鹿茸多肽對(duì)人膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率及細(xì)胞周期的影響

徐 巖，許佳明，何 璐，姬朝光，黃曉巍*

(1.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)，長(zhǎng)春 130117；2.吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，長(zhǎng)春 130021)

鹿茸多肽是從新鮮鹿茸中提取的一類多肽類物質(zhì)，具較強(qiáng)的生物活性，鹿茸多肽具促進(jìn)細(xì)胞修復(fù)，誘導(dǎo)細(xì)胞分化等多重作用[1]，并具有抗腫瘤等作用[2]。盡管鹿茸多肽抗腫瘤的確切機(jī)制尚不十分清楚，但研究表明，鹿茸多肽的抗腫瘤作用可能通過(guò)不同的信號(hào)傳導(dǎo)通路，抑制腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤新生血管形成，抑制腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移。鹿茸多肽對(duì)人膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖抑制作用及細(xì)胞周期調(diào)節(jié)作用未見(jiàn)報(bào)道。

1 材料與方法

1.1 材料 細(xì)胞系，人膠質(zhì)瘤細(xì)胞(U251)腫瘤細(xì)胞系由吉林大學(xué)免疫學(xué)系保存；鹿茸多肽，長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心提供；碘化丙啶PI(美國(guó)Sigma公司)，以PBS配制成1.0 mg/mL濃度，過(guò)濾除菌后避光備用；MTT(美國(guó)Gibco公司)，臨用前以PBS配制成5 mg/mL濃度，過(guò)濾除菌后避光備用；二甲基亞砜DMSO和0.25%胰蛋白酶(美國(guó)Amresco公司)；RPMI-1640(美國(guó)Gibco公司)；標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清(杭州四季青生物科技有限公司)。

1.2 儀器 標(biāo)準(zhǔn)超凈工作臺(tái)(蘇凈集團(tuán)安泰公司)；MCO-17AIC型CO2孵箱(日本三洋公司)；DT5-3型低速自動(dòng)平衡離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠)；倒置顯微鏡(日本OLYMPUS公司)；Multiskan Ascent酶標(biāo)儀(芬蘭Labsystems公司)；BD FACSCanto II流式細(xì)胞儀(美國(guó)BD Biosciences)。

1.3 方法

1.3.1 U251細(xì)胞株傳代培養(yǎng)條件 U251細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)在含有10%胎牛血清、青霉素100 U/mL、鏈霉素100 mg/L的RPMI 1640完全培養(yǎng)液中。在37 ℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)傳代培養(yǎng)，0.25%胰蛋白酶消化，每2～3天消化1次，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。

1.3.2 試劑的配制 將鹿茸多肽溶解在PBS配制成1.0 mg/mL濃度，過(guò)濾除菌后，分裝后-20 ℃?zhèn)溆谩！?br>