銀屑病性關節炎“風濕三項”與外周血T細胞 表達及其相關性

溫麗英，冀春萍，李曉東

銀屑病性關節炎“風濕三項”與外周血T細胞 表達及其相關性

溫麗英，冀春萍，李曉東

目的探討“風濕三項”與外周血T細胞在銀屑病性關節炎中的表達及其相關性。方法2010年7月—2013年10月收治的54例銀屑病性關節炎患者為觀察組，另選56例健康體檢人員為健康對照組。檢測并比較2組患者的類風濕因子(RF)、C反應蛋白(CRP)、抗鏈球菌溶血素O(ASO)的水平，外周血T細胞(Th1、Th2、Th17、Treg)表達情況。結果觀察組銀屑病性關節炎患者血清中RF、CRP、ASO水平均顯著高于健康對照組，差異均有統計學意義(P均<0.05)；外周血Th1、Th17表達均高于健康對照組，Treg細胞表達低于健康對照組，差異均有統計學意義(P均<0.05)；銀屑病性關節炎外周血Th1細胞表達與RF、CRP相關(P<0.05)，Th2細胞表達與CRP相關，Th17細胞表達與RF、ASO相關，Treg細胞表達與風濕三項均無相關性(P>0.05)。結論銀屑病性關節炎外周血Th1表達與RF、CRP相關，Th2表達與CRP相關，Th17表達與RF、ASO相關，Treg表達與風濕三項表達無相關性。

風濕三項；外周血T細胞；銀屑病性關節炎；檢測；相關性

銀屑病性關節炎是一種慢性全身性自身免疫性疾病，與銀屑病密切相關，其病因至今不明，但是可以確定的是該病復發性強，具有遷延難愈等特點。其基本癥狀通常表現為關節不對稱性損害，患者皮膚亦會遭到不同程度的損害。本文通過對血液中類風濕因子(RF)、C反應蛋白(CRP)、抗鏈球菌溶血素O(ASO)“風濕三項”和外周血T細胞表達等指標進行研究，以期能對該病早期診斷提供幫助。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 按銀屑病性關節炎的診斷標準[1]，收集2010年7月—2013年10月我院皮膚科新診斷的銀屑病性關節炎患者54例作為觀察組，排除有惡性腫瘤史、慢性感染史及嚴重心、肺、腎、胃腸道、神經疾病患者。其中男28例，女26例；年齡10～65(35.6±3.3)歲；病程5～20(12.5±3.2)年。另選同期健康體檢者56例作為健康對照組，均無慢性感染史和關節痛疼史，其中男32例，女24例；年齡15～60(32.5±3.2)歲。2組患者的性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。入選者均知情同意，并簽署知情同意書。

1.2 觀察指標與檢測方法

1.2.1 血漿RF、CRP和ASO檢測： 取晨空腹靜脈血3 ml，經3 500 r/min離心分離技術對血液進行分離提取血漿，對血漿中RF、CRP和ASO含量進行分析。RF采用散射比濁法，所使用Nephstar蛋白分析儀由深圳生物技術工程有限公司提供，若定量檢測顯示結果>50 IU/ml為陽性；CRP采用透射比濁法，使用70GD生化分析儀進行定量分析，結果>30 IU/ml為陽性；ASO采用乳膠凝聚法，由上海生物技術有限公司合約贊助，嚴格按照說明書步驟進行操作，若在3 min內出現凝聚的顆粒則為陽性。需特別注意對RF檢測時，需應用專用試管并滴加適量抗凝劑，震蕩幅度不宜過大。

1.2.2 外周血Th1、Th2、Th17、Treg細胞表達檢測： 在無菌狀態下采集靜脈血10 ml放入肝素鈉抗凝管中檢測Th表達：稀釋血液，常規提取PBMC，1∶1加入PBS，以1 500 r/min分離，放置8 min，清除上清液，加入2 ml的1640培養基，吹打均勻，按照上述步驟洗細胞，清除上清液，然后加入1 ml的1640培養基定容，加入FACS液體2 ml，離心，棄上清液，反復幾次后，放入流式細胞儀進行檢測。在流式管中加入PBS 400 μl進行分析，按照前向角和側向角對淋巴細胞設門，取門內大約5 000個細胞進行分析，統計Th1、Th2、Th17、Treg細胞百分數(%)。

