血清S-100B蛋白和Par-4 mRNA聯合檢測在新生兒缺氧缺血性腦病中的臨床意義

徐 明，洪 菲

(江蘇省南通市第一人民醫院，江蘇 南通 226000)

血清S-100B蛋白和Par-4 mRNA聯合檢測在新生兒缺氧缺血性腦病中的臨床意義

徐 明，洪 菲

(江蘇省南通市第一人民醫院，江蘇 南通 226000)

目的 研究血清S-100B蛋白和Par-4 mRNA聯合檢測在新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)中的臨床意義。方法 選擇32例新生兒HIE(HIE組)，30例非HIE的窒息新生兒(非HIE組)和12例健康新生兒(正常組)，檢測3組出生后24 h血清S-100B蛋白和Par-4 mRNA表達量，并比較3組實驗指標陽性者與陰性者生后28 d新生兒神經行為測定(NBNA)變化。結果 出生24 h HIE組S-100B蛋白和Par-4 mRNA表達量陽性率顯著高于其他2組(P均<0.05)，HIE組中兩者同時陽性對HIE診斷特異性最高(P<0.05)，且28 d NBNA評分低于單項陽性的2組(P均<0.05)。結論 出生24 h血清S-100B蛋白和Par-4 mRNA表達量與HIE患兒的腦部損傷程度相關，聯合檢測特異性更高。

缺氧缺血性腦病；S-100B蛋白；Par-4 mRNA；新生兒

新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)是由于各種圍生期因素引起的腦缺氧和血流減少或暫停而致胎兒和新生兒腦損傷，是兒童神經系統傷殘的主要原因之一。早期診斷及正確評估其腦細胞損傷的嚴重程度對降低新生兒死亡和減輕神經系統后遺癥有十分重要意義，目前HIE早期診斷的指標較多，包括腦電圖、腦CT、實驗室指標等，但大多數文獻對其單獨檢測在HIE中的臨床意義有報道。本文旨在探討聯合檢測血清S-100B蛋白和Par-4 mRNA在診斷和判斷HIE預后方面的意義，現報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取本院新生兒科2011年1—12月62例生后24 h內以窒息住院新生兒，HIE診斷標準及臨床分度依據《新生兒缺氧缺血性腦病診斷標準》[1]。根據有無HIE分組，其中HIE組32例，男18例，女14例；胎齡36.5～39.5(38.5±2.1)周；出生體質量2.56～4.01(3.36±0.23)kg。 非HIE組30例，男16例，女14例；胎齡36.2～40.1(38.6±2.4)周；出生體質量2.67～3.97(3.39±0.19)kg。并選擇同期本院產科出生24 h內的健康新生兒12例為正常組，男7例，女5例；胎齡36.6～40.3(39±2.5)周；出生體質量2.61～4.03(3.41±0.27)kg，并排除顱內出血、各種先天畸形、遺傳代謝病及失訪等。3組胎齡、體質量、男女構成均無顯著性差異(P均>0.05)。

1.2 方法 對HIE組、非HIE組及正常組的新生兒均在出生24 h抽取靜脈血3 mL，其中2 mL用低溫離心后于-70 ℃儲存待測，采用酶聯免疫吸附試驗，檢測S-100B蛋白；其中1 mL分離外周血中淋巴細胞，用Trizol抽提總RNA，用M-MLV逆轉錄酶合成cDNA，進行PCR擴增，引物為正義：5’-ATCCCCGAACAGATAGAAGT-3’,反義：5’-AAAAGCAGGTTTCCCACAC-3’，PCR產物進行瓊脂糖凝膠電泳，UVP凝膠掃描系統進行掃描，以目的條帶Par-4的A值占內參照GAPDH的A值百分比(%)表示Par-4 mRNA表達水平，分別統計S-100B蛋白陽性、Par-4 mRNA表達量陽性及兩者同時陽性的例數，并計算各自敏感性，特異性。在室溫(22～27 ℃)、半暗的安靜環境中，由經過訓練不知道分組的主治醫師對HIE組患兒進行新生兒神經行為測定(NBNA)，判斷其神經系統功能及估計預后情況。NBNA是由鮑秀蘭等[2]制定的20項新生兒神經測查法，內容包括行為能力6項、被動肌張力4項、主動肌張力4項、原始反射3項和一般評價3項，每項評分有3個度(0，1，2分)，滿分40分，≥35分為正常，<35分為異常。

2 結 果

2.1 3組S-100B蛋白及Par-4 mRNA陽性表達情況比較3組間S-100B蛋白陽性率、Par-4 mRNA表達量陽性率、兩者同時陽性的陽性率比較均有顯著性差異(P均<0.05)。HIE組與非HIE組內S-100B蛋白陽性率與Par-4 mRNA表達量陽性率比較無顯著性差異(P>0.05)，兩者同時陽性率均顯著低于兩者單獨陽性的陽性率，均有顯著性差異(P均<0.05)。見表1。

