蒲寶嬋,李愛主,方 玲
(天津中醫藥大學,天津 300193)
近年來,原發性痛經發病率逐年升高,臨床上開始用經前3~7 d給藥來代替傳統的生理周期用藥[1-3],且以連續治療3個月經周期為1療程[4-5]。本文根據這一臨床治療方法,在前期工作基礎上[6-7],通過動物實驗來觀察不同時機給藥對原發性痛經模型小鼠雌激素受體(ER-α)和縮宮素受體(OTR)表達的影響。
經前3劑止痛方JQF(當歸、益母草、川芎、赤芍、桂枝),購自天津保康醫院,并經生藥學鑒定;元胡止痛片,天津同仁堂集團股份有限公司(30 mg/片)。給藥劑量均參考了臨床用藥劑量,并根據體表面積折算成小鼠每日給藥劑量所得。KM小鼠,雌性未孕,18~22 g,SPF級,購自北京華阜康實驗動物技術有限公司,實驗動物許可證:SCXK(京)2013-0004。苯甲酸雌二醇注射液,寧波市三生藥業有限公司(2 mL∶4 mg,生產批號:120904);縮宮素注射液,上海禾豐制藥有限公司(1 mL∶10 u,生產批號:130115)。OTR和ER-α均購自北京博奧森生物技術有限公司,RT-PCR 試劑盒,美國Promega公司;BCA蛋白定量試劑盒,碧云天生物技術公司;凝膠成像分析儀(Cuene Genins);實時定量PCR儀(Linegene9620),杭州博日科技有限公司。
2.1 造模與給藥 60只小鼠按體質量分層隨機分為JQF整個動情周期給藥組(以下簡稱JQF動情周期給藥組)、JQF每個周期的第4天給藥組(以下簡稱JQF第4天給藥組)、元胡止痛片組、模型組和正常組,每組12只。根據小鼠動情周期天數[8],將造模時間定為6 d,除正常組外各組小鼠每日皮下注射苯甲酸雌二醇0.2 mg/只。JQF動情周期給藥組(0.218 g/kg)和元胡止痛片組(0.1 g/kg)每日灌胃給以相應藥物(0.2 mL/10 g),連續6 d,JQF第4天給藥組(0.218 g/kg)小鼠每個周期的第4天開始給藥至周期結束(共3 d),正常組和模型組每日灌胃相應體積的生理鹽水。……