2 結 果

2.1 2組“風濕三項”水平的比較 觀察組RF、CRP、ASO均顯著高于健康對照組(P均<0.05)。見表1。

表1 2組血漿“風濕三項”水平的比較

2.2 2組Th細胞表達比較 與健康對照組比較，觀察組Th1、Th17細胞表達明顯升高(P<0.05)，Th2細胞表達無差異(P>0.05)，Treg細胞表達明顯降低(P<0.05)。見表2。

表2 2組Th細胞表達情況比較

2.3 外周血細胞表達與血漿“風濕三項水平”的相關性 銀屑病性關節炎外周血Th1細胞表達與RF、CRP高度相關，Th2細胞表達與CRP高度相關，Th17細胞表達與RF中度相關，與ASO高度相關，Treg細胞表達與風濕三項均無相關性(P>0.05)。見表3。

表3 Th1、Th2、Th17、Treg與RF、CRP、ASO的相關性

3 討 論

銀屑病性關節炎是一種慢性全身性自身免疫性疾病，具有復發性強、遷延難愈等特點。目前，治療銀屑病性關節炎的方法雖然較多，但其根本性根除的概率較低[2]。通過調查研究可知，銀屑病性關節炎是一種嚴重的慢性關節炎[3]。如果未能早期及時發現，治療可能會導致多關節毀損，影響健康，建議早發現早治療[4～7]。

RF是由變性IgG刺激機體后產生的自身抗體，CPR是一種免疫調節因子，可以激活補體經典途徑，ASO是鏈球菌感染機體后產生的針對菌體代謝產物鏈球菌溶血素O的抗體，本研究結果顯示，觀察組風濕三項的含量明顯比健康對照組高。符合報道結果[8]，表明銀屑病性關節炎與血漿RF、CRP、ASO含量有著比較緊密的聯系。

RF、CRP和ASO在銀屑病性關節炎患者血清中的陽性率較健康者水平高，“風濕三項”陽性可作為判斷銀屑病性關節炎的依據。外周血T細胞表達差異有統計學意義，表明其在銀屑病性關節炎發病中起著非常重要的作用。同時研究得出，銀屑病性關節炎外周血Th1細胞表達與RF、CRP高度相關，Th2細胞表達與CRP高度相關，Th17細胞表達與RF中度相關，與ASO高度相關，Treg細胞表達與“風濕三項”均無相關性。

綜上所述，“風濕三項”與銀屑病性關節炎的發生發展有著相當緊密的聯系，外周血T細胞在銀屑病性關節炎發病中起著非常重要的作用，很可能為銀屑病性關節炎發病機制的研究和臨床診治提供新方向。

1 陳虹霞，鄒先彪．甲銀屑病的診斷與治療研究進展[J]．中華皮膚科雜志，2013，46(3)：213-215．

2 Adien E, Aral A, Aybay C, et al. Anti-infliximab antibody status and its relation to clinical response in psoriatic patients:a pilot study[J]. J Dermatol, 2010, 37(8): 708-713.

3 依那西普治療類風濕關節炎和強直性脊柱炎專家組．依那西普治療類風濕關節炎和強直性脊柱炎的專家建議(2013)[J]．中華醫學雜志，2013，93(18)：1363-1369．

4 王志中，王勇，李軍梅，等．血清MMP-3、TIMP-1與單核細胞CD147在濕熱痹阻及寒濕痹阻型類風濕關節炎中的意義[J]．中國中西醫結合雜志，2013，33(6)：770-773．

5 Ursini F, Naty S, Russo E, et al. Abatacept in psoriatic arthritis: Case report and short review[J]. J Pharmacol Pharmacother, 2013, 4(Suppl 1): S29-S32.

6 Alasan MB, Van Den Bosch OF,Creemers MC,et al.Prevalence of methotrexate intolerance in rheumatoid arthritis and psoriatic arthritis[J]. Arthritis Res Ther, 2013, 15(6): 217-218.

7 Vega-Villanueva K, Cortez-Bazán N, Alvarado-Molina A. The use of ustekinumab in refractory treatment of psoriatic arthritis[J]. Rev Bras Reumatol, 2013, 53(5): 448-449.

8 王敏，黃志祥，譚錦輝，等．重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體-抗體融合蛋白局部注射治療膠原誘導性關節炎大鼠的療效觀察[J]．中華醫學雜志，2013，93(37)：2989-2992．

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10.3969/j.issn.1671-6450.2014.06.030

2014-01-23)