小鼠內眥靜脈叢注射與尾靜脈注射比較

陳 霆，李楓棣，鄧 巍，秦 川

(中國醫學科學院醫學實驗動物研究所，衛生部人類疾病比較醫學重點實驗室，國家中醫藥管理局人類疾病動物模型三級實驗室，北京 100021)

由于小鼠體型小,生長繁殖快,成本低,易于控制,因此常被用作醫學實驗動物。在各種基礎醫學研究中，為了觀察藥物，新化合物等的藥效毒理；在疾病發生的病因，病機，病理研究中，為了觀察動物的機體功能，代謝以及形態變化，都需要對實驗動物采用一定的給藥方式。而小鼠尾靜脈注射就是其中最常用的方法之一，但小鼠尾靜脈較細,造成穿刺難度較大,因此很大程度上制約了實驗的成功與否。近年來出現了一種新型的小鼠靜脈注射方法卻可以解決這個問題，即小鼠內眥靜脈注射，其操作更簡單，成功率更高，本文即通過分別對小鼠進行尾靜脈注射操作和內眥靜脈注射，對其操作難易程度以及成功率進行對比。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物：4～6周齡SPF級雌性BALB/C小鼠20只，體重14～16 g，來自北京維通利華實驗動物技術有限公司(合格證號：SCXK(京)2012-0001)。實驗場所：中國醫學科學院醫學實驗動物研究所ABSL-3實驗室(注冊號：CNAS BL0010)。

1.1.2 0.9%氯化鈉注射液：石家莊四藥有限公司，批號130531407

1. 1. 3 1 mL注射器

1.2 方法

將動物分成2組，每組10只，一組為尾靜脈注射組，一組為內眥靜脈注射組，由同一實驗人員對兩組分別進行注射，每次每只小鼠注射100 μL0.9%氯化鈉注射液，并分別觀察每組注射的成功率以及所耗費時間。內眥靜脈叢操作方法見圖1：

圖1 小鼠內眥靜脈叢注射實際操作圖

2 結果

該實驗人員為首次進行此兩種靜脈注射方法，實驗前由其他精通此兩種方法的實驗人員為其演示并講解操作要領后分別進行操作。實驗結果見表1：

實驗結果表明，該實驗人員對尾靜脈注射組的成功率僅為40%，而內眥靜脈注射的成功率為100%；而在時間上，內眥靜脈注叢射組所花費的時間明顯要比尾靜脈注射組短很多。

3 討論

本次實驗所用的內眥靜脈叢注射方法與之前所報道過的方法不同，之前有報道過的內眥靜脈叢注射法為使針頭與鼠面成約45°的夾角,然后刺入下眼瞼與眼球之間,刺入深度約2～3 mm,同時固定好小鼠，防止因小鼠掙扎而造成的跑針，但這種操作方法的缺點是，注射是容易將針刺入小鼠淚腺，而使所注入的液體從小鼠鼻腔或口腔流出[1]。本次實驗實用的方法為將小鼠固定好，并使眼球突出于眼眶，使針頭與小鼠眼眶中心處成90°角刺入，刺入深度為2～3 mm，見注射器有回血即可進行注射，這種方法的更易于操作，且成功率高。之前的報道中科研人員還進行過利用這兩種方法對小鼠進行碳廓清實驗[2-3]，碳廓清實驗是測定小鼠機體非特異性免疫功能的常用方法之一,其墨汁注入量的準確性與否是該項實驗能否取得成功的關鍵因素之一。實驗結果表明用內眥靜脈叢注入法注射墨汁測定碳廓清速率與尾靜脈注入法一樣,亦可敏感地反映小鼠的碳廓清能力[2]。通過本實驗可以說明小鼠內眥靜脈叢注射是一種更簡單,更易掌握,且成功率高的小鼠靜脈注射方法，值得推廣。

表1 小鼠內眥靜脈叢注射組與尾靜脈注射組所用時間及成功率

參考文獻：

[1] 王紅梅,馬玲,吳少單,等.比較兩種墨汁注射途徑對免疫低下小鼠廓清實驗的影響[J].中國食品衛生雜志,2003,15:314-316.

[2] 秦光和,景簫,王偉,等. 墨汁的注入途徑不同對小鼠碳廓清實驗的影響[J].毒理學雜志,2007(21)2: 77-78.

[3] 中華人民共和國衛生部.保健食品檢驗和評價技術規范,2003，2,28，29.