絕經后骨質疏松大鼠顱骨改變的實驗研究

聶巍++高鶯++焦艷軍

【摘要】目的：為探討絕經后骨質疏松癥對顱骨造成的影響，建立去勢大鼠模型，觀察其顱骨骨密度、骨礦含量以及組織學改變。方法：取2月齡未交配雌性SD大鼠40只，隨機分為2組：A組為實驗組20只，行雙側卵巢摘除術；B組為對照組20只，行假手術。模型建立完成后3個月處死大鼠，取顱骨，雙能X線檢測骨密度及骨礦含量，HE染色觀察骨微觀結構變化。結果：雙側卵巢摘除術后3個月，大鼠顱骨骨密度：實驗組為0.333±0.006g/cm2，對照組為0.402±0.035g/cm2；骨礦含量：實驗組為：2.185±0.047g，對照組為：2.553±0.180g，兩組骨密度（BMD）及骨礦含量具有明顯差異（P<0.05）。結論：雙側卵巢摘除術所造成的絕經后骨質疏松癥可引起大鼠顱骨骨密度、骨質量明顯下降。

【關鍵詞】絕經后骨質疏松；顱骨；骨密度；骨質量

The change of skulls from postmenopausal osteoporosis rats

[Abstract]Objective：To explore the effects of osteoporosis on the skull，we established animal model of postmenopausal osteoporosis and observed the changes of skulls in bone mineral density，bone mineral content，and histology.Method：2-month-old female SD rats （n=40） were randomly divided into 2 groups：the experimental group underwent bilateral ovariectomy；the control group underwent sham operation.Three months after the operation，all rats were sacrificed and skulls were harvested.DEXA method was used to detect bone mineral density and bone mineral content，while HE staining was performed to access the trabeculae.Result：Bone mineral density：the experimental group was （0.333±0.006）g/cm2，the control group was （0.402±0.035）g/cm2；bone mineral content：the experimental group was （2.185±0.047）g，the control group was （2.553±0.180）g.The data were statistically significant（P<0.05）.Conclusion：Postmenopausal osteoporosis may result in obvious decrease in the bone mass and bone density of skulls.

[Key words]Postmenopausal osteoporosis；skull；bone mass；bone density

絕經后骨質疏松癥是一種常見的骨骼系統疾病，主要發生在絕經后中老年婦女，由于雌激素缺乏引起骨量減少、骨組織結構變化、易發生骨折，可能導致骨骼變形、骨痛，甚至發生死亡[1]。臨床上，骨質疏松癥患者常常表現為脊椎、髖部、前臂、腕骨等部位骨折，相關研究較為多見，但關于骨質疏松癥患者顱骨改變卻鮮見文獻報道。因此，本實驗中通過摘除大鼠雙側卵巢建立絕經后骨質疏松動物模型，觀察其顱骨骨密度、骨質量發生的相應變化，以期為骨質疏松癥患者臨床診斷及預防提供實驗依據。

資料與方法

實驗動物：選擇SD大鼠（由山西醫科大學生理教研室提供）40只，2個月齡（180～200g），雌性，隨機分為兩組，每組20只，A組為實驗組，行雙側卵巢摘除術；B組為對照組，行假手術。

絕經后骨質疏松動物模型建立：使用10%水合氯醛按1mg/kg的劑量行大鼠腹腔內注射麻醉，背部消毒，在正中行縱切口，分別切開皮膚、皮下、肌層，分別在兩側行小切口進入腹腔，實驗組完整摘除雙側卵巢；對照組切除卵巢周圍脂肪組織，分層縫合。所有大鼠飼養條件一致，單籠喂養，喂以標準飼料，自由攝食。

