林蛙油中激素類成分的GC-MS分析

肖井雷，康 嵐，朱鍵勛，姜大成

(長春中醫藥大學，長春 130117)

林蛙油為中國林蛙(RanatemporariachensinensisDavid)雌蛙的干燥輸卵管，又稱哈蟆油，是一種藥食同源的珍貴佳品[1]。氣質聯用法(GC-MC)被廣泛應用于復雜樣品的定性定量鑒別，其方法具有靈敏度高、速度快、時間短、精密度高及效能高等特點。激素類成分在臨床中廣泛使用，尤其是雌激素類成分可以在婦女進入絕經期后升高體內的雌激素水平，用來預防或治療婦女更年期綜合癥等疾病[2]。本實驗利用GC/MS方法對林蛙油中激素類成分進行定性定量分析。

1 儀器與試劑

QP2010 GC-M氣質聯用儀(日本島津), 配不分流毛細管柱進樣器及GC/MS化學工作站；HH-4數顯恒溫水浴鍋(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司)；DT5-2型低速臺式離心機(北京時代北利離心機有限公司)；FA10048電子天平(上海佑科有限公司)。氯仿(分析純)，乙腈(分析純)，石油醚(分析純)，甲醇(分析純)，氯化鈉，無水硫酸鈉等。林蛙油為自行剝取的林蛙輸卵管，林蛙采購于吉林省撫松縣，干燥后備用，本品經長春中醫藥大學中藥鑒定教研室姜大成教授鑒定為中國林蛙(RanatemporariachensinensisDavid)雌蛙的輸卵管。

2 實驗方法

2.1 林蛙油供試品溶液的制備 準確稱取林蛙油粉末試樣2.0 g，加入0.5 g氯化鈉，加15 mL氯仿和5 mL水，勻漿1 min后，超聲30 min，置于離心機中5 000 r/min離心10 min,上層水液棄去，取氯仿層，再次加入氯仿和水重復1次。合并氯仿層,加入適量無水硫酸鈉去除水分，過濾于蒸發皿中，揮干氯仿，用10 mL乙腈溶解至離心管中，加入3 mL石油醚混勻后，3 000 r/min離心2 min，棄去石油醚層，重復一次至下層無色，于65 ℃水浴蒸干，加2 mL甲醇混勻，即得[3-4]。……