食蟹猴早孕期出血癥狀的初步研究

李比海，羅麗娟，梁興林，金石軍，饒軍華

(廣東藍島生物技術有限公司，廣州 510555)

早孕期的陰道出血，在人類妊娠早期的發生率較高，有研究表明早孕期的陰道出血，導致的早產風險達到了20%，而有關的機制并不明確[1-3]。食蟹猴在生理上與人類比較相近，遺傳物質同源性、中樞系統、呼吸及消化循環系統，與人類都有高度的相似性，是醫學研究中理想的實驗動物[4]。早孕出血癥狀在食蟹猴的妊娠期也常有發生，但對其研究卻很少。這種現象，不能判斷是否是食蟹猴的正常生理現象，在B超確認已經懷孕的情況下會不斷地進行給藥保胎；而在沒有B超等輔助檢查手段時，只通過一般的外觀狀態觀察，認為陰道有血就是月經血，錯誤地判定為猴子正常的月經。本文通過研究食蟹猴的早孕期出血現象及與流產之間的相關性，從而為食蟹猴的相關生殖研究提供一些參考數據，為進一步了解人類的相關機制做基礎。

1 材料和方法

1.1 實驗動物：

由廣東藍島生物技術有限公司提供(實驗動物生產許可證號：SCXK(粵)2009-0010)。健康SPF級雌性食蟹猴78頭：年齡3～8歲，體重3.2 ～ 5.0 kg，其中初產雌性食蟹猴45頭，經產33頭只；配種用健康SPF級雄性食蟹猴12頭只：年齡8 ～ 13歲。試驗期間每頭猴除交配期公母配對合籠外，均單籠飼養(實驗動物使用許可證號：SYXK(粵)2008-0088)，溫度(18～26)℃，光照12 h明暗交替，自動控制系統進行定時排風。

1.2 儀器設備：

B超：意大利百勝(esaote)生產，型號：MyLabTM30CV。

1.3 試劑：

黃體酮注射液(浙江仙琚制藥生產，批號110417)；維生素E(南寧富萊欣生物科技有限公司生產，批號20110206)

1.4 月經觀察

每天上午和下午各1次觀察月經狀況，一般上午觀察時間是在沖洗猴房和單籠之前進行，首先觀察猴籠下糞盤有無血跡，再看會陰外部有無血跡，并使用生理鹽水沖洗食蟹猴會陰口后，使用無菌棉簽擦拭陰道，觀察陰道內有無月經血，有血跡則視為有月經，每次觀察到的出血第1天為此猴本次月經周期第1天(D1)。

1.5 合籠交配

通過雌性食蟹猴的月經期確定交配日，在月經首日后的第12 ～ 14天將雌猴和雄猴按1∶1比例同籠交配3 d，同籠的第二天記為懷孕第0天(GD0)。交配結束后，雌雄分籠。未懷孕雌猴繼續觀察月經周期，并進行下一次交配。

1.6 B超檢查

在雌猴懷孕的第22天觀察到孕囊，即宮內出現圓形的光環和無回聲暗區時判定為懷孕(圖1)。未觀察到孕囊判定為未孕(圖2)。所有雌猴懷孕的第30天，再次進行B超檢查，觀察到胚芽和胎心閃動時可進一步確定該猴懷孕[5]。

1.7 食蟹猴早孕期出血癥狀界定

“1.6”小節中B超檢查已確定的懷孕猴，在這30 d的早孕期間有血樣液體從其陰道流出，則定義該猴有早孕出血癥狀。

1.8 保胎

在有早孕期出血食蟹猴中隨機選擇了10頭進行藥物保胎對照，方法是：黃體酮注射液臀部肌肉注射，10 mg/次，1次/d；其次輔以維生素E拌料(米糊)飼喂，20 mg/次，1次/d；保胎1周。

2 結果

共78頭雌性食蟹猴用于交配。33頭經產雌性食蟹猴懷孕20頭，早孕期出血的有18頭只，早孕期出血率為90%，早孕期出血后3個月內流產的為0頭，早孕期出血引起的流產率為0%；45頭初產雌性食蟹猴懷孕的有20頭，早孕期有出血的有14頭，早孕期出血率為70%，早孕期出血后3個月內流產的為0頭，早孕期出血引起的流產率為0%。綜合初產經產雌性食蟹猴早孕期出血的比例達到了80%；雌性食蟹猴早孕期出血引起的平均流產率是0%。平均月經周期為30.79 d，平均月經天數為2.37 d，早孕期平均出血天數為5.36 d(最長持續13 d，最短為1 d)。

選擇的5頭初產，5頭經產有早孕出血食蟹猴進行保胎(藥物)為對照，10頭猴均沒有流產；而其余22頭有早孕期出血但沒有進行保胎的猴也沒有流產。結果顯示，保胎與不保胎沒有差異性，流產率均為0%。

B超結果，懷孕和未孕食蟹猴子宮B超圖像見圖1和圖2。

圖1 懷孕猴子宮B超圖像

圖2 未孕猴子宮B超圖像

3 討論

食蟹猴早孕出血率達到了80%，與流產率的0%沒有相關性，早孕期陰道出血是食蟹猴的一個正常的生理現象。而藥物保胎的對照結果表明，對早孕期出血的食蟹猴進行藥物保胎是非必要的。

分析食蟹猴早孕期陰道出血這一現象的機制。食蟹猴于懷孕后的第一個月出現陰道出血，而出血的時間剛好是在理論月經期內，從而推測可能是因為胚胎著床后，子宮還有大面積空腔，空腔在激素低的情況下，月經周期正常到來，內膜脫落和更新而出血。早孕期陰道出血時間平均達到了5～6 d，相較于正常的月經時間2～3 d，明顯延長。這一現象，也可能正是因為低激素水平下對子宮內膜的控制失調。而研究過程中，發現早孕期經產猴的出血率高于初產猴，這可能的原因是初產猴身體還處于發育期[6]，孕期激素水平調控能力強于經產猴。

由于食蟹猴與人有高度的相似性，對比將人在早孕期的陰道出血現象視為一類病癥，是導致流產的重要因素[7]提出了質疑。相應的人在早孕月經期內的陰道出血，也可能是在低激素情況下的一個正常現象。

參考文獻：

[1] 李文英，李丹，王強，等. 早孕期出血249例分析[J]. 河北醫藥, 2003, 4(25): 260.

[2] Louis R. Sibal, Kurt J. Samson. Nonhuman Primates: A Critical Role in Current Disease Research [J]. Institute for Laboratory Animal Research Journal, 2001, 2(42): 74-84.

[3] 周美茜，蔡暢，黃引平. 早孕期陰道出血與早產關系的臨床研究[J]. 臨床研究, 2011,49: 40-42.

[4] Gomez R, Romero R, Nien J K, et al. Idiopathic vaginal bleeding during pregnancy as the only clinical manifestation of intrauterine infection[J]. J Matern Fetal Neonatal Med, 2005, 18(1)：31-37.

[5] 李志雄，高玲霞，范春梅, 等. B-型超聲波診斷獼猴早期妊娠[J]. 上海實驗動物科學, 1998, 18(1): 26-28.

[6] 陳翠蓮. 初產母豬和經產母豬營養需要[J]. 廣東飼料, 2013, 6(22): 33-35.

[7] 盧翠云，莫志衛. 妊娠早期陰道出血的相關因素及治療[J]. 齊齊哈爾醫學院學報, 2013, 10(34): 1437-1438.