表1 3組血清S-100B、Par-4 mRNA陽性率比較 %

注:①與HIE組比較，P<0.05；②與S-100B蛋白陽性比較，P<0.05；③與S-100B蛋白陽性比較，P>0.05。

2.2 HIE組S-100B蛋白陽性、Par-4 mRNA表達量陽性、兩者同時陽性的敏感性、特異性的比較 HIE組S-100B蛋白敏感性最高，兩者同時陽性的特異性最高(P均<0.05)。見表2。

表2 HIE組S-100B蛋白陽性、Par-4 mRNA表達量陽性、兩者同時陽性的敏感性及特異性比較 %

注：①與S-100B蛋白比較，P<0.05；②與Par-4mRNA比較，P<0.05。

2.3 HIE組中S-100B陽性、Par-4 mRNA陽性及兩者同陽性的患兒生后28 d NBNA評分比較 兩種實驗指標中陽性和陰性患兒生后28 d NBNA評分比較有顯著性差異(P<0.05)，S-100B蛋白陽性患兒與Par-4 mRNA陽性患兒比較無顯著性差異(P>0.05)，但分別與兩者均陽性的患兒比較有顯著性差異(P<0.05)。見表3。

表3 HIE組中S-100B陽性或Par-4 mRNA表達量陽性、兩者同時陽性患兒生后28 dNBNA評分比較，分)

注：①表示S-100B與Par-4 mRNA表達量同時陰性和兩者之一陰性；②與陰性比較，P<0.05；③與S-100B比較，P>0.05；④與S-100B比較，P<0.05。

3 討 論

HIE是圍生期窒息缺氧導致的缺氧缺血性腦損傷，其發病率高，重癥患兒將會發生腦癱、癲癇等嚴重后遺癥，故早期診斷、早期干預、判斷預后對降低兒童致殘率有重要意義。S-100B蛋白和Par-4 mRNA對HIE的早期診斷、程度和預后的判斷均有較高的臨床價值[3-4]。

S-100B蛋白于1965年由Moore等[5]在牛腦組織中發現。S-100B蛋白主要分布于中樞神經系統的神經膠質細胞中，當中樞神經系統損傷，S-100B蛋白從胞液中滲出進入腦脊液，再經受損的血-腦脊液屏障進入血液，S-100B蛋白增高是中樞神經系統損傷特異和靈敏的生化指標[6]。S-100B蛋白可作為星形細胞的特異性蛋白，在缺氧缺血性腦損傷時有不同程度的升高，其升高程度與病情嚴重程度及預后密切相關。國外研究發現，足月新生兒在發生窒息后24 h內血清S-100B蛋白水平升高，且達到高峰[7-8]。Par-4基因在缺血性腦損害的發病機制中占重要地位，缺氧缺血誘導了外周血淋巴細胞Par-4的基因轉錄，所以HIE患兒外周血淋巴細胞中Par-4 mRNA表達量顯著上調，且與HIE的嚴重程度一致[4]。既往臨床中單獨檢測上述指標敏感性較高，但有一定的假陽性率，對臨床分析病情帶來一定誤導。

在本研究中，生后24 h HIE組新生兒血清S-100B蛋白和Par-4 mRNA表達量陽性率比非HIE組和正常組均升高，非HIE組與正常組比較無顯著性差異，說明血清S-100B蛋白和Par-4 mRNA表達量能明顯預示腦組織損傷的發生。而對HIE診斷的敏感性和特異性評價，S-100B蛋白的敏感性最高，但其特異性最差，而兩者同時陽性的特異性最高，故兩者同時陽性對診斷HIE更有意義。新生兒神經行為測定評分法是我國兒科早教專家鮑秀蘭教授修訂的篩查標準，對篩查腦損傷高危兒及早期評估有較好的價值。NBNA評分可早期發現新生兒因腦損傷所致的神經行為異常，為臨床醫生進行早期診斷提供依據。且早期對HIE患兒進行NBNA評分可以協助判斷HIE患兒顱腦損傷的程度。本研究中S-100B蛋白陽性患兒與Par-4 mRNA表達量陽性患兒生后28 d NBNA評分比較無顯著性差異，但分別與兩者同時陽性的患兒比較有顯著性差異，提示血清S-100B蛋白和Par-4 mRNA表達量同時陽性的患兒預后相對較差。所以兩者同時陽性能更好地反映HIE腦損傷的程度且對預后判斷有一定價值。

綜上所述，聯合檢測HIE患兒血清S-100B蛋白及Par-4 mRNA水平對早期判斷新生兒缺血后腦損傷特異性更高，且對早期判斷預后有一定價值，據此可早期干預以期改善預后，減少后遺癥的發生。

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[2] 鮑秀蘭,孫淑英. 新生兒行為和0-3歲教育[M]. 北京:中國商業出版社,2001:103-105

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10.3969/j.issn.1008-8849.2014.23.029

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2013-08-10