樣本檢測：①顱骨骨密度及骨礦含量測定：模型建立后3個月后，將實驗動物于4%戊巴比妥鈉按1mg/kg腹腔麻醉，以雙能X線骨密度測定儀（DEXA）作顱骨骨密度及骨礦含量測定。②HE染色：每組取顱骨編號，剔除表面軟組織，4%多聚甲醛固定48小時、10%EDTA-Na2/0.1MPBS（ph7.40）室溫下脫鈣5周（每2天更換脫鈣液），乙醇梯度脫水，石蠟包埋，5μm組織切片，HE染色，Olympus BH-2型顯微鏡下觀察骨小梁形態。

統計學方法：采用SPSS 19.0統計軟件對兩組各項指標進行數據分析，計量資料數據用均數±標準差（ ±s）表示，采用獨立樣本t檢驗進行分析。P<0.05認為差異有統計學意義。

結果

骨密度：DXA法檢測骨密度，實驗組動物顯著低于對照組動物，且P<0.05，差異有統計學意義。

骨礦含量：DXA法檢測骨礦含量，實驗組動物顯著低于對照組動物，且P<0.05，差異有統計學意義。

HE染色：雙側卵巢摘除術后3個月，可見實驗組（圖A）與對照組（圖B）相比，骨質明顯疏松，雌激素缺乏導致骨小梁密度減低，骨質量下降，骨髓腔內松質骨稀薄，分布不均勻，骨小梁呈斷裂狀態。

討論

絕經后骨質疏松癥又稱為Ⅰ型原發性骨質疏松癥，屬高代謝型骨質疏松。本實驗選擇合適月齡的雌性大鼠采用雙側卵巢摘除術建立骨質疏松動物模型，是目前公認的絕經后骨質疏松癥經典病理模型，可以較好的復制出具有臨床特征的絕經后骨質疏松癥[2]。雌激素有抑制破骨細胞活性、減少骨吸收，促進成骨細胞活性、增加骨形成等作用。絕經期后雌激素缺乏，使骨吸收遠快于骨形成，造成骨量不斷丟失，骨偶聯過程失衡，最終導致骨質疏松的發生[3]。

顱骨是容納和保護腦組織的器官，骨質較厚，一般小的暴力不會造成非骨質疏松患者顱骨骨折，較大的暴力或作用點在顱骨的薄弱區才會導致顱骨骨折的發生，但是骨質疏松患者在遇到同樣輕微暴力時即可出現骨折[4]。此外，非骨質疏松患者的顱骨骨折常常在受嚴重暴力時才會合并腦損傷，但在骨質疏松患者受外力的情況下，合并腦損傷的幾率會大大增加。當顱骨骨折并發顱腔內容物的損傷時，所造成的腦及腦血管、顱神經等繼發性損傷較骨折本身嚴重的多。雖不多見，但造成的并發癥往往非常嚴重，需要緊急處理，否則會致命。因此，在密切關注脊椎、四肢骨等承重骨的骨質疏松預防及治療的同時，關注顱骨等非承重骨的改變也尤為重要，不可忽視。

X線平片是目前最常用的和首選檢查方法，但是只有骨量減少超過30%以上才會出現X線的征象[5]。而且，X線片還受到投射條件等多因素的影響，因此X線片對骨質疏松癥患者的早起診斷有一定的限制[6]。本實驗中采用的骨密度檢測方法采用目前國際公認雙能X線吸收法（DXA），可正確判斷骨密度的量化診斷[7]。骨密度的檢測是目前診斷骨質疏松癥的金標準。只有將BMD和骨質疏松癥患者的骨折結合起來，其診治評估才更為準確、客觀[8]。通過骨密度檢測，我們的研究得出結論：不論是骨密度亦或骨礦含量，實驗組動物均顯著低于對照組動物。HE染色結果進一步證實，絕經后大鼠顱骨骨質量明顯下降，骨髓腔內松質骨稀薄且分布不均。

綜上所述，絕經引起顱骨骨質量、骨密度明顯低于正常組，骨質疏松被認為是顱骨骨折的危險因素[9]，探討骨質疏松癥患者顱骨骨組織改變，有利于為骨質疏松癥患者臨床診斷及預防提供一定的實驗依據。

參考文獻

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