附樹脂，過濾出溶液。精密加入50毫升已確定的洗脫溶劑，震蕩不同時間。第0.5小時、1小時、1.5小時、2小時、3小時、4小時、5小時、6小時、7小時、8小時分別用移液槍取樣1毫升。測定吸光值。

2.2.8 pH對吸附的影響 以稀鹽酸或稀氫氧化鈉溶液將目標組分溶液調至不同pH后（pH＝1、2、3、4、5、6、7、8、9），分別加入2.0g的AB-8樹脂（絕干重），振蕩吸附。

2.2.9 鹽效應對吸附量的影響 取目標組分溶液，加入氯化鈉使其在溶液中的質量濃度分別為2%、3%、4%、5%，加入2.0g的AB-8樹脂（絕干重），振蕩吸附。

2.2.10 溫度對靜態飽和吸附率的影響取4份2.0 克樹脂（絕干重）置于錐形瓶中，加入同濃度過量的目標組分溶液各50毫升，在不同溫度下（0℃、20℃、30℃、40℃）振蕩吸附，每0.5小時取樣1毫升檢測。

3 結果與分析

3.1 AB-8樹脂的靜態吸附和解吸能力

經2.2.4實驗，測得AB-8樹脂分離花色苷吸附率為87.80%。從不同濃度乙醇對樹脂解析的吸光值可知70%乙醇解析能力較優。不同濃度乙醇解析率分別為11.11%、23.61%、27.78%、31.94%、29.17%。

3.2 靜態吸附動力學曲線

吸附速率也是評定樹脂性質的重要因素[5]。由圖3-1可知，吸附速率隨時間的增長而增加，在2小時左右AB-8樹脂達到吸附平衡。

3.3 靜態解吸動力學曲線

解吸速率隨時間的增長而增加，在3小時左右AB-8樹脂達到解析平衡。

3.4 pH值對靜態吸附的影響

pH值不論是在實驗中還是在工業生產中，都有著重要作用[6]。 AB-8大孔樹脂在25℃、振蕩頻率100rpm吸附3小時的情況下，進行實驗操作。當pH值為4時，吸附率最高，可達到86.59%。

3.5 鹽效應對吸附量的影響

AB-8大孔樹脂在25℃、振蕩頻率100rpm吸附3小時的情況下，進行實驗操作。隨著鹽濃度的增加，吸附率降低。綜合考慮，加入氯化鈉質量濃度為2%較好。

3.6 溫度對靜態吸附的影響

考察了不同溫度下的吸附率。由圖3-2可知，當溫度為20℃時，為最佳吸附率。

4 結論

通過實驗，得到如下結果：最優吸附條件為在pH值為4，溫度20℃、鹽濃度為2%時2小時達到吸附平衡；解吸條件70%的乙醇溶液，解吸平衡的時間為3小時；其吸附率和解吸率分別是86.59%、31.94%。

參考文獻

[1] 王冬梅,尉芹,馬希漢.大孔吸附樹脂在藥用植物有效成分分離中的應用[J]. 西北林學院學報,2002,(1).

[2]劉洋.刺五加主要活性成分的提取分離及微粉化制備[D].哈爾濱：東北林業大學,生命科學與技術學院,2010.

[3] 姜平平,呂曉玲,朱惠麗.花色苷類物質分離鑒定方法[J].中國食品添加劑,2003,（4）:108-109.

[4] 董函竹,劉沛溢,譚天偉.發酵生產S-腺苷-L-蛋氨酸培養條件的優化研究[J].微生物學通報,2006,33(1):110-113.

[5] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京：化學化工出版社, 2005:143-144.

[6] 陳勇,張晴.AB-8大孔吸附樹脂吸附和分離紫甘薯色素的研究[J].中國食品添加劑,2001,（1）:6-9.

作者簡介：郝婧瑋，碩士學歷，牡丹江師范學院生命科學與技術學院，助教，研究方向：植物化學與植物藥。